Principiul. Numărarea leucocitelor în timpul microscopiei într-un anumit număr de pătrate ale camerei de numărare și calcularea numărului lor în 1 litru de sânge, luând în considerare diluția sângelui și volumul camerei de numărare.
Reactiv: soluție 3-5% de acid acetic, colorată pentru colorarea nucleelor de leucocite cu câteva picături de soluție de albastru de metilen. Soluția are o culoare albastră, poate fi stocată mult timp.
Cursul de determinare. Într-un tub de testare uscat se toarnă 0,4 ml soluție de acid acetic. Se colectează 0,02 ml de sânge dintr-un deget (puteți utiliza sânge venos stabilizat cu anticoagulant). Ștergeți vârful pipetei, apoi suflați sângele de pe ea până la fundul tubului, amestecați, re-formați și suflați amestecul de sânge și reactiv (pipetare). Etichetați tubul și lăsați-l până la numărare. A se păstra un amestec de sânge cu o soluție de acid acetic nu este recomandat mai mult de 2-4 ore.
Sângele diluat într-un tub de testare cu acid acetic, se amestecă bine și se umple cu o cameră de numărare. Camera umplută este lăsată într-o poziție orizontală timp de 1 minut pentru a depune celulele albe din sânge. Fără a schimba poziția orizontală a camerei, acesta este plasat pe scena microscop și la o mărire redusă (ocular 10 ×, lentilă 8 x) contorizează leucocite în pătrate mari 100, ceea ce corespunde la 1600 mici.
Pentru o mai mare acuratețe, leucocitele sunt numărate pe grilă în pătrate mari, care nu se împart în mici pătrate și dungi, plecând de la colțul din stânga sus al grilajului. Pentru un contrast mai bun, întunecați câmpul de vizualizare, lăsând condensatorul și închizând diafragma. Celulele situate în interiorul pătratului și situate pe oricare două linii sunt numărate pentru a nu număra aceeași celulă de două ori.
Calculul numărului de leucocite se efectuează conform formulei:
unde X este numărul de leucocite în 1 μl de sânge; și - numărul de leucocite în 100 de pătrate mari; 20 - diluție de sânge; 100 este numărul de pătrate mari; 250 este factorul de conversie pentru 1 μl, deoarece volumul unui pătrat mare este de 1/250 μl (latura pătratului este de 1/5 mm, înălțimea este de 1/10 mm).
În practică, pentru a calcula numărul de leucocite în 1 ml de sânge în numărul de pătrate mari 100 este multiplicat cu 50, iar în 1 l - valoarea rezultată înmulțită cu 106.
Notă. La numărarea leucocitelor, o eroare este inevitabilă în 6-8% din cazuri.
- Cu un număr mare de normococi în sângele periferic, ele sunt numărate în numărul de leucocite (atât leucocite și normococite - celule nucleate). Pentru a stabili în mod corespunzător numărul de leucocite, din numărul total de celule sanguine nucleate ar trebui să scadă numărul de normocite.
- Erorile rămase sunt similare cu cele care apar atunci când se calculează numărul de celule roșii din camera de numărare.
Calculul leucocitelor
Metoda de numărare în cameră. Luarea și diluarea sângelui produs prin metoda tubului. 0,4 ml din fluidul diluant și 0,02 ml de sânge capilar sunt introduse în tub (de preferință Vidalevskaya). Diluția rezultată este considerată în mod substanțial egal cu 1: 20. Ca lichid de diluare este în mod tipic consumă soluție de acid acetic 3-5% colora cu albastru de metilen (lizeaza de acid acetic eritrocite, leucocite nuclei albastru de metilen a petelor). Înainte de umplerea camerei tubul Goryaeva cu sânge diluat este bine agitat. Camera este umplută în același mod ca și pentru numărarea eritrocitelor.
Leucocitele sunt mult mai mici decât eritrocitele (1-2 pe pătrat mare), prin urmare, pentru corectitudine, numărătoarea este făcută în 100 de pătrate mari (neabsorbite). Calcul: 100 de pătrate mari (1600 mici) sunt numărate drept leucocite.
Amintim că volumul unui pătrat mic este de 1/4000 mm3, iar sângele este diluat de 20 de ori, numărul de leucocite în 1 μl de sânge este calculat: 4000 20 și împărțit la 1600 = a x 1/2. Practic, pentru a obține conținutul efectiv de leucocite în 1 μl de sânge, este suficient să se împartă la jumătate numărul obținut în calcul și să se adauge 2 zerouri. Eroarea medie a metodei este ± 7%.
Mai precis (2-3% eroare) și perfect este numărul de leucocite folosind dispozitive electronice. Numărătoarea leucocitelor în contoarele de particule se efectuează conform aceluiași principiu ca și eritrocitele. Pre-sânge este diluat și amestecat cu orice reactiv lizând celulele roșii din sânge. În analizorul auto "Technicon" se utilizează ca atare o soluție de acid acetic în dispozitivele "Culter" și "Celloskop" - saponină sau sapoglobină, care se adaugă diluat (1: 500, 1: 700) în soluție izotonică de clorură de sodiu diluare).
Stabilirea numărului de leucocite din sânge este efectuată în frotiuri de sânge periferic colorate.
Este mai bine să numărați la cel mai subțire punct de la sfârșitul frotiului, cel puțin 200 de celule (cu excepția leucopeniei pronunțate) și apoi să deduceți raportul procentual al anumitor tipuri de celule albe din sânge. Numărarea este recomandată în aceeași ordine: jumătate din celule trebuie să fie numărate în partea de sus, jumătate în partea de jos a cursei, fără a se deplasa la marginea și la mijloc, zig-zag (3-4 câmpuri de vedere de-a lungul cursei, 3-4 câmpuri în unghi drept la mijlocul cursei, apoi 3-4 câmpuri laterale în paralel cu marginea, din nou în unghi drept în sus și așa mai departe pe o parte).
Pregătirea frotiurilor. Sticla spălată și degresată cu atenție (marginea sa) atinge o picătură de sânge la locul injectării. Smear face sticlă de șlefuire, punându-l la un unghi de 45 ° la diapozitiv în fața picătură. După ce a adus paharul la această picătură, ei așteaptă până când sângele se întinde de-a lungul marginii sale, apoi cu o mișcare ușoară ușoară efectuează înainte sticla de măcinat și nu o îndepărtează de subiectul înainte de a se usca întreaga picătură.
Un frotiu realizat corect are o culoare gălbuie (subțire), nu atinge marginile paharului și se termină cu o urmă (mustață).
Colorarea frotiurilor uscate produse după fixarea preliminară. Cea mai bună fixare este obținută în alcool metilenic absolut (3-5 minute) sau într-un amestec de Nikiforov care are părți egale de etanol absolut și eter (30 minute).
