Determinarea tulburărilor de metabolism al pigmentului este de interes diagnostic din două puncte de vedere: evaluarea stării funcționale a celulelor hepatice și diferențierea diferitelor tipuri de icter (hepatic, suprahepatic și subhepatic).
Studiile lui Talafant (1956) și Schmidt (1956) și lucrarea lui Billing, Lathe (1958) și Bollman (1959), care au folosit metoda cromatografică pentru studiul bilirubinei, au făcut posibilă identificarea etapelor individuale ale metabolismului pigmentului. Trei forme diferite de bilirubină sunt determinate prin cromatografie în hârtie: bilirubina liberă (nu este asociată cu acidul glucuronic), bilirubina monoglucuronidă și bilirubindiglucuronida *. Termenii bilirubina "directă" și "indirectă" trebuie lăsați ca și cum nu ar reflecta esența procesului de schimbare a bilirubinei. Conform conceptelor moderne, bilirubina liberă, formată în SRE, este legată de albumină și circulă sub formă de complex de albumină-bilirubină în sânge și intră în ficat. În celulele Kupffer, complexul se descompune, bilirubina liberă insolubilă intră în celulele hepatice - hepatocitele. În hepatocite cu participarea sistemelor de transferază, bilirubina este legată de acidul glucuronic. Di- și monoglucuronurile solubile în apă sunt transferate din celulele hepatice către capilarele biliare. Bilirubinemia crescută - icter - se poate datora: 1) creșterii formării bilirubinei libere în reticuloendoteliu (icter hemolitic sau suprahepatic); 2) obturarea tractului biliar (icter subepatic, obstructiv); 3) deteriorarea celulelor hepatice cu formarea letală a bilirubinelor și eliberarea lor în lumenul capilarelor biliare (icter hepatic); 4) insuficiența congenitală a sistemului de transferază a celulelor hepatice cu formare de glucuronid de bilirubine afectată (icter congenital non-hemolitic).
La indivizii sănătoși, în cromatograme se determină numai fracțiunea de bilirubină liberă. Odată cu înfrângerea parenchimului hepatic, împreună cu o creștere a cantității de bilirubină liberă, există fracțiuni de glucuronuri de bilirubină. Aceasta indică prezența sintezei de glucuronid în ficat și intrarea retrogradă a compușilor rezultat în sânge. Studiile 3. D. Schwartzman (1961) au arătat o relație între gradul de leziune a parenchimului hepatic și modificarea conținutului fracțiunilor individuale de bilirubină din sânge.
Icterul hemolitic se caracterizează printr-o creștere a cantității totale de bilirubină, în principal datorită liberei circulații. Uneori, cu icter hemolitic, apare o cantitate mică de monoglucuronid de bilirubină, ceea ce indică o încălcare a funcției celulelor hepatice. Există schimbări similare în cazul hemolitic congenital și al altor tipuri de icter asociate cu formarea glucuronocidului afectat datorită insuficienței sistemelor de transferază.
În icterul mecanic, un studiu cromatografic relevă o creștere a numărului tuturor celor trei fracțiuni de bilirubină, dar, spre deosebire de boala lui Botkin, nu există o caracteristică ciclică caracteristică a bolii la apariția și dispariția fracțiunii di și monoglucuronidice. Apariția acestor fracții în icterul obstructiv se datorează unei încălcări a fluxului de bilă cu continuarea sintezei glucuronidelor.
Ca teste pentru evaluarea funcției hepatice în domeniul metabolismului pigmentar, împreună cu determinarea în sânge a cantității de bilirubină totală și a fracțiilor sale, se determină bilirubina în bilă, urobilin în urină și stercobilină în fecale.
În bilă, bilirubina se găsește sub formă de glucuronuri. Cantitatea sa în conținutul duodenal fluctuează dramatic în porțiuni individuale de bilă, concentrația scade cu creșterea cantității de bilă. Raportul dintre cantitatea de mono- și diglucuronid în bilă a indivizilor sănătoși este de 1: 3. Un studiu cromatografic al conținutului duodenal al pacienților cu boală Botkin relevă o scădere uniformă a ambelor fracții de bilirubină, menținând în același timp raportul lor normal; pe măsură ce recuperarea crește, eliberarea creșterii mono- și diglucuronidei (3. G. Bezkorovainaya, 1964).
