Analiza ELISA - de la screening pentru HbsAg la diagnostice complexe

Odată cu introducerea tehnologiilor moderne în medicină, posibilitățile metodelor imunochemice de diagnostic, care sunt capabile să recunoască rapid și precis boala, când alte metode sunt neputincioase, sunt în creștere. Înțelegerea faptului că virusul hepatitei B este capabil să fie în organism într-o concentrație foarte scăzută, la care nu poate fi detectat chiar printr-o metodă atât de fiabilă ca PCR, face necesară o analiză nouă a problemei diagnosticării acestei boli și aprecierea posibilităților unei imunoteste.

În acest material vom analiza în detaliu tot ceea ce se referă la acest tip de cercetare de laborator. Veți afla ce este o imunozălzire a enzimei și modul în care se efectuează, ce este antigenul australian și cum este determinat, ce abrevieri incomprehensibile Hbs ag, Hbcor, în medie și rolul lor în descifrarea analizei, precum și obținerea de informații mai utile și mai interesante.

Conținutul articolului:

Informații generale despre ELISA

ELISA (ELISA abreviată) este o metodă de laborator de diagnostic care poate detecta atât antigeni, cât și anticorpi dintr-o mare varietate de infecții, inclusiv hepatita B. Cunoașterea actuală a proprietăților virusului și a caracteristicilor răspunsului imun al organismului permite nu numai detectarea infecției, ci și identificarea acesteia etapa, eficacitatea vaccinării și evaluarea eficacității tratamentului.

Esența imunotestului enzimatic

ELISA se bazează pe reacția "antigen-anticorp" sau mai degrabă pe proprietățile sale.

Ca răspuns la invazia unei substanțe străine (antigen), care în special sunt proteine ​​ale virusului, organismul produce proteine ​​proteice - anticorpi. Anticorpii intră într-o reacție complexă cu antigenul, blocându-i activitatea.

Vom vorbi mai multe despre antigene și anticorpi de mai jos, dar acum vom observa că pentru fiecare antigen există strict individual sau, după cum spun medicii, anticorpi omologi. Astfel, dacă vrem să detectăm un antigen specific în sânge, vom folosi un comprimat de diagnosticare cu anticorpi la acesta. Dacă există un antigen în sânge, acesta va reacționa cu anticorpi, care pot fi detectați în diferite moduri. Și invers. Dacă vrem să găsim anticorpi, avem nevoie de o tabletă cu antigenul adecvat.

Cel mai adesea, valoarea diagnosticului de a purta doar anticorpii cu care puteți diagnostica aproape orice infecție. Cu toate acestea, particularitatea virusului hepatitei B este că rolul principal în diagnostic este jucat de unul dintre antigene - antigenul australian.

Cum este IFA?

Luați în considerare o procedură tipică ELISA pentru un exemplu specific atunci când doriți să identificați anticorpi împotriva agentului patogen.

Pentru diagnosticare, se utilizează o tabletă cu 96 godeuri, care este pre-saturată cu antigenul corespunzător. Mai mult, procedura este după cum urmează:

ser se aplică tuturor celulelor;

anticorpii omologi reacționează cu antigenul și se atașează la placă;

tableta spălată, îndepărtând anticorpii ne atașați;

apoi o enzimatică etichetă este introdusă în celule - o substanță care reacționează cu anticorpi și cauzează colorarea conținutului celulei.

Aceasta este procedura standard ELISA cu colorare, care este utilizată, de exemplu, în benzi de testare imunochromatografice.

ELISA nu se limitează la determinarea calitativă a anticorpilor sau a antigenilor agentului patogen. Cu cât mai mulți anticorpi sunt conținute în celulele tabletei, cu atât este mai intensă soluția colorată. Comparând densitatea optică cu control, echipamentul modern poate calcula cu exactitate concentrația anticorpilor pe unitatea de volum. Astfel, se efectuează un test ELISA cantitativ, măsura de măsurare la care cel mai adesea sunt unitățile de densitate optică (EOP).

Analiza imunochemiluminiscentă

Astăzi există mai multe tipuri de ELISA, fiecare dintre ele având un domeniu de aplicare preferat. Cel mai popular în diagnosticul de hepatită B este analiza imunochemiluminiscentă.

Eticheta enzimatică pentru această analiză nu sunt cromatinele, ca în ELISA standard, ci substanțe speciale - fosforii care determină complexul să strălucească în lumina ultravioletă.

Cu ajutorul unui dispozitiv special - luminometru, puteți determina cu acuratețe nivelul emisiei și, ca o consecință, concentrația substanței dorite.

Utilizarea metodelor ELISA determină aproape toate antigene existente ale virusului hepatitei B și anticorpii față de aceștia.

Antigenii virusului hepatitei B: Hbs, Hbe și Hbc

Termenul antigen (antigen) vine de la două cuvinte în limba engleză: anticorp - anticorp și generator - producător. Astfel, sub antigenul intelege orice substanta care determina formarea de anticorpi in corpul ei. Cele mai frecvente antigene sunt compușii proteici.

Astăzi, trei antigene ale virusului hepatitei B sunt cunoscute: hbsag, hbc și hbe.

Antigenul australian

Proteina care face parte din carcasa exterioară a hepatitei B patogene a fost detectată cu mult înainte de descoperirea virusului în sine. Acest antigen a primit numele său pentru că a fost identificat pentru prima oară de locuitorii autohtoni din Australia. Cu toate acestea, la început, proteina nu a fost considerată antigen, ci un element complet normal de sânge printre nativi, iar conștientizarea legăturii sale cu afecțiunile hepatice a apărut puțin mai târziu.

Conservarea pe termen lung a antigenului din sânge și absența anticorpilor indică posibilitatea formării hepatitei cronice B pozitive la HBeAg

Astăzi, în literatura de specialitate, denumirea de "antigen australian" nu a fost găsită și a fost suplinită de abrevierea internațională - HbsAg (antigen de suprafață al hepatitei b - antigen de suprafață al hepatitei B). În plus, puteți găsi abrevieri hbs antigen sau doar hbs. Oricare dintre aceste abrevieri sunt acceptabile și pot fi completate prin înregistrarea HBV sau HBV - virusul hepatitei B (virusul hepatitei b).

Antigenul de suprafață al virusului hepatitei B are o caracteristică remarcabilă care îl face un marker de diagnostic indispensabil - concentrația sa în sânge poate atinge niveluri foarte ridicate, până la jumătate de miligram pe mililitru de sânge. Acest lucru se datorează faptului că doar o mică parte din noul HBsAg, care se formează în timpul reproducerii virusului hepatitei B, merge la construirea membranelor de particule virale noi, iar restul - circulă liber în sânge. Ca rezultat, numărul de particule hbs din sânge poate depăși numărul de virioni de sute de mii de ori.

Această caracteristică face antigenul australian principalul marker în diagnosticul de screening al hepatitei B, care se găsește în sânge încă mai devreme de 4-6 săptămâni după infectare. Când formează anticorpi, antigenul de suprafață este înlocuit treptat de aceștia. Dacă după 6 luni HBsAg persistă, atunci aceasta indică trecerea infecției în forma cronică.

Recent, când a fost posibilă determinarea concentrației de hbs hbv, rolul său în diagnostic a crescut și mai mult, deoarece bazându-se pe nivelul antigenului, poate distinge hepatita cronică B (HBV) de o stare de transport sănătoasă, precum și monitorizarea eficacității tratamentului.