Principalele vopsele hematologice includ albastrul de metilen și derivatul său - azura I (azotă de metilen) și azura II (un amestec de părți egale de azur I și albastru de metilen), la eozina galbenă solubilă în apă.
● Pictura lui Romanovsky-Giemsa. Vopseaua Romanovsky-Giemsa (fabricată din fabrică) are următoarea compoziție: Azur II - 3 g, eozină galbenă solubilă în apă - 0,8 g, alcool metilic 250 ml și glicerină 250 ml. Soluția de vopsea de lucru este preparată la o viteză de 1,5-2 picături de vopsea finită per 1 ml de apă distilată. Vopseaua este turnată într-o frotiu cu un strat posibil mai mare; timpul de colorare - 30-35 de minute După această perioadă, tampoanele se spală cu apă și se usucă în aer. În această metodă, este posibilă diferențierea nucleului bine, dar granularitatea neutrofilă a citoplasmei este mult mai gravă, deci este larg utilizată pentru colorarea frotiului de sânge periferic.
● Colorație combinată May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa conform Pappenheim. Un colorant finit, un fixativ May-Grunwald, care este o soluție de albastru eozinmetilen în alcool metilenic, este pipetat pe un frotiu fix timp de 3 minute. După 3 minute, se adaugă o cantitate egală de apă distilată la vopseaua care acoperă soluția și colorarea este continuată timp de încă un minut. După aceea, vopseaua este spălată și frotiul este uscat în aer. Apoi, frotiu uscat este repetat cu o soluție apoasă proaspăt preparată de vopsea Romanovsky timp de 8-15 minute. Această metodă este considerată cea mai bună, în special pentru frotiurile de măcinare a măduvei.
O creștere a numărului de leucocite din sângele periferic deasupra nivelului normal se numește leucocitoză, o scădere se numește leucopenie. Leucocitoza (leucopenie) este rar caracterizată de o creștere proporțională (scăderea) a numărului de leucocite de toate tipurile, de exemplu, leucocitoză cu îngroșarea sângelui. În cele mai multe cazuri, există o creștere a numărului (scăderii) oricărui tip de celulă. Creșterea sau scăderea numărului de tipuri individuale de leucocite din sânge poate fi relativă sau absolută, în funcție de numărul total de leucocite - normal, ridicat sau scăzut. Schimbarea numărului, a raportului dintre formele individuale și morfologia leucocitelor depinde de tipul și virulența agentului patogen, natura, cursul și amploarea procesului patologic, reacția individuală a organismului.
Metoda de numărare a leucocitelor în camera Goryaev
Celulele albe din sânge - celulele albe din sânge - joacă un rol major în protecția antimicrobiană a organismului. Granulocitele fagocitează microbii și le distrug cu ajutorul enzimelor închise în granule, limfocitele produc anticorpi și furnizează răspunsuri imune la organism.
Metoda de determinare a metodei tubului: se toarnă într-un tub de testare 0,4 ml dintr-o soluție de Türk (lichidul Türk conține acid acetic pentru a distruge celulele roșii din sânge și albastrul de metilen pentru colorarea nucleelor de leucocite). Utilizați o pipetă capilară pentru a extrage 0,02 ml de sânge dintr-o picătură proaspătă, introduceți ușor într-o eprubetă cu un reactiv și clătiți pipeta. Se amestecă bine. În același timp, diluția sângelui este de 20 de ori. O picătură de sânge diluat este colectată la capătul unei tije de sticlă rotunde și aplicată pe marginea unei camere de sticlă lustruită.
Numărătoarea este efectuată în 100 de pătrate mari neîntrerupte, puse împreună de patru. Folosit o creștere mică.
Determinarea numarului 1 de formula de numarare.
1. 100 de pătrate conțin 1600 de pătrate mici (16x100)
2. Volumul sanguin deasupra pătratului mic 1/4000 mm3
3. Diluarea sângelui de 20 de ori
Numărul de leucocite în 1 pl de sânge = la -4000-20. = Ax 50
De exemplu: 130 de leucocite au fost numărate în 100 de pătrate mari ale rețelei Goryaev. În 1 pl de sânge, numărul de leucocite va fi de 130 x 50 = 6500 sau de 6,5-10 3.
Pentru determinarea conținutului de leucocite în 1 litru de sânge, numărul de leucocite, exprimat în mii, trebuie înmulțit cu 10 9.
În exemplul nostru, numărul de leucocite în 1 litru de sânge este de 6,5-10 9.
194.48.155.245 © studopedia.ru nu este autorul materialelor care sunt postate. Dar oferă posibilitatea utilizării gratuite. Există o încălcare a drepturilor de autor? Scrie-ne | Contactați-ne.
Dezactivați adBlock-ul!
și actualizați pagina (F5)
foarte necesar
Calculul leucocitelor în sânge
Leucocitoza poate fi absolută (adevărată) și relativă (redistributivă).
Leucocitoza absolută se observă în procesele inflamatorii acute, necroză tisulară, infecții bacteriene acute (cu excepția febrei tifoide, bruceloză, tularemie etc.), afecțiuni alergice, tumori maligne (cu distrugerea țesuturilor), leziuni la nivelul capului închise și hemoragii în creier, diabet. coma uremică, șoc, pierdere acută de sânge, ca reacție primară - cu boală prin radiații. O creștere semnificativă a numărului de leucocite apare la leucemie.
Relativ (redistributiv) este o consecință a primirii de leucocite în fluxul sanguin din organele care servesc pentru depozitul ei. Apare după mâncare (leucocitoză alimentară), băi calde și reci, emoții puternice (leucocitoză vegetovasculară), muncă musculară intensă (leucocitoză miogenică) etc.
Leucopenie. Leucopenia este privit ca un indicator al funcției măduvei osoase capacitate opresiune din cauza expunerii la substanțe toxice (arsenic, benzen și alții asemenea), unele medicamente (sulfonamide, cloramfenicol, fenilbutazona, immuran, ciclofosfamidă, etc.), virusuri (gripa, hepatita virală, rujeolei etc.), microbi (tifoid, bruceloză etc.), radiații ionizante, raze X și hipersplenism (funcția spline crescută).
Leucocitoza și leucopenia sunt rareori caracterizate de o creștere proporțională (scăderea) a numărului total de leucocite de toate tipurile (de exemplu, leucocitoză cu îngroșarea sângelui); În cele mai multe cazuri, există o creștere (scădere) a oricărui tip de o celulă, cu toate acestea, termenii „neutrofilie“ „Neutropenie“ „limfocitoza“, „limfopenie“, „eozinofilie“, „eosinopenia“, „monocitoza“, „monotsitopeniya“, "Basophilia".
În evaluarea clinică a modificărilor numărului de leucocite, o mare importanță se acordă raportului procentual al formelor individuale de leucocite, adică formula leucocitelor.