Următorul pas în schimbarea bilirubinei este formarea corpurilor urobilin, determinate în urină sub formă de I-urobilinogen (mezobilubinogen), D-urobilinogen și L-urobilinogen (produsul final al schimbării bilirubinei). Uleiul proaspăt provocat de urină se oxidează rapid la urobilinii corespunzători.
În ceea ce privește locul și mecanismul de formare a corpurilor urobilin din bilirubină, în prezent există două teorii: clasicul intestinal și dualist. Conform teoriei clasice, transformarea bilirubinglyukuronidei în mezobilubrubinogen și urobilinogen are loc în colon sub influența bacteriilor. O cantitate mică din aceasta este absorbită, prin sistemul venei portale intră în ficat și este re-excretată în bilă și distrusă parțial. Urobilinogenul, care nu este absorbit sub influența microbilor, suferă modificări ulterioare și se transformă în stercobilinogen. O mică parte a stercobilinogenului este absorbită în colonul superior și intră prin vena portalului în ficat (și este distrusă acolo), în timp ce din colonul distal, stercobilinogenul fiind absorbit intră în circulație în venele hemoroidale și se excretă în urină. Cea mai mare parte a sterkobilinogenului este excretată în fecale, transformându-se în sterkobilin.
Conform teoriei dualiste a lui Baumgartel, transformarea bilirubinei în urobilinogen are loc în intestin și în tractul biliar: procesul de transformare începe în secțiunile inferioare ale tractului biliar și vezicii biliare sub influența enzimelor celulare. Astfel, atât bilirubina, cât și urobilinogenul intră în intestinul subțire, acesta din urmă fiind absorbit, iar prin sistemul venei porte intra în ficat și se dezintegrează acolo. Bilirubina sub influența microflorei a colonului se transformă în mezobilubirubin și apoi în stercobilinogen. Majoritatea stercobilinogenului este excretată în fecale, o mică parte este absorbită și prin vene hemoroidale intră în circulația sistemică și este excretată în urină.
Determinarea corpurilor urobilinei și a stercobiogenogenului în urină și fecale are o mare valoare diagnostică nu numai pentru detectarea leziunilor parenchimului hepatic, dar și pentru determinarea naturii icterului.
Clinica utilizează adesea tehnici care determină cantitatea totală de stercobilină, stercobilinogen, toate formele de urobilinogen și urobilin. Termenul "urobilin" se referă la substanțele conținute în urină, termenul "stercobilin" - conținut în fecale **.
Dacă parenchimul hepatic este afectat, unul dintre simptomele timpurii ale bolii este o creștere a cantității de urobilin în urină.
În cazul icterului obstructiv, prezența unei anumite cantități de urobilin în urină în cazul blocării totale a ductului biliar comun se explică prin formarea sa în bilă veziculară și pasaje intrahepatice. Posibilitatea acestui lucru este recunoscută în această situație de către suporterii teoriei clasice, care explică acest fapt prin apariția microflorei în tractul biliar în timpul stazei biliare. În cazul blocării prelungite a tractului biliar, urobilinuria poate crește datorită deteriorării celulelor hepatice.
Pentru diagnosticul diferențial al naturii icterului, o metodă de diagnostic accesibilă și valoroasă este de a determina raportul dintre cantitatea de urobilin în urină și stercobilină în fecale.
În mod normal, excreția zilnică a stercobilinei cu fecale variază de la 100 la 300 mg, depășind cantitatea de urobilin din urină cu 10 până la 30 de ori.
Când icterul hepatic datorită scăderii bilirubinei cu bila, cantitatea de stercobilină din fecale scade; în același timp, urobilinuria crește datorită încălcării transformării corpurilor urobilin și a stercobilinogenului în hepatocite. Raportul urobilin / stercobilin, egal în norma 1: 10-1: 30, se modifică la 1: 5-1: 1; în leziunile severe ale ficatului, coeficientul urobilin este distorsionat, ajungând la 3: 1, adică excreția zilnică de urobilină în urină depășește cantitatea de stercobilină din fecale.