Antigene de bază

În nucleul virusului - nucleocapsid - sunt proteine ​​care controlează reproducerea virusului HBcoreAg și HBeAg.

HBcoreAg, care poate fi, de asemenea, numit HBCore-antigen, hbc sau antigenul de bază, poate fi găsit numai în țesuturile ficatului, direct în nucleele hepatocitelor. Acest antigen nu este detectat în sânge și nu are o valoare diagnostică.

Structura virusului hepatitei

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - dimpotrivă, joacă un rol important în diagnostic. HBeAg și HBcoreAg sunt rude apropiate. Ei au o mare asemănare a structurii și diferă în principal în poziția spațială a moleculelor. Spre deosebire de HBcore, HBe nu face parte din peretele nucleocapsid și circulă liber în sânge.

Rolul HBe în procesul infecțios nu este suficient de clar, totuși, particularitățile comportamentului său și relația cu cursul procesului infecțios au fost deja suficient studiate. HBeAg indică reproducerea activă a virusului și vă permite să stabiliți în mod fiabil faza de CHB - HBeAg - pozitiv sau HBeAg - negativ cronic.

HBe poate fi detectat în sânge deja în perioada de incubație a virusului hepatitei B acute (HBV), în timp ce o concentrație ridicată de HBeAg timp de 3 săptămâni indică cel mai probabil o amenințare a procesului cronic. Concentrația de HBe este direct legată de conținutul de particule Dane (așa numitele particule de virus hepatitic B) - cu cât este mai mare cantitatea de HBe, cu atât este mai mare concentrația de ADN VHB în sânge.

HBeAg este un marker major al infectiozitatii bolii. Sângele pacienților cu HBeAg pozitiv este mult mai contagios decât HBeAg-negativ. De exemplu, la femeile gravide pozitive pentru HBe și Hbs, probabilitatea transmiterii infecției la copil atinge 50%, în timp ce probabilitatea unui astfel de eveniment la HBe-negativ, dar Hbs la mamele pozitive este de 10-30%.

Hbe determină evoluția hepatitei cronice. HBeAg-pozitiv hepatita cronică B are un prognostic mult mai nefavorabil în ceea ce privește dezvoltarea cirozei.

Probabil că tot ce trebuie să știți despre antigeni VHB și trecem la al doilea grup de markeri hepatitei B - anticorpi.

Esența și diagnosticul hepatitei B

De îndată ce stadiul se transformă în icter, integritățile și membranele mucoase încep să devină galbene, starea de sănătate se deteriorează brusc. Este important să subliniem faptul că ficatul crește în dimensiune și iese din sub arc costal. Colorarea pielii într-o nuanță galbenă are loc treptat. Cantitatea de enzime hepatice crește în sânge, iar proba de timol nu se schimbă.

Diagnosticarea bolii: metode și concepte de bază

Diagnosticul hepatitei B se realizează în mai multe moduri:

1. În primul rând, medicul trebuie să ia anamneză și să efectueze o anchetă detaliată a persoanei. În timpul anchetei, accentul se pune pe momente precum:

  • dacă introducerea de medicamente sau alte metode de administrare intravenoasă;
  • dacă au existat transfuzii de sânge;
  • dacă au fost efectuate intervenții chirurgicale;
  • dacă a fost afectată deteriorarea integrității pielii;
  • care sunt relațiile sexuale;
  • dacă pacientul a avut contact cu pacientul cu hepatita B sau purtătorul său.

Dacă a apărut vreunul dintre aceste elemente, atunci este specificat pentru cât timp. În mod obișnuit, infecția apare la contactarea de la 6 săptămâni până la șase luni înainte de apariția primelor simptome de hepatită.

2. Diagnosticul de laborator pentru hepatita B, analiza ELISA a sângelui pentru antigeni și anticorpi împotriva hepatitei B. Acest tip de examinare vizează identificarea a 3 antigeni:

  • HBsAg (antigen, localizat superficial),
  • HBcAg (situat în interiorul)
  • HBeAg (interconectat cu antigenul anterior). Boala se caracterizează prin detectarea timpurie a acestor antigeni în sânge.

Persoanele care suferă de hepatită B și care conțin aceste antigene în sânge sunt foarte contagioase. Sunt capabili să infecteze alte persoane. Dacă HBsAg este absent în sângele uman, aceasta indică faptul că el este sănătos. Dacă o persoană este bolnavă, atunci organismul începe să secrete anticorpi la antigeni existenți.

3. Diagnosticul hepatitei B utilizând o tehnică PCR concepută pentru a detecta ADN VHB în sistemul circulator. Dacă rezultatul este pozitiv, atunci persoana are hepatită. Analiza pentru ADN VHB este numită calitativă. Există, de asemenea, un PCR cantitativ. PCR cantitativ oferă o oportunitate de a identifica încărcătura cu prezența virusului hepatitei. Ce este încărcarea virală? Acesta este numărul de copii ale ADN VHB în 1 ml de sânge. Analiza cantitativă a hepatitei arată activitatea virusului.

4. Testul de sânge pentru biochimie. Această analiză implică determinarea numărului de enzime produse de ficat. Astfel de enzime includ ALT, AST. Ele sunt situate în interiorul celulelor hepatice - hepatocite. Dacă celulele hepatice sunt deteriorate, enzimele sunt eliberate și intră în sânge. O analiză pozitivă este luată în considerare numai atunci când numărul de enzime hepatice depășește norma. Sondajul arată dacă există procese inflamatorii în ficat și activitatea lor.

5. Examenul cu ultrasunete, elastometria, etc. Diagnosticul hepatitei poate fi efectuat și metodele non-laborator. Utilizarea ultrasunetelor examinează organele abdominale. Ecografia oferă o imagine clară în orice proces inflamator al ficatului și al vaselor sale. Efectuarea efectivă a elastometriei ficatului. Metoda de elastometrie oferă o idee despre gradul de fibroză în țesutul hepatic.

6. Analiza cea mai importantă este prezența antigenilor hepatitei B în masa celulelor roșii din sânge. Dacă există, aceasta indică prezența infecției în corpul uman.

7. Tipul de diagnostic al hepatitei de laborator include determinarea antigenilor și a anticorpilor în masa eritrocitelor. Cel mai des întâlnit HBsAg se manifestă în sistemul circulator chiar și în perioada de incubație a hepatitei. O persoană nu știe despre evoluția bolii sale, iar în schimbările sangvine sunt deja în curs de desfășurare. Atunci când hepatita este acută, HBsAg dispare din sânge. De obicei, HBsAg nu este prezent în prima lună a perioadei icterice, iar anticorpii acestui antigen încep să figureze în sistemul circulator la 90 de zile după infecție.

Un test de anticorpi pozitiv nu înseamnă că o persoană are hepatită. Este posibil ca el să fi suferit anterior hepatită fără un agent D. Dacă nu există HBsAg în sângele pacientului după tratament, dar există anticorpi, aceasta indică un prognostic bun care indică faptul că pacientul se recuperează. Dacă un pacient are hepatită cronică sau severă, atunci anticorpii pot apărea deja din primele zile ale perioadei icterice.

Echivalentul de încredere este IgM anti-HBc din sânge. Ele se dezvăluie la sfârșitul perioadei preicterice. Sunt prezenți întreaga perioadă a manifestărilor evidente. Dacă analiza conține IgM anti-HBc, înseamnă că virusul continuă să se înmulțească. La debutul recuperării, IgM anti-HBc dispare. Faza acută a bolii poate produce un test anti-HBc IgG. Ele vor fi detectate de-a lungul vieții unei persoane.