Numărul de sânge al leucocitelor unei persoane sănătoase:
Valoarea relativă Suma absolută
Basophils............................ 0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l
Eozinofile.........................0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l
Neutrofile: - mielocite............ 0% absente
- înțepat... 1-6% 0,040-0,300 x 10 9 / l
- segmentat....47-72% 2.0-5.5 x 10 9 / l
Limfocite..................................19-37% 1.2-3.0 x 10 9 / L
Monocite...............................3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L
Calculul leucocitelor se efectuează în frotiuri de sânge periferic colorate. Pentru interpretarea corectă a rezultatelor studiului formulării leucocitelor, se recomandă să conteze în cantități absolute, dar nu și în cele relative. Cele mai comune metode de pictură de pete de Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Sub imersiune, se măsoară cel puțin 200 de celule și apoi se determină raportul procentual al anumitor tipuri de leucocite. Analiza leucogramei ținând cont de alți parametri sanguini și imaginea clinică este o metodă valoroasă de examinare, ajută la diagnosticarea și determinarea prognosticului bolii.
Principalele cauze ale neutrofilei.
Infecții bacteriene acute - localizate și generalizate.
Inflamația sau necroza țesutului.
Efecte medicamentoase (corticosteroizi).
Principalele cauze ale neutropeniei.
Infecții - bacteriene (febră tifoidă, bruceloză, tularemie, febră paratihoidă) și virale (hepatită infecțioasă, pojar, gripa, rubeolă și altele).
Efectele mielotoxice și suprimarea granulocitopoiezei (radiații ionizante, agenți chimici - benzen, anilină, DDT, efecte medicinale - citostatice și imunosupresoare, vitamina B12-anemie cu deficit de acid folic, leucemie aureusică acută, anemie aplastică).
Efectele anticorpilor (forme imune) - giperchuvtvitelnost la medicamente, boli autoimune (LES, artrita reumatoida, leucemie limfocitară cronică), manifestări isoimmune (boala hemolitică a nou-născutului).
Redistribuirea și depunerea în organe - condiții de șoc, boli cu splenomegalie și hipersplenism.
Forme ereditare (neutropenie cronică familială benignă).
Principalele cauze ale eozinofiliei.
Invazii parazitare (trichinoză).
Leziuni cronice ale pielii - psoriazis, pemfigus, eczeme.
Tumori (variante eozinofile de leucemie).
Alte boli - endocardita fibroplastică Lefflera, scarlatină.
În faza de recuperare a infecțiilor și a bolilor inflamatorii (semn prognostic favorabil).
Cauze ale eozinopeniei (aneosinofilie).
Creșterea activității adrenocorticoizilor în organism.
Principalele cauze ale bazofiliei:
Leucemia cronică mieloidă și eritremia.
Principalele cauze ale monocitozelor.
Infecții bacteriene subacute și cronice.
Infecții parazitare - leishmaniasis, malarie.
Hemoblastoză - leucemie monocitară, limfogranulomatoză, limfoame.
Alte afecțiuni sunt SLE, sarcoidoza, artrita reumatoidă, monocitoza infecțioasă; în perioada de recuperare de la infecții, la părăsirea agranulocitoză, după splenectomie.
Scăderea numărului de monocite este importantă în principal în evaluarea raportului limfocite-monocitic în tuberculoza pulmonară.
Principalele cauze ale limfocitelor.
Infecții - virusul acut (mononucleoza infecțioasă, rujeola, rubeola, varicela), bacteriile cronice (tuberculoză, sifilis, bruceloză), protozoare (toxoplasmoză).
Hemoblastoză (leucemie limfocitară, limfom).
Alte boli - hipertiroidism, boala Addison, vitamina B12-anemie cu deficit de foliu, anemie hipo-și aplastică.
Limfocitopenia este observată în SLE, boala Hodgkin, tuberculoza larg răspândită a ganglionilor limfatici, în stadiul terminal al insuficienței renale, boala de radiație acută, starea imunodeficienței, administrarea de glucocorticoizi.
Creșterea sau scăderea numărului anumitor tipuri de leucocite din sânge poate fi relativă sau absolută. Dacă se modifică doar procentul unui anumit tip de celule albe din sânge, atunci au loc neutrofilia relativă, eozinopenia relativă etc. Creșterea sau scăderea conținutului absolut al oricărui tip de leucocite, adică numărul acestor celule pe unitatea de volum de sânge, se numește neutrofilie absolută, eozinopenie absolută etc.
Schimbarea formulei la stânga (creșterea numărului de forme tinere de neutrofile) este un semn al inflamației sau al unui proces necrotic în organism.
Deplasarea formulei leucocitelor spre dreapta este caracteristică bolii radiațiilor și a vitaminei-B12-anemia deficitului de acid folic.
Absența sau reducerea semnificativă a numărului tuturor tipurilor de leucocite granulare - granulocite (neutrofile, eozinofile, bazofile) este desemnată prin termenul agranulocitoză. În funcție de mecanismul de apariție, se disting mielotoxice (efectele radiației ionizante, aportul citostatic) și imun (hapten și agranulocitoză autoimună).
Leucocitele (leucocitele)
Leucocitele. Determinarea cantitativă a leucocitelor. Numărarea leucocitelor folosind camera Goryaeva. Conținutul cantitativ al leucocitelor. Leucocitoză.
Celulele sanguine albe
Numărul de leucocite din sânge depinde atât de viteza de formare, cât și de mobilizarea lor din măduva osoasă, precum și de utilizarea și migrarea lor în țesuturi (la leziuni), captarea de către plămâni și splină. Aceste procese, la rândul lor, sunt influențate de o serie de factori fiziologici și, prin urmare, numărul de leucocite din sângele unei persoane sănătoase este supus fluctuațiilor: crește până la sfârșitul zilei, în timpul efortului fizic, stresului emoțional, consumului de alimente din proteine și modificărilor abrupte ale temperaturii ambientale.
Determinarea cantitativă a leucocitelor
Leucocitele sunt contorizate utilizând camera Goryaev și utilizând contoare automate.
Numărarea leucocitelor folosind camera Goryaeva
Cu metoda in vitro de a lua sânge pentru a număra leucocite:
- 0,4 ml dintr-o soluție de acid acetic 3-5% colorată cu albastru de metilen este turnată în tub. Utilizați o pipetă capilară pentru a extrage 20 μl de sânge dintr-o picătură proaspătă (diluție de 20 de ori), lăsați-o cu grijă într-o eprubetă cu reactiv și clătiți pipeta. Se amestecă bine;
- o sticlă de acoperire curată și uscată se freacă pe cameră astfel încât să se formeze inele de curcubeu în punctul de contact;
- sânge diluat într-un tub de testare, se amestecă bine. Sfârșitul unei tobe de sticlă rotundă ia o picătură de sânge și o aduce la marginea geamului lustruit al camerei;
- după umplerea camerei, se lasă timp de 1 minut în repaus pentru sedimentarea leucocitelor;
- Leucocitele sunt considerate la mărire mică (obiectivul × 8 sau × 9, ocularul × 10 sau × 15) cu un câmp de vedere întunecat (cu un condensator coborât sau diafragmă îngustată);
- pentru rezultate satisfăcătoare, leucocitele sunt numărate în 100 de pătrate mari.