Cu icter hemolitic datorat pleocromiei biliare, cantitatea de stercobilină crește în unele cazuri la 10.000 mg. Raportul dintre cantitatea de urobilin și stercobilină poate ajunge până la 1: 300-1: 1000.
Determinarea coeficientului urobilin este o metodă valoroasă în diagnosticul icterului hemolitic, dar schimbările caracteristice ale coeficientului sunt determinate numai în timpul declanșării crizei hemolitice.
Rolul ficatului în metabolismul pigmentului
Luați în considerare numai pigmenții hemocromogenici care se formează în organism în timpul defalcării hemoglobinei (într-o măsură mult mai mică în timpul defalcării mioglobinei, citocromului etc.). Dezintegrarea hemoglobinei apare în celulele macrofagelor, în special în celulele reticuloendoteliale stelate, precum și în histiocitele țesutului conjunctiv al oricărui organ.
După cum se observă (vezi capitolul 13), etapa inițială a dezintegrării hemoglobinei este ruperea unei singure punți metine cu formarea de verdoglobină. În plus, atomul de fier și proteina globinei sunt separate de molecula de verdoglobină. Ca rezultat, se formează biliverdin, care este un lanț de patru inele de pirol conectate prin punți de metan. Apoi, biliverdin, recuperând, se transformă în bilirubină - un pigment secretat de la nivelul bilei și, prin urmare, numit pigment biliar. Bilirubina rezultata se numeste bilirubina indirecta (neconjugata). Este insolubil în apă, dă o reacție indirectă cu un agent diazoreactiv, adică reacția are loc numai după tratarea prealabilă cu alcool.
În ficat, bilirubina se leagă (conjugați) cu acidul glucuronic. Această reacție este catalizată de enzima UDP-glucuroniltransferază, în timp ce acidul glucuronic reacționează sub forma activă, adică sub formă de UDFGK. Burerubina glucuronida rezultata se numeste bilirubina directa (bilirubina conjugata). Este solubil în apă și dă o reacție directă cu un agent diazoreactiv. Majoritatea bilirubinei se leagă de două molecule de acid glucuronic, formând diglucuronid bilirubina:
Fig. 16.4. Schimbul normal al corpurilor urobilinogene (scheme).
Formată în bilirubina directă a ficatului, împreună cu o foarte mică parte a bilirubinei indirecte este excretată în bilă în intestinul subțire. Aici acidul glucuronic este scindat de la bilirubina directa si recuperarea acestuia are loc cu formarea succesiva de mezobilubin si mezobilinogen (urobilinogen). Se crede că aproximativ 10% din bilirubină este redusă la mesobliogenogen pe calea spre intestinul subțire, adică în tractul biliar extrahepatic și vezica biliară. Din intestinul subțire, o parte a mezobilinogenului (urobilinogen) este resorbită prin peretele intestinal, intră în vena portalului și este transferată prin fluxul sanguin către ficat, unde se împarte complet la di- și tripirolii. Astfel, mesozinogenul nu intră în circulația generală a sângelui și a urinei.
Cantitatea principală de mesobilinogen din intestinul subțire intră în colon și este restaurată aici la stercobilinogen cu participarea microflorei anaerobe. Stercobilinogenul format în părțile inferioare ale colonului (în principal în rect) este oxidat până la sterko-bilina și excretat în fecale. Doar o mică parte a stercobilinogenului este absorbită în sistemul inferior vena cava (prima intra în vena hemoroidală) și este ulterior excretată în urină. În consecință, în urină normală umană sunt prezente urme de stercobilinogen (pe zi se excretă în urină până la 4 mg). Din păcate, până în prezent, în practica clinică, stercobilinogenul, conținut în urină normală, continuă să se numească urobilinogen. În fig. 16.4 prezintă schematic modurile de formare a corpurilor urobilinogene în corpul uman.