Când se termină perioada de incubație a hepatitei (în special autoimune), HBeAg începe să apară în sânge. Ei informează despre divizarea activă și creșterea numărului de particule infecțioase. Imediat ce începe perioada icterică, NVAAg dispare. Acesta este înlocuit cu anti-HBe. Anti-HBe indică faptul că activitatea infecției este redusă și revenirea va fi în curând. Dar reproducerea virusului nu se oprește!

Hepatita acută se poate transforma în cronică. Despre acest lucru vor vorbi identificate în sânge HBeAg. Dacă este prezent, înseamnă că probabilitatea transformării procesului într-o formă cronică este mare. Prezența HeVag indică un pacient foarte contagios.

Trebuie reamintit faptul că diagnosticul de laborator al hepatitei B, care dă un rezultat negativ pentru HBsAg, nu exclude diagnosticul în sine. Un important element crucial este prezența IgM anti-HBc în sânge. Acești anticorpi vor confirma boala cu exactitate. Dacă testul de sânge nu conține IgM anti-HBc, atunci aceasta poate indica prezența VHB, iar prezența acestor anticorpi indică o intensificare a infecției.

Detectarea ADN-ului hepatitei B

Cel mai important studiu pentru determinarea prezenței ADN-ului de virus este PCR. Analiza indică activitatea procesului infecțios. Cu această metodă puteți afla despre prognosticul bolii.

Dacă hepatita este mai favorabilă, ADN-ul VHB dispare din sânge în timpul perioadelor inițiale ale procesului de infectare. Diagnosticul de laborator sub formă de PCR furnizează date privind calitatea tratamentului (nu are efectul unui anumit medicament).

Pentru a înțelege ce tactici ar trebui luate pentru numirea măsurilor terapeutice, este necesar să se efectueze o metodă cantitativă de PCR. PCR cantitativ evidențiază o reacție pozitivă din terapie.

Baza pentru diagnostic

Pentru a face un diagnostic adecvat, vor fi necesare următoarele examinări:

  1. Inspecție zilnică, palpare.
  2. Ecografia ficatului.
  3. Analiza biochimică a sângelui (efectuată în mod repetat).
  4. Examinare pentru HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, total anti-HBc, ADN HBV.
  5. Markeri de VHB și VHC (hepatita virală este exclusă).
  6. Puncție hepatică.
  7. Biopsie hepatică. Cu ajutorul unui ac special, peretele abdominal este perforat și o mică bucată de ficat este îndepărtată pentru examinarea histologică (piesa are o dimensiune de cel mult jumătate de gram). Biopsia este cea mai recentă metodă de testare pentru hepatită. Datorită ei, puteți vorbi cel mai bine despre gradul de activitate al procesului infecțios, fibroza hepatică. O biopsie este o procedură chirurgicală. Aceasta poate duce la complicații, deci nu este adesea folosită pentru diagnosticare.
  8. Fibroelastografiya. Acesta poate fi folosit pentru a estima densitatea țesutului hepatic. Tehnica este similară ultrasunetelor. Studiul utilizează un senzor special care este instalat pe piele la locul de proiecție al ficatului.
  9. FibroTest. Se bazează pe numărarea anumitor sânge.

Hepatita cronică B

Hepatita cronică B continuă faza:

Faza 1 - Replicarea virusului. Virusul se multiplică cu o activitate crescută.

Faza 2 - integrare. Virusul se oprește înmulțind. Genomul viral începe să se integreze în ADN-ul celulelor hepatice normale, hepatocite.

Pentru a determina rata de progresie a virusului, este important să se înțeleagă severitatea procesului, rezultatul, gradul de întrerupere a celulelor hepatice. Diagnosticul de laborator al hepatitei cronice se bazează pe detectarea:

Dacă hepatita HBeAg-pozitivă (analiză pozitivă), atunci în masa eritrocitelor va fi:

  • în stadiul de reproducere - HBsAg, HBeAg, IgM anti-HBc, anti-HBc (total), ADN HBV;
  • în stadiul de inserție a hepatocitelor în ADN-HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (total), ADN HBV.

Dacă hepatita este seronegativă, atunci în masa sanguină va fi prezent HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, ADN HBV. În plus, prezența lor nu depinde deloc de stadiul procesului infecțios.

Diagnostice diferențiale

La efectuarea unui diagnostic, medicul este obligat să diferențieze hepatita B de alte boli - hepatita A, C, E, D. Diagnosticul final poate fi făcut numai după identificarea anumitor markeri specifici fiecăreia dintre celulele hepatitei în masa sângelui.

Hepatita trebuie diferențiată de alte boli importante: infecții virale respiratorii acute, calculi biliari, otrăvire alimentară, infecție intestinală, patologie chirurgicală a organelor abdominale și multe alte boli.

Autoimună hepatită

Pentru hepatitele autoimune, diagnosticul include următoarele examinări importante:

  1. Analiza masei globulelor roșii (OAK). Explicație: anemia (normocitară) din sânge este observată în hepatitele autoimune, un conținut redus de leucocite, trombocite și o ROE crescută. Dar se poate aștepta un grad mai mare de anemie.
  2. Urina. Decipherarea analizei de urină: conține proteine, celule roșii din sânge, bilirubină.
  3. Test de sânge pentru biochimie. Analiza foarte relevantă. Interpretare: o cantitate crescută de bilirubină, arginază crescută, o scădere a albuminei, o creștere a γ-globulinelor și un test timol. Testul de sublimare este redus. Anumiți indicatori pot fi măriți de 2 sau de mai multe ori. Acesta este un test pozitiv pentru hepatita autoimună.
  4. Analiza imunologică. Decodificarea: scade supresorii limfocitelor T, celulele lupusului apar în masa eritrocitelor, crește numărul de imunoglobuline, anticorpii la eritrocite.

Un test pozitiv pentru hepatită poate fi detectat printr-o metodă serologică de cercetare. Hepatita autoimună este o boală eterogenă.

ELISA pentru hepatita virală

9 martie 2017, 16:25 Articole de specialitate: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3 608

Pentru a detecta hepatita virală în organism, medicamentul utilizează pe scară largă o imunotezare enzimatică bazată pe detectarea concentrației și a tipului de antigeni utilizând anticorpi și enzime. Se efectuează în etape, prin cercetare de laborator, cu o mare acuratețe a indicațiilor. În funcție de cantitatea și clasa de anticorpi, culoarea și concentrația enzimei care utilizează ELISA și, în consecință, medicul diagnostichează boala, modificările.

Ce este ELISA?

Prezența hepatitei virale în corpul pacientului este determinată utilizând o metodă serologică de analiză a sângelui pentru prezența virusului VHC și a markerilor (corpuri și anticorpi) care îl indică. Testul imunosorbant legat de enzime (ELISA) examinează diferiți viruși, compuși cu masă moleculară mică, macromolecule, indicatorii lor calitativi și cantitativi, utilizând manifestarea reacției la antigeni. Pentru a face acest lucru, utilizați enzima ca etichetă pentru înregistrarea semnalului. Se utilizează din ce în ce mai mult în medicină, deoarece ELISA găsește în mod clar antigeni bine definiți, fără a le confunda cu alții, are o sensibilitate ridicată la prezența invaziei hepatitelor virale.