Cunoscând volumul unui pătrat mare și gradul de diluare a sângelui, găsiți numărul de leucocite în 1 μl și 1 l de sânge. Latura pătratului mare este de 1/5 mm, suprafața este de 1/25 mm2, volumul spațiului de deasupra acestui pătrat este de 1/250 mm3.
Formula pentru numărarea celulelor albe din sânge:
unde B este numărul de leucocite în 100 de pătrate mari;
P - gradul de diluție (20).
Calculul leucocitelor
Normă: 4.0-9.0 × 10 9 / L
Se numește creșterea numărului de leucocite de peste 9,0 × 10 9 / l
leucocitoză, o scădere a numărului acestora sub 4,0 × 10 9 / l - leucopenie. Totuși, chiar și 3,5 × 10 9 în 1 l de leucocite pentru un număr de indivizi poate fi normală. Conform literaturii, astfel de oameni au crescut rezistența la imunitate și sunt mai puțin susceptibili să se îmbolnăvească, ceea ce pare să se datoreze necesității unui răspuns imun pentru a avea o rezervă de leucocite în țesuturi, unde există 50-60 de ori mai mult decât în sânge. Evident, la persoanele sănătoase cu număr scăzut de celule albe din sângele periferic, rezervele lor în țesuturi sunt în mod corespunzător crescute. Acest fenomen se explică prin caracter ereditar și familial sau printr-o creștere a influenței sistemului nervos parasympatic.
Leucopenia poate fi funcțională și organică.
Leucopenia funcțională este asociată cu disreglementarea formării sângelui și se observă:
- cu unele infecții bacteriene și virale (febră tifoidă, gripă, variolă, rubeolă, boala Botkin, pojar);
- sub acțiunea medicamentelor (sulfonamide, analgezice, anticonvulsive, antitiroidiene, citostatice și alte medicamente);
- în timpul muncii musculare, introducerea de proteine străine, a nervilor și a efectelor de temperatură, de foame, de stări hipotonice;
- leucocitopenia falsă poate fi asociată cu agregarea leucocitelor în timpul depozitării pe termen lung a sângelui la temperatura camerei (mai mult de 4 ore).
Leucopenia organică rezultată din aplazia măduvei osoase și înlocuirea acesteia cu țesut adipos are loc atunci când:
- anemie aplastică;
- agranulocitoză;
- leucemie leucopenică;
- unele forme de boală Hodgkin;
- radiații ionizante;
- hipersplenism (primar și secundar);
- bolile colagenului.
leucocitoză
Leucocitoza este reacția sistemului hematopoietic la efectele acestuia
factori exogeni și endogeni. Există leucocitoză fiziologică și patologică.
Leucocitoza fiziologică este:
- digestiv - după masă, în special bogat în proteine; numărul de leucocite nu depășește 10,0-12,0 × 109 / l și după 3-4 ore revine la normal;
- cu stres emoțional (adrenalină), efort fizic sever, răcire, expunere excesivă la soare (arsuri solare), administrarea unui număr de hormoni (catecolamine, glucocorticosteroizi etc.), în a doua jumătate a sarcinii, în timpul menstruației și datorită distribuției inegale a leucocitelor în sânge mainstream.
Leucocitoza patologică este împărțită în absolută și relativă.
Leucocitoza absolută - o creștere a numărului de leucocite din sânge până la câteva sute de mii (100,0-600,0 × 109 / l și mai mult).
- Cel mai adesea observat la leucemie: în leucemie cronică - în 98-100% din cazuri, în leucemie acută - în 50-60%. Schimbarea raportului dintre celulele leucocite din măduva osoasă și punctatul de sânge servește drept bază pentru diagnosticarea leucemiei.
Leucocitoza relativă este observată:
- procese inflamatorii și infecțioase acute, cu excepția febrei tifoide, a gripei, a variolei, a rubeolei, a bolii Botkin, a rujeolei. Cea mai mare leucocitoză (până la 70,0-80,0 × 109 / l) este observată la sepsis;
- sub influența substanțelor toxice (otrăvuri de insecte, endotoxine), radiații ionizante (imediat după iradiere);
- ca urmare a acțiunii preparatelor corticosteroizi, adrenalină, histamină, acetilcolină și digitalică;
- cu dezintegrarea țesuturilor (necroza), infarctul miocardic, tromboza arterelor periferice cu dezvoltarea de gangrena, arsuri, pleurezie exudativă, pericardită, uremie, comă hepatică;
- pierderi semnificative de sânge la leziuni, sângerări interne, ginecologice și altele.
Creșterea numărului de leucocite la bolile infecțioase în majoritatea cazurilor este însoțită de o deplasare a formulei leucocitelor la stânga
Numărul leucocitelor și numărul leucocitelor.
Pentru a număra leucocitele, sângele este diluat în mixere sau în eprubete. În acest scop, utilizați o soluție de acid acetic 3-5% (pentru distrugerea celulelor roșii din sânge), colorată cu orice colorant anilină (pentru colorarea nucleelor de leucocite). Grilă de numărare este completat în același mod ca pentru numărarea eritrocitelor. Leucocitele sunt numărate în 100 de pătrate mari. În grila Goryaev, este convenabil să le numărați în pătrate neîntrerupte (sunt 100 pe grilă). Având în vedere diluția sângelui și volumul de lichid deasupra pătratelor, se calculează un multiplicator constant. La reproducere de 20 de ori este de 50 de ori.
Atunci când se lucrează cu eprubete, acestea pre-vărsă 0,38 ml de lichid în ele și eliberează 0,02 ml de sânge în el. Pentru a calcula numărarea automată în eprubete, celulele roșii sângelui hemolizează cu saponină. Numărul leucocitelor normale este de 4,3 • 10 9 -11,3 • 10 9 / l sau 4300-11 300 în 1 μl de sânge.
Numărul leucocitelor numărat în frotiuri colorate.
Un frotiu bun îndeplinește următoarele cerințe: este subțire și elementele în formă se află într-un singur strat; în acest caz, frotiu este galben și translucid. Un frotiu bun este uniform, iar celulele nu sunt deteriorate prin murdărire. Pentru ca sângele să stea în mod uniform pe sticlă, acesta este degresat prin arderea unui arzător de gaz peste flacără sau menținut într-un amestec de alcool și eter. Odată cu sfârșitul sticlei, atinge picătura mică de sânge proaspăt eliberată și o răspândesc fără întârziere pe sticlă. Înainte de colorare, frotiul este fixat prin imersie în metanol timp de 3 minute, în etanol sau amestecul său cu eter timp de 30 de minute. Există o serie de alte fixatoare. Tamponul uscat după fixare este umplut cu colorant.