Termenul "urobilinogen de urină" a devenit rădăcină în practica clinică. Acest termen ar trebui să fie înțeles ca acei derivați ai bilirubinei (biliru-binizi), care se găsesc în urină. O reacție pozitivă la urobilinogen se poate datora unui conținut crescut de bilirubinoid în urină și este, de regulă, o reflectare a patologiei.
Determinarea conținutului clinic bilirubinei în sânge urină (total, direct și indirect) și urobilinogen este importantă în diagnosticul diferențial al icter etiologii diverse (Fig. 16.5). icter hemolitic ( „suprarenal“) datorită hemolizei crescut de eritrocite și distrugerea hemoglobinei apare formarea intensiva a bilirubinei indirecte în sistemul reticuloendotelial (vezi. Fig. 16.5, B). Ficatul nu poate folosi o cantitate atât de mare de bilirubină indirectă, ceea ce duce la acumularea acestuia în sânge și țesuturi. În acest caz, în ficat, se sintetizează o cantitate crescută de bilirubină directă, care cu bila intră în intestin. În intestinul subțire, mezobilinogenul se formează în cantități crescute și, ulterior, stercobilinogen. Partea absorbită a mezobilinogenului este utilizată de ficat, iar sterocobilinogenul resorbabil în intestinul gros este excretat în urină. Astfel, pentru icter hemolitic este de obicei caracterizat prin următorii parametrii clinici și de laborator: creșterea nivelului bilirubinei generale și indirecte în sânge în urină - lipsa bilirubinei (bilirubină indirectă nu este filtrat prin rinichi), și o reacție pozitivă la urobilinogen (datorită contactului crescut cu sânge și sterkobilinogena urină, și, în cazuri severe - și la mezobilinogena cheltuială, nu dispun de ficat); galben-galben pielii ton (o combinație de icter și anemie); o creștere a dimensiunii splinei; fecale colorate.
Fig. 16.5. Patogeneza bilirubinemiei în diverse condiții patologice (scheme). a este norma; b - hemoliză; in - congestie în capilarele biliare; d - deteriorarea celulelor parenchimale hepatice; 1 - capilare sanguină; 2 - celule hepatice; 3 - capilare biliară.
Atunci când icterul mecanic (obstructiv sau "subhepatic") (vezi figura 16.5, c), fluxul de bilă este distrus (blocarea canalului biliar comun cu o piatră, cancerul capului pancreatic). Acest lucru duce la modificări distructive ale ficatului și la intrarea în sânge a elementelor biliare (bilirubină, colesterol, acizi biliari). Cu obstrucția completă a ductului biliar comun, bila nu intră în intestin, prin urmare, formarea de bilirubinoide în intestin nu are loc, fecalele sunt decolorate și reacția la urobilinogenul urinei este negativă. Astfel, cu icterul obstructiv din sânge, cantitatea de bilirubină totală este crescută (datorită direcției), conținutul de colesterol și acizii biliari este crescut și nivelul ridicat al bilirubinei (direct) în urină. Caracteristicile clinice ale icterului obstructiv sunt colorarea icterică a pielii, fecalele incolore, mâncărimea pielii (iritarea terminațiilor nervoase cu acizii biliari depuși pe piele). Trebuie remarcat faptul că icterul obstructiv pe termen lung poate afecta semnificativ ficatul, inclusiv una dintre principalele detoxificări. În acest caz, se poate produce un "eșec" parțial al ficatului de la bilirubina indirectă, ceea ce poate duce la acumularea acestuia în sânge. Cu alte cuvinte, o creștere a nivelului de fracțiune de bilirubină indirectă în icterul obstructiv este un semn prognostic prost.