Dezavantajul unui astfel de diagnostic este incapacitatea de a identifica cauza bolii, deoarece metoda indică numai reacția sistemului imunitar al organismului. Rezultatele analizei sunt afectate de vaccinarea efectuată mai devreme. Timp de 8 ore înainte de analiză, se recomandă să nu se mănânce, nicotină, alcool. Baza testului ELISA este răspunsul enzimatic și imun al organismului la virus. Moleculele biologice se leagă de celulă și de elementele sale, microorganismele, detectează virusul, apoi produc enzime care vă permit să exprimați răspunsul imun într-un parametru vizibil și măsurabil.

Indicații pentru analiză

Hepatita virală în organism poate provoca cancer și ciroză hepatică. Importanța diagnosticului în timp util este incontestabilă. Metoda principală de diagnosticare este testul ELISA, care, cu mare precizie, determină prezența virusului HCV (IgM și IgG) și a activității oligoelementelor sale. Testele obligatorii pentru trecerea hepatitei virale:

  1. Persoanele cu grupuri de risc (dependenți de droguri, persoane cu SIDA, angajați ai instituțiilor medicale și de aplicare a legii).
  2. Persoanele cu hepatită acută sau cronică.
  3. Sarcina și planificarea femeilor însărcinate.

ELISA recunoaște boala în orice etapă. Rezultatele analizei, în medie, sunt pregătite în 2 zile.

Criteriile care determină importanța analizei

Testul ELISA determină prezența anticorpilor IgG, IgM, IgA de clasă. La diagnosticarea hepatitei virale, medicul nu acordă atenție tipului lor, deoarece prezența oricărei astfel de manifestări a virusului VHC indică deja o etapă acută sau cronică a bolii. În stadiile incipiente ale bolii, nivelul IgM crește (la 5 zile după infecție); în ziua 15 - 20, apar anticorpi IgG și pot rămâne în sângele uman pentru o lungă perioadă de timp chiar și după vindecare; IgA - apare după 10-14 zile, scade după tratament.

Dacă IgG și IgA sunt detectate după utilizarea medicamentelor și nivelul acestora rămâne la aceeași rată - purtătorul are o formă cronică de hepatită. Un criteriu important al testului va fi definirea clară a clasei de anticorpi disponibile și a cantității acestora. Pe baza acestui fapt, puteți cunoaște nu numai prezența bolii, ci și stadiul dezvoltării ei. Detectarea acestor elemente în sângele pacientului face posibilă prescrierea tratamentului corect și în timp util pentru a preveni consecințele mai grave.

Cum se face?

Alocați testul ELISA direct și nu direct. Etapele directe:

  1. Colectarea materialului biologic și plasarea acestuia în găuri speciale.
  2. În 15-30 de minute antigeni sunt atașați la suprafața gropilor.
  3. Adăugarea de anticorpi la godeurile la antigenul găsit. Toate au rămas timp de 1-5 ore.
  4. Îndepărtați antigenele neatasate (turnând conținutul godeurilor).
  5. Clătiți fântânile cu o soluție specială.
  6. Se adaugă soluție de enzime în godeuri. Lăsați timp de 30 de minute - 1 oră.
  7. Utilizarea colorimetriei (detectarea culorii și concentrarea culorii conținutului godeului, compararea cu indicatorii direct proporțional cu concentrația virusului).
Utilizarea pentru diagnosticul ELISA indirect va da un rezultat mai precis.

Metoda indirectă ELISA are loc cu utilizarea anticorpilor nemarcați la antigenii găsiți și adăugarea ulterioară a acestora etichetate. În primul rând, sângele este luat de la pacient și se răspândește în fântâni timp de 15-30 de minute. (anticorpii sunt fixați cu găuri). Apoi, anticorpii nemarcați sunt introduși în ele timp de 1-5 ore (se formează legătura dintre anticorpi și antigeni - complexul imunitar). Apoi, microelementele ne-atașate sunt turnate din godeuri și spălate cu o soluție specială. La următoarea etapă, tehnicianul de laborator adaugă urme de etichete la fântâni timp de 15-30 de minute. (aceasta se leagă nesetichetat cu eticheta cu formarea complexului "anticorp-anticorp-antigen"). Extra (în vrac) sunt îndepărtate din nou în timpul scurgerii și spălării cu soluție. Următoarea este enzima care modifică culoarea în 5-30 minute. rămâne în găuri și datele de culoare sunt comparate cu datele indicatorilor de masă. Testul ELISA indirect este mai precis.

Ce arată ELISA pentru hepatitele virale?

Imunologia permite detectarea prezenței infecției (virusuri hepatite de toate tipurile, HIV, herpes, sifilis, citomegalovirus, rujeolă, rubeolă, virusul oreionului, virusul Epstein-Barr), este un marker al bolilor autoimune, celulelor canceroase. Indică încălcările funcțiilor de reproducere (modificări ale testosteronului, prolactinei, estradiolului și progesteronului), disfuncția tiroidiană, infestarea helminților, chlamydia. Eficace pentru detectarea ureaplasmozei, tusei convulsive, virusului Dange, virusului West Nile, Borrelia. Lista definițiilor este mare, include multe elemente.

Confirmarea rezultatelor

Determinarea antigenului virusului HCV prin ELISA oferă o precizie de 98%. Este, de asemenea, folosit pentru retestarea materialului biologic cu indicatori anteriori fuzzy. Prezența antigenelor IgM nu este un indicator al hepatitei acute și necesită cercetări suplimentare. Când se repetă testul ELISA, rezultatele coincid cu 90-100%. În caz de discrepanță minimă, valoarea medie este luată ca indicator. Pentru acuratețea maximă în ceea ce privește medicii, sfătuiți în paralel să efectuați o analiză biochimică a sângelui. Pentru a testa rezultatele după testul imunologic al enzimei, puteți utiliza alte metode de diagnosticare.

Studiile privind virusul hepatitei B (ELISA și PCR)

Antigenul virusului hepatitei B (HBsAg)

Antigenul de suprafață al hepatitei B din ser este în mod normal absent.
Detectarea antigenului de suprafață al hepatitei B (HBsAg) în ser confirmă o infecție acută sau cronică cu virusul hepatitei B.

În cazul bolilor acute, HBsAg este detectat în ser în ultimele 1-2 săptămâni de la perioada de incubație și în primele 2-3 săptămâni din perioada clinică. Circulația HBsAg în sânge poate fi limitată la câteva zile, așa că trebuie să vă străduiți pentru o examinare inițială inițială a pacienților. Metoda ELISA permite detectarea HBsAg la mai mult de 90% dintre pacienți. Aproape la 5% dintre pacienți, cele mai sensibile metode de cercetare nu detectează HBsAg, în astfel de cazuri etiologia hepatitei virale B este confirmată de prezența anti-HBcAg JgM sau PCR.

Concentrația serică a HBsAg în toate formele de severitate a hepatitei B la înălțimea bolii are o gamă semnificativă de fluctuații, totuși, există un anumit tipar: în perioada acută există o relație inversă între concentrația HBsAg serică și severitatea bolii.

Concentrațiile mari de HBsAg sunt mai frecvente în formele ușoare și moderate ale bolii. În formele severe și maligne, concentrația de HBsAg în sânge este adesea scăzută, iar la 20% dintre pacienții cu formă severă și la 30% cu un antigen malign în sânge poate să nu fie detectată deloc. Apariția pe acest fundal la pacienții cu anticorpi anti-HBsAg este considerată un semn de diagnostic nefavorabil; se determină în forme maligne de hepatită B.