Pentru a distinge celulele sanguine (definițiile formulei leucocitelor), recurge la colorarea diferențială. Cea mai folosită colorare de către Romanovsky-Giemsa. Acest colorant este un amestec de vopsele slab acide (eozină) și slab alcaline (azure II). Celulele și părțile lor în conformitate cu mediul de reacție în ele percep un anumit componente de colorant: acid (bazofile) substanță colorată cu alcalii (oxyphilous) eozină azuriu albastru, roșu pătat; Neutrul percepe ambele culori și devine violet.
Formula leucocitelor se referă la procentul de forme individuale de leucocite din sânge.
Pentru un calcul suficient de precis, este necesar să vedeți cel puțin 200 de globule albe.
Numărarea se face cu un sistem de imersiune. Datorită faptului că celulele sunt localizate neuniform în frotiu (cele mai mari ajung la margini), este important să se adere la o astfel de ordine de mișcare pe frotiu, în care muchiile și zona mijlocie a acestuia vor fi văzute în mod egal. Utilizați unul dintre cele două moduri de mișcare: una dintre ele este mutat frotiu de la marginea superioară a partea inferioara a spatelui până la 2 până la 3 câmpuri de vedere de-a lungul unei margini, apoi du-te în direcția opusă la marginea superioară, etc. În a doua metodă de muchii în mișcare de 5.. 6 până la jumătatea unui accident vascular cerebral, apoi aceeași cantitate laterală, apoi înapoi la margine, mutați mai multe câmpuri în lateral și repetați mișcarea din nou până când se numără 50 de celule. Vedeți 4 dintre aceste site-uri în cele 4 colțuri ale frotiului. Numără 200 de celule, numărul este împărțit la jumătate și determină numărul fiecărui tip de celule albe din sânge.
Leucocitele sunt elemente ale sângelui, reacționând rapid la diverse influențe externe și schimbări în interiorul corpului. Determinarea numărului total de leucocite poate avea o mare valoare diagnostică, deoarece dezvăluie starea organelor care formează sânge sau răspunsul lor la efectele dăunătoare. creșterea numărului de leucocite - leucocitoza - este un rezultat al activării leykopoeza, reducând numărul lor - - leucopenie poate depinde de suprimarea organelor hematopoietice, epuizarea lor, a crescut leucocitele degradare sub efectul anticorpilor antileykotsitarnyh 1. neutrofilele. Cel mai variabil grup de leucocite sunt neutrofilele, numărul cărora crește cu numeroase infecții, intoxicații și defalcarea țesuturilor.
neytropoeza activă caracteristică nu este numai o creștere a numărului total de neutrofile din sânge, dar, de asemenea, apariția formelor imature în acesta: creșterea numărului de bandă, neutrofile apar tineri, uneori mielocite. Această "întinerire" a compoziției neutrofile se numește schimbarea leucocitelor spre stânga. Rolul protector al neutrofilelor este determinat de funcția lor fagocitară, de acțiunea bactericidă și de eliberarea enzimelor proteolitice care promovează resorbția țesutului necrotic și vindecarea rănilor.
Cel mai adesea, o schimbare de regenerare are loc în prezența oricărui proces inflamator sau a unui focar de necroză. O schimbare foarte stângă a stângii la promieielocite și chiar la mieloblaste cu leucocitoză semnificativă se numește reacția leucemoidă. Mai puține neutrofile - neutropenie absolută - se produce atunci când apăsarea expunerea măduvei osoase a toxinelor anumite microorganisme (germeni febra tifoidă, bruceloza, etc.) și viruși, radiații ionizante, un număr de medicamente.
2. limfocite. Limfocitoză observate în timpul recuperării de boli acute infecțioase, mononucleoza infecțioasă, limfocitoza infecțioasă, leucemie, rubeolă, bruceloza, tireotoxicoză.
Absolut limfopenie apare în boala de radiații, leziuni sistemice ale sistemului limfatic: limfom, limfosarcom.
3. Eozinofile. Ele se găsesc în sânge într-o cantitate relativ mică (de preferință, conținute în țesuturi), dar numărul lor crește, uneori în mod semnificativ, în procesele alergice (boala serului, astm bronșic), infestații parazitare, dermatoze pruriginoase.
O scădere a numărului de eozinofile - eozinopenie - până la dispariția lor completă se observă la sepsis, forme severe de tuberculoză, tifoid și intoxicație severă.
4. Bazofili. Sunt purtatori ai unor mediatori importanti ai metabolismului tisular (echivalentul "sanguin" al celulelor tesutului adipos). Când un organism este sensibilizat, numărul crește și atunci când alergenul este reintrodus, acesta scade brusc ca urmare a defalcării.
5. Monocite. Creșterea numărului de monocite - monocitoză - este un indicator al dezvoltării proceselor imune. Monocitele sunt recunoscute ca analogi ai macrofagelor tisulare. Monocitele se găsesc într-o serie de boli cronice (croniosepsa, tuberculoza, sifilis). Monocitopenia este uneori observată în formele septice, hipertoxice severe de febră tifoidă.
Agranulocytes. O caracteristică distinctivă a agranulocitelor este nucleul nesegmentat și citoplasmul bazofil (albastru).
Limfocitele sunt cele mai mici leucocite în dimensiune. Miezul este rotund, oval sau în formă de fasole; ocupă cea mai mare parte a celulei, intens colorate. Citoplasma celor mai multe limfocite cu o margine îngustă înconjoară nucleul, este colorată într-o culoare albastru deschis și este clarificată în nucleu.
Monocite este cel mai mare dintre celulele sanguine. Miez mare de formă neregulată și culoare relativ ușoară. Citoplasma este o culoare gri-albastră, fumoasă, nu este clarificată la bază
În plus față de aceste celule, este rară în sângele normal și celulele plasmatice pot apărea adesea în boli. Ele se disting printr-un nucleu dens concentrat, amplasat excentric, adesea dintr-o structură tip roată. Numărul acestor celule crește cu anumite boli infecțioase, sepsis plăgii și mielom multiplu.