Atunci când icterul parenchimal ("hepatic"), care apare cel mai des în leziunea sa virală, dezvoltă procese inflamatorii și distructive în ficat, ceea ce duce la o încălcare a funcțiilor sale. În stadiile inițiale ale hepatitei se menține procesul de captare și glucuronirovaniya indice bilirubinei, totuși, bilirubina directă formată în condițiile de distrugere a parenchimului hepatic cade parțial în circulația sistemică, ceea ce duce la icter. Excreția bilei este de asemenea spartă, bilirubina în intestin devine mai puțin decât în mod normal. Mezobilogenul se formează mai puțin decât de obicei și o cantitate mai mică este absorbită în intestin. Cu toate acestea, chiar și această cantitate mică de mesobliogenogen care intră în ficat nu este absorbită de acesta. Mesobilinogenul, "evitând", intră în sânge și apoi excretat în urină, ceea ce determină o reacție pozitivă la urobilinogen. Cantitatea de stercobilinogen formată este de asemenea redusă, prin urmare fecalele sunt hipocolice. Deci, cu icterul parenchimat, se înregistrează o creștere a concentrației sanguine a bilirubinei totale, în principal datorită administrării directe. În fecale, conținutul de stercobinogen este redus. Reacția la urina urobilinogenă este pozitivă datorită ingerării mezobilinogenului. Trebuie remarcat faptul că, cu hepatită progresivă, atunci când ficatul își pierde funcția de detoxifiere, o cantitate semnificativă de bilirubină indirectă se acumulează în sânge. În plus, cu o inflamație pronunțată a ficatului, poate apare compresia capilarelor și a canalelor biliare, apare colestază intrahepatică, ceea ce conferă imaginilor mecanice icterului parenchimat cu imaginea clinică adecvată (fecale acholice, lipsa reacției la urobilinogen).
În fila. 16.2 prezintă cele mai caracteristice modificări ale indicatorilor clinici și de laborator pentru diferite tipuri de icter.
Trebuie avut în vedere că, în practică, rareori se observă icter de orice tip într-o formă "pură". Mai multe combinații comune de un tip sau altul. Astfel, în hemoliza severă, diverse organe suferă în mod inevitabil, inclusiv ficatul, care poate introduce elemente ale icterului parenchimat în timpul hemolizei. La rândul său, icterul parenchimat, ca regulă, include elemente mecanice. Cu icterul obstructiv care rezultă din stoarcerea papilei duodenale majore (mamiferul Vater) în cancerul capului pancreatic, hemoliza este inevitabilă ca o consecință a intoxicației cu cancer.
67. Studiul metabolismului pigmentar în ficat, valoarea diagnosticului.
O reflectare a metabolismului pigmental în ficat este conținutul în sânge (precum și în fecale și urină) a bilirubinei și a produselor sale de recuperare. Identificarea tulburărilor metabolismului pigmentului oferă o idee despre starea funcțională a geatocitelor și, de asemenea, ajută la diferențierea diferitelor tipuri de icter.
Formarea bilirubinei are loc în celulele reticuloendoteliale ale măduvei osoase, ale ganglionilor limfatici, dar în principal splinei, precum și în celulele reticuloendoteliale stelate ale ficatului (Figura 117). Bilirubina se formează din hemoglobină, care se eliberează în timpul defalcării fiziologice a celulelor roșii din sânge; în același timp, hemoglobina se descompune în corpul proteic al globinei și hemului care conține fier. În celulele sistemului reticuloendotelial, se formează bilirubina liberă din hema eliberată, care circulă în sânge într-o relație instabilă cu proteina albuminei. Conținutul de bilirubină liberă în sânge este de 8,55-20,52 μmol / l (0,5-1,2 mg%). Cea mai mare parte a acesteia intră în ficat, unde se eliberează din asocierea cu albumină și, cu participarea enzimelor hepatice, se leagă de acidul glucuronic, formând un compus solubil în apă, bilirubingen-curonidă (mono- și diglucuronidă sau bilirubină legată), care se excretă în tractul biliar.
În consecință, ficatul este implicat în schimbul de bilirubină, efectuând următoarele funcții: 1) formarea bilirubinei în celulele reticuloendoteliale stelate; 2) captarea bilirubinei libere din sânge; 3) formarea unui compus de bilirubină cu acid glucuronic; 4) secreția de glucuronidă bilirubinți în bilă (bilirubina legată).