În cursul acut al hepatitei B, concentrația de HBsAg în sânge scade treptat până la dispariția completă a acestui antigen. HBsAg dispare la majoritatea pacienților în decurs de 3 luni de la debutul unei infecții acute.

O scădere a concentrației de HBsAg cu mai mult de 50% până la sfârșitul celei de-a treia săptămâni a perioadei acute, de regulă, indică o finalizare completă a procesului de infectare. De obicei, la pacienții cu o concentrație ridicată de HBsAg la înălțimea bolii, acesta este detectat în sânge timp de mai multe luni.
La pacienții cu concentrații scăzute de HBsAg dispare mult mai devreme (uneori la câteva zile după debutul bolii). În general, timpul de detectare a HBsAg variază de la câteva zile la 4-5 luni. Perioada maximă de detectare a HBsAg cu un curs neted de hepatită acută B nu depășește 6 luni de la debutul bolii.

HBsAg se găsește la oameni sănătoși, de regulă, în studii profilactice sau accidentale. În astfel de cazuri, sunt examinați și alți markeri ai hepatitei virale B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti-HBeAg și studiul funcției hepatice.

În cazul rezultatelor negative, sunt necesare studii repetate privind HBsAg.
Dacă testele de sânge repetate pentru mai mult de 3 luni indică HBsAg, acest pacient este clasificat ca un pacient cronic cu hepatită virală B.
Prezența HBsAg este destul de comună. Există peste 300 de milioane de transportatori în lume, iar în țara noastră există aproximativ 10 milioane de transportatori.
Terminarea circulației HBsAg cu seroconversie ulterioară (formarea anti-HBs) indică întotdeauna recuperarea - recuperarea organismului.

Un test de sânge pentru prezența HBsAg este utilizat în următoarele scopuri:

  • pentru diagnosticul de hepatită B acută:
    • perioada de incubație;
    • boli acute;
    • recuperarea precoce;
  • pentru diagnosticul hepatitei virale cronice B;
  • pentru boli:
    • hepatita cronică persistentă;
    • ciroza hepatică;
  • pentru screening-ul și identificarea pacienților din grupurile de risc:

  • pacienți cu hemotransfuzii frecvente;
  • pacienți cu insuficiență renală cronică;
  • pacienți cu hemodializă multiplă;
  • pacienții cu stări de imunodeficiență, inclusiv SIDA.
  • Evaluarea rezultatelor cercetării

    Rezultatele studiului sunt exprimate calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența HBsAg serică. Un rezultat pozitiv - identificarea HBsAg indică o incubare sau o perioadă acută de hepatită virală acută B, precum și de hepatită virală cronică B.

    Anticorpii la antigenul nuclear al virusului hepatitei B JgG (anti-HBcAg JgG)

    În mod normal, serul anti-HBcAg este absent în ser.
    La pacienții cu JgG anti-HBcAg apar în perioada acută de hepatită virală B și persistă pe tot parcursul vieții. Anti-HBcAg JgG este markerul principal al HBV transferat.

    Testele de sânge pentru JgG anti-HBcAg sunt utilizate pentru a diagnostica:

  • hepatita virală cronică B în prezența antigenului HBs în ser;
  • virusul hepatitei B.
  • Evaluarea rezultatelor cercetării

    Rezultatul studiului este exprimat calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența serului anti-HBcAg JgG. Un rezultat pozitiv - identificarea JgG anti-HBcAg indică o infecție acută, convalescență sau hepatită virală B transferată anterior.

    Antigenul "e" al virusului hepatitei B (HBeAg)

    În mod normal, HBeAg din ser este absent.
    HBeAg poate fi găsit în serul majorității pacienților cu hepatită virală acută B. De obicei, dispare în sânge înainte de antigenul HBs. Un nivel ridicat de HBeAg în primele săptămâni de boală sau detectarea acestuia pentru mai mult de 8 săptămâni dă motive să suspecteze o infecție cronică.

    Acest antigen este adesea detectat în hepatita cronică activă a etiologiei virale. De interes deosebit în definirea HBeAg este faptul că detecția sa caracterizează faza replicativă activă a procesului infecțios. S-a stabilit că concentrațiile ridicate de HBeAg corespund activității ridicate a ADN polimerazei și caracterizează replicarea activă a virusului.

    Prezența HBeAg în sânge indică infecția ridicată, adică prezența infecției active cu hepatită B în organismul examinat și este detectată numai în prezența antigenului HBs în sânge. La pacienții cu hepatită cronică activă, medicamentele antivirale sunt utilizate numai când HBeAg este detectat în sânge. Antigenul HBeAg - un marker al fazei acute și replicarea virusului hepatitei B.

    Un test de sânge pentru prezența antigenului HBe este utilizat pentru a diagnostica:

  • perioada de incubație a hepatitei virale B;
  • perioada prodromală a hepatitei virale B;
  • perioadă acută de hepatită virală B;
  • hepatita virală cronică persistentă B.
  • Evaluarea rezultatelor cercetării

    Rezultatul studiului este exprimat calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența HBeAg serică. Un rezultat pozitiv - detectarea HBeAg indică o incubare sau o perioadă acută de hepatită virală acută B sau replicarea continuă a virusului și infecțiozitatea pacientului.

    Anticorpii la antigenul "e" al virusului hepatitei B (anti-HBeAg)

    Anti-HBeAg în ser este în mod normal absent. Apariția anticorpilor anti-HBeAg indică, de obicei, îndepărtarea intensivă din corp a virusului hepatitei B și infecția minoră a pacientului.

    Acești anticorpi apar în perioada acută și persistă până la 5 ani după infectare. În hepatitele cronice persistente, anti-HBeAg se găsește în sângele pacientului împreună cu HBsAg. Seroconversia, adică tranziția HBeAg la anti-HBeAg, cu hepatită cronică activă, mai des favorabilă prognosticului, dar aceeași seroconversie nu îmbunătățește prognosticul transformării hepatice cirotice severe.

    Testele de sânge pentru prezența anti-HBeAg sunt utilizate în următoarele cazuri în diagnosticul hepatitei virale B:

  • stabilirea stadiului inițial al bolii;
  • infecție acută;
  • recuperarea precoce;
  • convalescenta;
  • recuperarea în etapa ulterioară.
  • diagnosticul hepatitei virale B transferate recent;
  • diagnosticul de hepatită virală cronică persistentă B.
  • Evaluarea rezultatelor cercetării

    Rezultatul studiului este exprimat calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența anticorpilor la HBeAg în ser. Un rezultat pozitiv îl reprezintă detectarea anticorpilor la HBeAg, ceea ce poate indica stadiul inițial al hepatitei virale acute, perioada acută de infecție, stadiul incipient de convalescență, convalescență, hepatita virală B transferată recent sau hepatita virală persistentă B.

    Criteriile pentru prezența hepatitei cronice B sunt:

  • detectarea sau detectarea periodică a ADN-ului VHB în sânge;
  • creșterea continuă sau periodică a activității ALT / AST în sânge;
  • semne morfologice de hepatită cronică în examinarea histologică a biopsiei hepatice.
  • Detectarea virusului hepatitei B prin PCR (calitativ)

    Virusul hepatitei B în sânge este în mod normal absent.
    Determinarea calitativă a virusului hepatitei B prin metoda PCR în sânge face posibilă confirmarea prezenței virusului în corpul pacientului și prin aceasta se stabilește etiologia bolii.