Atunci când se calculează formula leucocitelor, se acordă atenție nu numai schimbărilor cantitative în ea, ci și schimbărilor calitative ale elementelor de formă. Anterior au fost observate modificări degenerative ale leucocitelor. Cu intoxicație severă, granularitatea neutrofilului devine abundentă, mare, intens colorată și se numește toxică (sau toxogenică). Uneori, frotiuri de sânge se găsesc în frotiuri de sânge, pictate ca substanța nucleară a leucocitelor. Acestea sunt așa-numitele umbre Botkin-Humprecht - rămășițe ale cromatinei nucleare, ceea ce indică o fragilitate crescută a leucocitelor, ducând la descompunerea lor - leucocitoliză
99. Metode de determinare a grupului de sânge, conceptul factorului Rh.
1. Determinarea grupei de sânge prin seruri standard:
Sunt necesare următoarele echipamente:
o două seturi de seruri hemaglutinante hemaglutinante sera I (0), II (A), III (B) din două serii diferite și un flacon de ser IV (AB)
o flacon cu soluție izotonică de clorură de sodiu cu pipetă
o Placa uscată spălată
o oglinzi de sticlă
o ace sterile sterile pentru a sparge carnea degetului
o bile sterile de tifon,
Serurile standard pentru determinarea grupului de sânge conform sistemului ABO sunt produse cu un marcaj de culoare specific.: I (0) - incoloră, II (A) - albastru, III (B) - roșu, IV (AB) - galben. Serul se păstrează la 4-10 ° C. Serul trebuie să fie ușor și transparent. Prezența fulgilor, a sedimentelor, a turbidității sunt semne de inadecvare a serului. Primele semne de aglutinare ar trebui să apară nu mai târziu de 30 de secunde.
Plăcuța este împărțită în 4 pătrate cu un creion colorat și în direcția acelor de ceasornic sunt desemnate pătratele I (0), II (A), III (B). O picătură mare de ser din două serii I (0), II (A), W (B) este introdusă în pătratul corespunzător al plăcii cu o pipetă. Tamponul de deget este tratat cu alcool și un ac este perforat pe piele. Prima picătură de sânge este îndepărtată cu o minge de tifon, picăturile ulterioare în diferite părți ale diapozitivului sunt aplicate succesiv pe picăturile de ser și se agită bine. O picătură de sânge ar trebui să fie de 5-10 ori mai mică decât o picătură de ser. Apoi, prin agitarea plăcii amestecați bine sângele cu ser. Rezultatele preliminare sunt evaluate după 3 minute, după care se adaugă o picătură de soluție de clorură de sodiu izotonică, se amestecă din nou prin agitarea plăcii și după 5 minute se efectuează o evaluare finală a reacției de aglutinare.
Cu un test de izoaglutinare pozitiv, fulgii și miezurile din celulele roșii din sângele aderat nu diferă atunci când se adaugă o soluție izotonică de clorură de sodiu și se agită.
Când o reacție negativă scade serul pe o placă transparentă, roz uniformă, nu conține fulgi și boabe.
Următoarele 4 combinații de reacții de aglutinare cu seruri standard din grupurile I (0), II (A), III (B) sunt posibile.
v Toate cele 3 seruri din ambele serii nu se aglutinează. Test de sânge -
Am grupat.
v Reacția de izoemaglutinare negativă cu grupurile serice P (A) din serii și serice pozitive cu serurile I (0) și III (B). Test de sânge -
II (A).
v Reacția de izohemaglutinare este negativă la serul grupului III (B) din ambele serii și pozitiv cu serul grupelor I (0) și II (A). Test de sânge -
III (B).
v Grupurile Ser I (0), II (A), III (B) dau o reacție pozitivă în ambele serii. Sânge aparține grupului IV (AB). Dar, înainte de a se da o astfel de concluzie, este necesar să se efectueze o reacție de izoaglutinare cu serul IV standard (AB) al grupului utilizând aceeași procedură. Un test de izoemaglutinare negativ permite în final atribuirea sângelui de test grupului IV (AB).
2. Conceptul factorului Rh.
Un alt antigen (aglutinogen) a fost găsit în eritrocite, numit factorul Rh. Toți oamenii sunt împărțiți în indivizi cu sânge Rh-pozitiv (Rh +) și Rh-negativ (Rh). S-a stabilit că 85% dintre persoanele din eritrocite conțin factorul Rh, adică sângele lor este Rh-pozitiv și 15% nu îl conține, adică sângele acestor oameni este Rh negativ. Pentru factorul Rh (antigenul Rh), în sânge nu există, în mod normal, anti-Rh-aglutinină (anticorpi gata făcuți). Astfel de anticorpi apar în serul de sânge numai ca urmare a imunizării unei persoane cu sânge Rh negativ cu celule roșii din sânge Rh pozitive. O astfel de imunizare apare datorită transfuziilor repetate de sânge Rh-pozitiv la un receptor Rh negativ sau în timpul sarcinii unei femei cu sânge Rh-negativ Rh-pozitiv. Imunizată în acest mod, oamenii devin sensibilizați: atunci când sunt transfuzați cu sânge Rh pozitiv, apare o complicație gravă - un șoc de transfuzie de sânge.
Numărarea numărului de leucocite și a trombocitelor
Factorii care afectează corectitudinea studiului celulelor albe din sânge
- depozitarea lungă a sângelui la temperatura camerei
Normele privind conținutul leucocitelor din sânge
Vârsta Numărul de leucocite
- 1 zi 11,6 - 22,0
- 1 săptămână 8.1. - 14.3
- 1 lună 7,6 - 12,4
- Adulți 4.0 - 9.0
Metode pentru determinarea numărului de leucocite din sânge.
- Numărarea numărului de leucocite în camera de numărare
- Numărarea leucocitelor în analizoarele de hematologie
Determinarea numărului de leucocite în camera de numărare.
- Numărarea leucocitelor la microscop se efectuează după liza celulelor roșii din sânge în pătrate mari 100 din grila de numărare și convertit la 1 litru de sânge, pe baza volumului de pătrate și o diluție de sânge. Numărătoarea leucocitelor trebuie efectuată în 2-4 ore după colectarea sângelui.
- Dacă există celule roșii nucleate în sângele periferic, acestea nu sunt lizate și numărate împreună cu leucocitele. În acest caz, pentru a determina numărul real de leucocite, numărul de celule din rândul roșu este scăzut din numărul total de celule numărate.
- De exemplu: Numărul total de leucocite la calcul în cameră (sau analizor) -45x109 / l. La calcularea formulei de leucocite, s-a constatat că 50 de eritroblaști (normoblaști) sunt prezenți la 100 de leucocite.
Calculăm numărul real de leucocite din sânge:
150 de celule - 45 x 109 / l
100 de celule (leucocite) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l
Astfel, numărul real de leucocite din sânge este de 30 x 109 / l.
Principalele surse de eroare în calculul leucocitelor din cameră:
- Raport incorect al sângelui și al volumelor de acid acetic luate într-un tub de testare.
- Soluție incorect preparată de acid acetic (la o concentrație mai mare de 5%, unele leucocite pot fi lizate, ceea ce va duce la o subestimare a rezultatului).
- Expunerea prelungită a probei la temperaturi de peste 28 ° C, care pot accelera liza leucocitelor din probă și pot duce la o subestimare a rezultatelor.
- Umplerea incorectă a camerei Goryaev. La fel ca în cazul calculului celulelor roșii din sânge, camera trebuie lăsată timp de 1 minut pentru a depune celulele.