    Acest studiu oferă informații utile pentru diagnosticarea hepatitei virale acute în stadiul de incubație și în stadiul de dezvoltare timpuriu a bolii, atunci când principalii markeri serologici ai pacientului din sânge pot fi absenți. ADN viral seric este detectat la 50% din pacienți în absența HBeAg. Sensibilitatea analitică a metodei PCR nu este mai mică de 80 de particule virale în 5 μl, ultimul eșantion de detecție ADN, specificitate - 98%.

    Această metodă este importantă pentru diagnosticarea și monitorizarea cursului VHB cronic. Aproximativ 5-10% din cazurile de ciroză și alte afecțiuni hepatice cronice sunt cauzate de purtătorul cronic al virusului hepatitei B. Indicatorii activității unor astfel de boli sunt prezența HBeAg și a ADN-ului virusului hepatitei B în sânge.

    Metoda PCR face posibilă determinarea în sânge a ADN-ului virusului hepatitei B atât calitativ, cât și cantitativ. Fragmentul determinat în ambele cazuri este secvența unică de ADN a genei proteinei structurale a virusului hepatitei B.

    Detectarea ADN-ului virusului hepatitei B în biomaterial folosind PCR este necesară pentru:

  • rezolvarea unor rezultate serioase ale testelor serologice;
  • detectarea stadiului acut al bolii comparativ cu infecția sau contactul anterior;
  • controlul eficacității tratamentului antiviral.
  • Dispariția ADN-ului hepatitei B din sânge este un semn al eficacității terapiei

    Detectarea virusului hepatitei B prin PCR (cantitativ)

    Această metodă oferă informații importante despre intensitatea dezvoltării bolii, despre eficacitatea tratamentului și despre dezvoltarea rezistenței la medicamente active.
    Pentru diagnosticul de hepatită virală prin PCR în ser se utilizează sisteme de testare a căror sensibilitate este de 50-100 copii într-o probă, ceea ce face posibilă detectarea virusului la o concentrație de 5 x 10-3-104 copii / ml. PCR în hepatita virală B este cu siguranță necesar pentru judecarea replicării virale.

    ADN viral seric este detectat la 50% din pacienți în absența HBeAg. Serul de sânge, limfocitele și hepatobiopsia pot servi ca material pentru detectarea ADN-ului virusului hepatitei B.

    • Evaluarea nivelului de viremie este după cum urmează:
    • mai puțin de 2,10 ^ 5 copii / ml (mai puțin de 2,10 ^ 5 UI / ml) - viremie scăzută;
    • de la 2,10-5 copii / ml (2,10-5 IU / ml) la 2,10-6 copii / ml (8,10-5 IU / ml) - viremia medie;
    • mai mult de 2,10 ^ 6 copii / ml - viremie ridicată.

    Există o relație între rezultatul hepatitei virale acute și concentrația de ADN VHB în sângele pacientului. Cu un nivel scăzut de viremie, procesul de cronizare a infecției este aproape de zero, cu o medie, procesul este cronizat la 25-30% dintre pacienți și, cu un nivel ridicat de viremie, hepatita virală acută acută devine cel mai adesea cronică.

    Indicațiile pentru tratamentul interferonului-alfa HBV cronic trebuie considerate prezența markerilor de replicare virală activă (detectarea HBV HBV, HBeAg și ADN HBV în serul de sânge în ultimele 6 luni).

    Criteriile de evaluare a eficacității tratamentului sunt dispariția ADN-ului HBEAg și a VHB în sânge, care este de obicei însoțită de normalizarea nivelurilor transaminazelor și de remisia pe termen lung a bolii. ADN-ul VHB dispare din sânge până la a 5-a lună de tratament la 80% dintre pacienți. Reducerea nivelului de viremie cu 85% sau mai mult până în a treia zi de la începerea tratamentului comparativ cu valoarea inițială este un criteriu rapid și destul de precis pentru prezicerea eficacității terapiei.

    Cercetarea hepatitei virale prin metoda ife

    ELISA în diagnosticul hepatitei virale. Enzimă capabilități immunoassay

    Diagnosticul specific de laborator al hepatitei virale se bazează pe utilizarea metodelor de cercetare imuno-chimică și biologică moleculară. Principalele metode imunochemice sunt radioizotopi sau radioimune (RIA) și imunoteste (ELISA). Metodele de diagnostic imunochimice se bazează pe interacțiunea specifică a unui antigen - un anticorp cu identificarea ulterioară a complexului cu ajutorul etichetelor speciale. Cea mai comună imunoanaliză enzimatică.

    Primele rapoarte privind utilizarea imunotezei enzimatice. ca metodă de determinare a oricărei substanțe au fost publicate în 1971 simultan de două grupuri de cercetare - V. Van Weemen, A. Schuurs și E. Engvall, P. Perlmann. Testul imunologic al enzimei se bazează pe următorul principiu: pe faza solidă, care utilizează în principal suprafața godeurilor unei tablete de polistiren, este fixat antigenul agentului infecțios sau al anticorpului (adesea un amestec de anticorpi) față de antigeni care trebuie detectați. Acest antigen sau anticorpi, care sunt fixați pe faza solidă, se numesc imunosorbenți.

    Ca urmare a incubării imunosorbantului și a serului de testat în prezența unui agent detectabil, acestea sunt legate de complexul antigen - anticorp. După procedura de spălare, în timpul căreia antigeni și anticorpi nelegați sunt îndepărtați, se efectuează incubarea cu conjugatul. Ca un conjugat pentru detectarea HBsAg, se utilizează anti-HBs, în detectarea anticorpilor la virusul hepatitei C - anticorpi la imunoglobulinele umane (conjugat antivirus) marcate cu peroxidază de hrean. Ca urmare a acestei incubări, apare atașarea la complexele de antigen deja existente - anticorpul conjugatului introdus suplimentar. După îndepărtarea conjugatului nelegat (spălare), substratul este introdus în godeuri. Când se utilizează un conjugat de peroxidază, peroxidul de hidrogen este utilizat ca substrat în combinație cu un indicator, cel mai adesea utilizat ca ortofenilendiamină (OPD) sau tetrametilbenzidină (TMB). Rezultatul este estimat fotometric.

    Calitatea și fiabilitatea capacităților analitice ale metodei enzimatice de imunotestare sunt caracterizate de un număr de criterii care includ sensibilitatea, specificitatea, acuratețea și reproductibilitatea.

    Sensibilitatea este cantitatea minimă a unei substanțe care poate fi detectată prin testul imunologic al enzimei. În acest caz, limita inferioară a sensibilității acestei metode este concentrația substanței de testat din probă, care corespunde celui mai mic rezultat pozitiv al determinării, care este statistic semnificativ diferit de indicatorii probelor deliberat negative. Sensibilitatea unui IFTS depinde de o serie de circumstanțe legate atât de proiectarea sistemului de testare (afinitatea imunosorbantului, calitatea sistemelor de extracție și tampon) cât și de rezoluția și acuratețea metodei de înregistrare.

    Specificitate - capacitatea de a identifica exact componentele pentru determinarea cărora este proiectată această imunotestare a enzimei. Specificitatea ELISA este determinată în mare măsură de reacția încrucișată a anticorpilor sau antigenelor (adică compoziția utilizată ca imunosorbant) cu compuși apropiați, precum și compoziția mediului de incubație (efect de matrice).