- Camera Goryaev nu a fost spălată suficient după definiția precedentă. Leucocitele rămase în cameră pot supraestima rezultatele analizei.
Metodele de numărare a trombocitelor
- în camera de numărare
Fiecare grup de metode are avantaje și dezavantaje.
- Numărarea trombocitelor în cameră este suficient de precisă, nu necesită calcularea numărului de celule roșii din sânge. Pe de altă parte, această metodă este mai laborioasă, deoarece trombocitele în forma nativă sunt reprezentate de elemente mici și puțin contraste. Dezavantajul metodei este numărarea trombocitelor în orele următoare după ce a fost luat sânge.
- Determinarea numărului de trombocite din frotiurile de sânge este semnificativ inferioară în precizia sa față de metoda camerei sau de contoarele automate. Erori la contorizarea frotiurilor de sânge pot fi datorate calității slabe a frotiului și distribuției inegale asociate a trombocitelor, determinării incorecte a numărului de globule roșii din sânge. Un dezavantaj semnificativ al metodei este necesitatea de a contabiliza simultan trombocitele și celulele roșii din sânge. Avantajul este capacitatea de a studia trombocitele în orice moment, indiferent de momentul colectării sângelui.
- Metoda de determinare a trombocitelor utilizând un analizor de hematologie vă permite să determinați cu precizie numărul de trombocite, volumul mediu și distribuția lor în volum.
Metoda unificată de numărare a numărului de leucocite din sânge în camera de numărare;
Metode pentru numărarea numărului de leucocite din sânge
Metode unificate 2 pentru determinarea numărului de leucocite din sânge:
- în camera de numărare;
- utilizând analizoare de hematologie.
Leucocitele sunt numărate sub microscop într-un anumit volum al camerei de numărare cu diluție constantă a sângelui după distrugerea celulelor roșii din sânge.
Reactiv: soluție de acid acetic 3-5%, colorată cu o soluție apoasă de albastru de metilen pentru a pata nucleele leucocitelor și pentru a facilita numărarea lor. Soluția este de culoare albastră, stabilă în depozit.
Echipament special: microscop, camera de numărare Goryaeva.
Cursul de determinare. Folosind o pipetă de măsurare sau un dozator automat, se toarnă exact 0,4 ml de soluție de acid acetic în eprubeta de aglutinare și se adaugă 0,02 ml (sapil capilar) de sânge. Spălați capilarul de mai multe ori cu o soluție de acid și amestecați conținutul tubului. Aceasta are ca rezultat o diluare a sângelui de 20 de ori. Lăsați până la numărare, dar nu mai mult de 2-4 ore după prelevarea de probe de sânge. Camera Goryaev este pregătită să lucreze prin ștergerea unei geamuri, astfel încât să apară inele curcubeu. Încă o dată, agitați bine conținutul tubului și umpleți camera Goryaev cu acest amestec cu o pipetă Pasteur sau o tijă de sticlă cu capăt topit. Lăsați camera de numărare umplută timp de 1 minut într-o poziție orizontală pentru sedimentarea leucocitelor. Leucocitele sunt numărate în 100 de pătrate mari negrafate ale camerei de numărare în condițiile: condensatorul este coborât, ocularul 10x sau 15x, lentila 8x. Numărătoarea pornește din colțul din stânga sus al grila Goryaev. La numărarea leucocitelor, aceștia respectă regula: toate celulele din interiorul pătratului și de pe liniile de demarcație sunt numărate, dacă în majoritatea cazurilor intră în interiorul pătratului. Celulele intersectate de o linie de divizare exact în jumătate sunt numărate numai pe două laturi ale unui pătrat (de exemplu, partea stângă și cea de sus).
Calcul. Când se calculează numărul de leucocite în 1 μl de sânge, se utilizează formula:
- numărul de leucocite în sânge de 1 ml;
a - numărul de leucocite, calculat în 100 de pătrate mari;
4000 - factor de conversie a volumului la 1 μl, pe baza volumului pătratului mic, care este μl;
1600 - numărul de pătrate mici numărate;
20 - diluție de sânge.
Pentru a converti numărul de leucocite în unități SI (în 1 l de sânge), cifra rezultată este înmulțită cu 10 6.
Practic, pentru determinarea conținutului de leucocite în 1 l de sânge, numărul de leucocite, calculat în 100 de pătrate mari ale camerei de numărare, este înmulțit cu 50, împărțit la 1000 (adică transferat în virgulă cu 3 semne în stânga) și înmulțit cu 10 9.
Metode de numărare a leucocitelor în camera Goryaev, norme de indicatori și deviații
Camera Goryaev este un dispozitiv pentru măsurarea numărului de celule și particule într-un anumit volum de lichid (sânge, urină), constând dintr-un obiect special gros și o sticlă de acoperire.
Un diapozitiv de sticlă are o zonă încastrată în mijloc, pe care este aplicată o grătar de 225 pătrate mari. Dintre aceste pătrate, 25 sunt împărțite în mod egal în 16 pătrate mai mici. Datorită acestui volum al rețelei, calculul este efectuat mai precis decât în alte dispozitive de numărare de mână.
Serviciul camerei
După utilizarea instrumentului, diapozitivul este dezinfectat prin imersare într-o soluție de formalină de 4% timp de o oră sau într-o soluție de etanol de 70% timp de o jumătate de oră. După aceea, camera este spălată cu apă distilată. Excesul de lichid este îndepărtat cu o cârpă moale. Merită să fiți atenți la faptul că aparatul foto nu poate fi șters cu un tampon de bumbac datorită fibrelor care se agață de acesta. Sticla depozitată într-un loc uscat.
În timpul utilizării camerei, se calculează PE care sunt situate în interiorul pătratului rețelei și pe liniile de sus și de stânga ale perimetrului acesteia. În acest caz, particulele care ating liniile drepte și inferioare ale perimetrului în timpul calculului acestei celule nu sunt incluse.
Determinarea leucocitelor în sânge
Metoda de numărare a leucocitelor
Calculul numărului de leucocite începe cu diluarea sângelui într-o soluție 3-5% de acid etanoic cu albastru de tip metil de 20 de ori. Materialul de lucru înainte de utilizare ștergeți cu tifon.
Geamul de acoperire trebuie șters înainte de apariția inelelor colorate de Newton. Apoi, camera este umplută cu sânge diluat, în timp ce primele două picături sunt eliberate pe hârtia de filtru. Lichidul intră în cameră datorită proprietății capilare a apei. Este important să se asigure că nimic nu intră în caneluri în timpul umplerii. Dacă se întâmplă acest lucru, lichidul este îndepărtat cu atenție cu hârtie de filtru. Apoi, lăsați grilele singure pentru un minut, așteptând ca FE să-și înceteze mișcarea.
Numărul celulelor albe din sânge se efectuează în cadrul a 100 de pătrate mari la mărire redusă, adică cu un ocular 10x și un obiectiv de 8x, conform regulii lui Egorov. Figura rezultată este utilizată în formula.
X = (n × 250 × 20) / 100 sau X = n × 50
X - numărul de leucocite.
n este numărul obținut prin numărarea în cameră.
Se determină numărul de leucocite, luând în considerare numărul de pătrate mari ale grilei - 100 și diluția sângelui - 20.
Cum este numărul de leucocite
Rata leucocitelor și anomalii
Rata leucocitelor la om este de 4,0 - 9,0 × 109 / l. Sau, în mod diferit, aproximativ 6000 de celule albe din sânge sunt situate în 1 mm de sânge cub.
Factorii fiziologici externi pot influența abaterile de la normă:
- consumul de alimente înainte de donarea de sânge;
- stres;
- sarcina sau menstruația la femei;
- hipotermie sau supraîncălzire;
- efort fizic deosebit înainte de testare.
Dacă numărul de celule albe din sânge depășește 9,0 × 109 / l (leucocitele sunt ridicate), această afecțiune se numește leucocitoză. O imagine similară poate fi observată în cazul bolilor maligne ale sângelui, infecțiilor, leziunilor prin radiații și intoxicațiilor.
De asemenea, medicamentele pot crește numărul de leucocite. Necroza țesuturilor, hemoragii grele, inclusiv ca rezultat al operațiilor, comă renală, boli cardiace - toate acestea pot duce la leucocitoză.
Scăderea numărului de leucocite sub 3,9 x 109 / l se numește leucopenie. Cu toate acestea, la unii pacienți un număr fix de leucocite este fixat la 3,5 × 109 / l. Se crede că astfel de oameni mențin o rezervă a acestor celule în țesuturi de 50 de ori mai mult decât în sânge. Există, de asemenea, leucopenie funcțională după administrarea de analgezice, sulfonamide și alte medicamente, după o muncă musculară lungă, ca urmare a infecțiilor și a virușilor (tifoid, gripă și rujeolă).
Formula leucocitelor
Toate tipurile de leucocite constituie formula leucocitelor. Pe ea puteți identifica anumite patologii. Normele formulei variază în funcție de vârsta și perioada de viață a unei persoane. Schimbarea este evidentă în cazul femeilor în timpul sarcinii sau după nașterea copilului.
Sunt utilizate metode diferite pentru a calcula raportul tipurilor acestor celule, dar ele sunt toate legate de faptul că celulele mai grele (de exemplu, bazofilele) sunt situate mai aproape de marginea frotiului și limfocitele, cum ar fi celulele luminoase, rămân în mijloc.
- Metoda Filipchenko. În această metodă, calculul se efectuează de-a lungul liniei drepte transversale a frontierei de la un capăt la altul. Accidentul este împărțit mental în trei părți.
- Metoda Schilling. Leucocitele sunt numărate în patru zone ale unui frotiu.
Datele obținute sunt înregistrate în tabel. În mod individual, numărul fiecărui tip de globule albe este calculat prin formule. Marcat elementele care au apărut. Scorul este păstrat până în momentul în care suma tuturor celulelor numărate este de 100.
Metode pentru numărarea leucocitelor în urină
În urină se calculează numărul de leucocite din celula Goryaeva Nechiporenko. Această analiză este necesară pentru monitorizarea bolii renale. Examinarea periodică a urinei contribuie la monitorizarea corectitudinii tratamentului și a eficacității terapiei prescrise.
Colectarea urinei
În studiu este doar prima urină dimineața în mijlocul urinării. Este important ca pacientul să respecte regulile de bază pentru colectarea acestui biomaterial. Nu este necesară pregătirea suplimentară suplimentară pentru studiu.
Metoda de calcul
10 ml de urină proaspăt colectată este centrifugată timp de trei minute la 2,5 mii rotații pe minut. Înainte de aceasta, este necesar să se asigure că urina, pentru a evita dezintegrarea parțială a celulelor, are o reacție ușor acidă.
Folosind o pipetă cu un capăt îngust, tras, îndepărtați stratul superior. In vitro se lasă de la 0,5 ml urină la 1 ml, în funcție de volumul de sedimente.
Precipitatul este ușor amestecat cu supernatantul. Soluția rezultată este utilizată pentru umplerea camerei de numărare Goryaev conform unui principiu similar, care se utilizează la calculul PV al sângelui. Camera este lăsată singură timp de 3 până la 5 minute.
Celulele albe din sânge trebuie să fie numărate în pătrate mari pe toată grilă, cu un ocular de 7x și un obiectiv de 40x.
Figura rezultată este utilizată în formula:
X = (a / 0,9) x (1000 / V)
X - numărul de leucocite în 1 ml de urină.
a - cantitatea calculată împărțită la volumul camerei în 1 μl sediment de urină.
v - cantitatea de urină luată pentru studiu.
1000 - cantitatea de sediment.
Acest lucru este important! Norma leucocitelor: în 1 ml de urină nu mai mult de 2 × 10 3 de celule albe din sânge.
Calculul leucocitelor în sânge
Personalul de laborator pentru detectarea numărului de leucocite din sânge cel mai adesea utilizează camera Goryaev. Numărarea leucocitelor în camera Goryaev este o metodă mai puțin exactă decât determinarea leucocitelor folosind dispozitive electronice. Amploarea erorii este de ± 7%.
Cum se face numărarea?
- În tubul se toarnă 0,4 mililitri de lichid diluant, precum și 0,02 mililitri de sânge capilar. Recomandarea de reproducere este considerată egală cu 1:20.
- Ca fluid de diluare, se utilizează de obicei o soluție de acid acetic de 3 sau 5%. Este pre-colorat cu albastru de metilen, care, prin reacție, culorizează nucleele leucocitelor.
- Înainte de a umple camera, tubul Goryaev este agitat cât mai bine posibil. Umplerea camerei este aceeași ca și pentru numărarea celulelor roșii din sânge.
Caracteristicile de calcul
Prin numărul de leucocite semnificativ inferioare celulelor roșii din sânge, din acest motiv calculul se face în 100 de pătrate mari. În 100 de pătrate, a fost calculat un număr de leucocite.
Cu un volum de pătrat mic de 14.000 milimetri cubi și o diluție de 20 de ori în sânge, numărul de leucocite se calculează după cum urmează: 4000x20 și apoi împărțit la 1600. Se pare că 1/2 x a.
Pentru a obține numărul de celule albe din sânge în 1 μl, cifra calculată trebuie împărțită la 2 și adăugați încă două zerouri.
Deviația leucocitelor de la nivel indică leucocitoză și leucopenie și necesită o examinare detaliată imediată, deoarece există o mare probabilitate de prezență de tuberculoză, pneumonie, sepsis, febră tifoidă, boală prin radiații.