    Corectitudinea - corespondența valorii medii a rezultatelor determinărilor repetate ale aceleiași probe de control cu ​​valoarea reală a parametrului măsurat. Precizia determinării în ELISA depinde de calitatea sistemului de testare și a eșantionului de control. Pentru sistemele de testare imună bine, indicatorii de corectitudine se situează în intervalul 90-110%. Particularitatea cercetării biomedicale în ELISA este imposibilitatea stabilirii valorii exacte și, prin urmare, media a mai multor laboratoare de experți este considerată drept adevărată valoare. Criteriul statistic pentru corectitudine este media aritmetică și gradul de deviere a acesteia de la valoarea reală, exprimată ca procent.

    Reproductibilitatea - capacitatea sistemului de testare de a arăta aceleași valori cu studii repetate ale aceluiași eșantion. Reproductibilitatea depinde atat de erorile aleatoare (erorile) in timpul procedurii de reactie, cat si de calitatea sistemelor de testare si de acuratetea metodei de inregistrare a rezultatelor. Se consideră că reproductibilitatea acelorași probe de control ale aceleiași companii în laboratoare diferite nu trebuie să depășească valoarea coeficientului de variație de 15%.

    Există mai multe scheme specifice de ELISA pentru determinarea markerilor hepatitei virale: a) testarea imunoenzimatică directă; b) testarea imunoenzimatică indirectă; c) inhibarea competitivă; c) metoda "capcană" sau "capturare".

    Din metodele biologice moleculare pentru diagnosticul hepatitei virale, reacția în lanț a polimerazei și hibridizarea sunt utilizate mai frecvent. Aceste metode, în special PCR, fac posibilă detectarea unor cantități foarte mici de ADN sau ARN viral specific și, prin urmare, judecarea replicării și, în unele cazuri, a activității de replicare.

    Testul de sânge pentru hepatita C

    Hepatita C este una dintre cele mai frecvente afecțiuni hepatice care apar atunci când sunt infectate cu virusul hepatitei C (VHC), care intră în organism în primul rând atunci când intră în contact cu sângele unei persoane infectate. Se înregistrează hepatită cronică și acută C. La 70-80% dintre pacienții cu hepatită C acută nu există simptome ale bolii, numai în unele cazuri, după un timp după infecție, există manifestări ale bolii, care sunt exprimate prin oboseală, durere abdominală, pierderea apetitului, urină, vărsături, greață, fecale ușoare, icter, durere la nivelul articulațiilor. De regulă, simptomele apar la 6-7 săptămâni după infecție, dar durata apariției semnelor de boală variază de la 2 săptămâni la șase luni. Dacă apar simptomele de mai sus, trebuie să consultați un medic cu boli infecțioase și să aveți un test de sânge pentru hepatita C. Diagnosticul hepatitei, efectuat în timp util, poate detecta boala în stadiile incipiente și poate crește semnificativ șansele de recuperare.

    Când este programat un test de hepatită C

    Situații în care este necesar un test pentru hepatita C:

    • în timpul sarcinii și al planificării familiale;
    • pacienți cu simptome de hepatită cronică sau acută;
    • persoana este în pericol. Aceștia sunt lucrători medicali, persoane în penitenciare, ofițeri de aplicare a legii, oameni care folosesc droguri, au un număr mare de parteneri sexuali, au SIDA, sunt pe hemodializă și alții.

    Pregătirea pentru analiza hepatitei C

    Nu este necesară pregătirea specială pentru analiza hepatitei C. Pentru analiză, sângele este luat dintr-o venă pe un stomac gol, în același timp, cel puțin opt ore ar trebui să treacă după ultima masă.

    Testul ELISA pentru hepatita C

    Prima analiză, prescrisă de obicei pentru diagnosticarea testului ELISA pentru hepatita C (analiză imunosorbantă legată de enzime). Analizele ELISA de hepatită C fac posibilă detectarea prezenței anticorpilor la virusul hepatitei C (anti-HCVAb) din sânge. Dacă rezultatul testului ELISA este pozitiv, atunci acesta indică prezența contactului corpului cu virusul hepatitei C. Dar 40% dintre persoanele care au ELISA pozitiv nu detectează virusul în sânge. Acest fenomen este numit un rezultat fals pozitiv. De asemenea, cu ajutorul ELISA, sângele donatorului este verificat.

    RIBA pentru hepatita C

    Analiza RIBA pentru hepatita C este utilizată pentru a confirma un rezultat pozitiv ELISA. Metoda de imunoblotare recombinantă (RIBA) este un studiu mai precis al prezenței anticorpilor la virusul hepatitei C. Prezența virusului hepatitei C în organism, de asemenea, nu determină un rezultat pozitiv, ci doar confirmă prezența anticorpilor.

    Teste de PCR pentru hepatita C

    Pentru a detecta prezența virusurilor hepatitei C în sânge (ARN HCV) și pentru a face un diagnostic, acestea utilizează cel mai adesea analiza prin metoda reacției în lanț a polimerazei (PCR). Acest studiu face posibilă detectarea cu precizie ridicată a prezenței în sânge a unei cantități mici de virus. Analiza PCR pentru hepatita C poate dezvălui prezența unui virus deja la 5 zile după infecție, cu mult înainte de apariția anticorpilor. Când rezultatul analizei PCR este pozitiv, înseamnă prezența unei infecții active.

    Există astfel de variații ale analizei PCR:

    • cantitative PCR, care permite determinarea nu numai a faptului de prezența virusului, dar și a încărcăturii virale (cantitatea de virus). Acest indicator este foarte important pentru determinarea eficacității tratamentului;
    • genotipul care stabilește genotipul virusului hepatitei C, care este important pentru determinarea duratei și a tacticii tratamentului. Există mai mult de 10 genotipuri ale virusului hepatitei C, dar pentru practica clinică este suficient să se definească cinci dintre cele mai comune tipuri: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

    Analiza PCR cantitativă este efectuată:

    • cu un test calitativ pozitiv pentru prezența ARN-ului virusului hepatitei C în ser;
    • pentru o evaluare corectă a eficacității tratamentului;
    • pentru a determina tactica tratamentului pacientului.

    Nu există o relație directă între severitatea hepatitei C și cantitatea de virus din sânge. Concentrația virusului afectează infecțiozitatea bolii, adică cu cât este mai mare cantitatea de virus din sângele pacientului, cu atât este mai mare riscul de transmitere a virusului, de exemplu prin contact sexual sau de la mamă la copil. De asemenea, eficiența tratamentului depinde de concentrația virusului. În timpul terapiei, un factor favorabil este o sarcină virală scăzută, iar una foarte ridicată este nefavorabilă.

    Analiza genotipică se face:

    • cu un test calitativ pozitiv pentru prezența ARN-ului virusului hepatitei C în ser;
    • pentru o evaluare corectă a eficacității tratamentului;
    • pentru a determina tactica tratamentului pacientului;
    • să prezică cronizarea procesului infecțios;
    • pentru a determina progresia bolii.

    Detectarea genotipului virusului are o mare importanță pentru determinarea duratei tratamentului, ceea ce este important, deoarece interferonul are o gamă largă de efecte secundare și o toleranță scăzută la pacienți.

    Analiza de decodificare pentru hepatita C

    În mod normal, virusul ARN, anticorpii împotriva acestora și antigeni sunt complet absenți. Prezența anticorpilor în sânge indică prezența hepatitei cronice sau acute C sau a perioadei de recuperare. Dacă ARN-ul HCV este prezent în sânge, determinat prin analiza PCR, aceasta indică prezența unui virus în sânge.

    Cu o tehnică de testare incorectă, de transport și de anomalii ale sângelui, analiza PCR poate afișa uneori rezultate fals pozitive. Analizele de ELISA și RIBA în stadiile incipiente ale bolii, când organismul nu a produs încă o cantitate suficientă de anticorpi, ar putea prezenta un rezultat fals negativ.

    Dacă, atunci când se descifrează testul pentru hepatita C, se obțin rezultate pozitive, este necesar să se contacteze un medic bolnav infecțios și un gastroenterolog pentru diagnostic și tratament suplimentar.

    Neutrofile segmentate coborâte

    Trombocitele pentru copii sunt normale, ridicate, coborâte

    Hormon de stimulare a tiroidei TGT

    Diagnosticul hepatitei

    Nu se poate determina imediat prezența hepatitei în organism, deoarece perioada de incubație a bolii poate dura până la patru săptămâni. Când apar primele semne ale bolii, apar schimbări radicale în compoziția sângelui în organismul afectat: o analiză biochimică raportează o problemă gravă de sănătate și prezența unui virus patogen. Cu toate acestea, pentru a face un diagnostic final, nu este suficient să donați sânge pentru hepatită, precum și un diagnostic detaliat de hepatită.

    Diagnosticul de laborator al hepatitei

    Este de dorit să se efectueze după sfârșitul perioadei de incubație, astfel încât medicul cu cea mai mare precizie să determine boala hepatică prezentă în organism. În caz contrar, tratamentul prescris nu va da efectul terapeutic dorit și chiar va exacerba imaginea clinică predominantă.

    Diagnosticul hepatitei A

    De obicei, diagnosticul de hepatită A începe cu o întrebare detaliată a pacientului și numirea unui număr de teste care trebuie efectuate cât mai repede posibil. Aceasta este:

    • analiză sanguină biochimică;
    • numărul total de sânge;
    • Metoda PCR;
    • ELISA;
    • coagulare.

    Dacă boala lui Botkin progresează, atunci se observă un salt anormal de bilirubină, AlAT și AsAT, probă de timol conform rezultatelor analizei biochimice a sângelui. Mai mult, se produc IgM anti-HAV specific, care sunt un fapt incontestabil al prezenței hepatitei A.
    În general, analiza sângelui este determinată de declinul leucocitelor, de saltul ESR și de limfocitoza. Și totuși, cea mai fiabilă este metoda PCR, care determină indicatorul ARN al virusului patogen.
    În plus, doctorul studiază simptomele bolii, după care poate face un diagnostic final și trece până la cea mai eficientă terapie. Nevoia de examinare instrumentală este extrem de rară. După un tratament conservator reușit în condițiile spitalizării și carantinei pacientului, se așteaptă o recuperare finală, iar hepatita A nu se reapare.

    Diagnosticul hepatitei B

    Determinarea prezenței virusului hepatitei B este, de asemenea, posibilă în funcție de rezultatele testelor de laborator, iar pentru aceasta este necesar să se doteze sânge pentru hepatită. Prin natura, virusul patogen are trei antigene principale - HBsAg, HBcAg și HBeAg, la care se produc anticorpi în organism. Principala caracteristică a acestei imagini clinice este ELISA - ELISA, care arată doar markeri specifici ai hepatitei B.
    Imediat trebuie clarificat faptul că antigenul HBsAg apare în sânge chiar înainte de primele simptome de hepatită și este determinat în mod fiabil în perioada icterică. Cu toate acestea, un test negativ nu exclude prezența hepatitei B și, prin urmare, necesită utilizarea unei metode de reacție în lanț la fel de eficientă (PCR).
    Dacă bănuiți că hepatita B este obligatorie este un test de sânge biochimic, care este recomandat să treacă pe primul loc. Efectuarea unei biopsii a ficatului și a ecografiei organelor peritoneale este discutată individual, dar când istoricul bolii este foarte clar, nu este nevoie de metode de examinare clinică.

    Echograma hepatică în hepatita autoimună în stadiul hepatitei cronice

    Diagnosticul hepatitei C

    Pentru a face acest diagnostic, nu este suficient să donați sânge pentru hepatită, deoarece virusul poate predomina în organism într-o formă latentă. Cu toate acestea, principalele teste de laborator sunt toate analizele prezentate mai sus, precum și performanța suplimentară a unei biopsii hepatice. Această examinare microscopică a materialului biologic (în cazul nostru, o bucată de țesut hepatic) determină amploarea procesului patologic și a fibrozei tisulare. Eșantionarea materialelor se efectuează sub anestezie locală, complicațiile unei astfel de proceduri sunt extrem de rare în practica medicală.
    Dacă se suspectează hepatita C, principala metodă de examinare clinică este o ultrasunete a organelor peritoneale. Motivul este simplu: boala este adesea manifestată printr-o schimbare vizuală a ficatului afectat, modificări ale structurii și dimensiunii acesteia. Astfel puteți determina:

    • mărimea ficatului, a splinei, a pancreasului și a vezicii biliare;
    • modificări patologice în aceste organe;
    • fluxul general de sânge în organele peritoneale;
    • zona optimă pentru efectuarea unei biopsii hepatice.

    Această metodă de examinare clinică determină toate patologiile focale ale unui organ la nivel microscopic. Dacă ficatul este reprezentat pe ecran într-o scară gri, este necesară biopsia imediată, deoarece culoarea gri vizualizează țesuturile afectate ale "filtrului uman".

    Prevenirea hepatitelor

    De vreme ce boala nu se manifestă imediat, este departe de toate imaginile clinice care au început tratamentul imediat. Pacientul pur și simplu nu poate fi conștient de existența unui virus patogen în organism, care, la rândul său, se răspândește rapid în sânge și infectează celulele hepatice sănătoase.
    Pentru a evita o astfel de soartă tragică, se recomandă respectarea tuturor măsurilor preventive. O asemenea vigilență va reduce în mod semnificativ riscul de morbiditate și vă va salva de pe urma unor probleme grave de sănătate în viitor. Regulile de bază ale prevenirii sunt prezentate mai jos:

    • spală-ți mâinile după stradă;
    • să se supună procesării de înaltă calitate a legumelor și fructelor proaspete;
    • să efectueze toate vaccinările preventive specificate în planul calendaristic anual;
    • atitudinea selectivă față de partenerii sexuali;
    • evitați contactul cu bolnavii;
    • utilizați numai seringi de unică folosință și fiți deosebit de vigilent la stațiile de transfuzie sanguină.

    De asemenea, se recomandă să administrați în mod regulat (o dată la șase luni) sânge pentru hepatită, pentru a vă asigura că virusul nu penetrează în organism și nu infectează celulele hepatice o dată sănătoase. Dacă diagnosticul este determinat, acesta trebuie să devină imediat un cont de dispensar și să urmeze toate recomandările unui specialist.

    Autor de publicare:
    Syropyatov Serghei Nikolaevich
    Educație: Universitatea de Stat din Rostov (Universitatea de Stat din Rostov), ​​Departamentul de Gastroenterologie și Endoscopie.
    gastroenterolog
    Doctor în Științe Medicale