În sângele oamenilor sănătoși este doar pigmentul liber. În cazul bolilor care sunt însoțite de o încălcare sau deformare a descărcării normale a bilirubinei asociate cu bila, aceasta intră în sânge și apoi ambii pigmenți circulă în ea (pot fi determinate separat).
O probă calitativă a lui Van den Berg oferă informații indicative: dacă se dovedește a fi indirectă, putem presupune că în sânge există doar bilirubină liberă; dacă se dovedește a fi directă, atunci nu se știe în ce proporție sunt ambii pigmenți - o reacție directă directă maschează prezența oricărei cantități de bilirubină liberă. În prezent, ele utilizează în principal determinarea cantitativă separată a fracțiunilor de bilirubină. În majoritatea studiilor efectuate în acest scop se utilizează aceleași diazoreactive ca și pentru testul calitativ (diazo-reactiv I: 5 g de acid sulfanilic și 15 ml de acid clorhidric tare se dizolvă în apă distilată și volumul se ajustează la 1 l cu apă distilată, diazoreactant 0,5% soluție de nitrit de sodiu, amestec de diazină: 10 ml diazoretic I + 0,25 ml de diazoreac II).
Testul calitativ: la 0,5 ml de ser se toarnă 0,25 ml de diazo-amestec. În cazul înroșării serice în mai puțin de 1 minut, reacția este considerată a fi rapidă rapidă și indică prezența bilirubinei legate în ser. Dacă roșeața are loc încet (în decurs de 1-10 minute), ceea ce se întâmplă atunci când o cantitate relativ mică de bilirubină legată este atașată la eliberare, se consideră că reacția este întârziată direct. Dacă nu există roșeață timp de mai mult de 10 minute, reacția directă este considerată negativă. Dacă doriți să vă asigurați că culoarea galbenă a unui astfel de ser depinde de bilirubină, se adaugă dublul cantității de alcool, se filtrează și se adaugă diazo-amestecul la filtrat, ca urmare a faptului că lichidul devine roz (reacție indirectă). Există multe metode pentru determinarea cantitativă a fracțiunilor de bilirubină. Unele dintre ele se bazează pe faptul că, sub influența substanțelor bilirubinei libere, cum ar fi cafeina, care este utilizat în cea mai comună metodă Endrashika, metanol și colab., Acționând ca un aktseleratora de catalizator, dobândește capacitatea de a reacționa cu diazoreaktivom. În prima porțiune a serului tratat cu acceleratorul, este posibil să se determine conținutul total al ambelor fracțiuni. Într-o altă porțiune, fără adăugarea unui accelerator, se determină numai pigmentul legat. Prin scăderea fracției sale legate de cantitatea totală de bilirubină, ei vor recunoaște fracțiunea liberă. Alte metode pentru determinarea separată a fracțiunilor de bilirubină (chimice, cromatografice) sunt mai complexe.
Bilirubina liberă, insolubilă în apă, nu este excretată de rinichi; după legarea cu acidul glucuronic, devine solubil în apă atunci când este acumulat în sânge - cu icter subhepatic și hepatic, este detectat în urină. În tractul biliar, se eliberează doar bilirubina legată (bilirubinglucuronida). In canalelor biliare mari și vezicii biliare (în special în procesele inflamatorii în ele) și apoi la o mică parte a bilirubinei intestinului se reduce la urobilinogen, care este resorbit în partea superioară a intestinului subțire și a venei porte sânge intră în ficat. Un ficat sănătos îl prinde complet și oxidează, dar organul bolnav nu reușește să îndeplinească această funcție, urobilinogenul trece în sânge și este excretat în urină ca urobilin. Urobilinuria este un semnal foarte subtil și timpuriu al insuficienței hepatice funcționale. Restul, o mare parte a bilirubinei în intestin este restabilită până la stercobininogen. Partea principală a acestuia este excretată în fecale, transformându-se în rect și din ea (în lumină și aer) în stercobilin, oferind fecale culoarea sa normală. O mică parte a stercobilinogenului, absorbită în părțile inferioare ale colonului, prin venele hemoroidale, ocolind ficatul, intră în circulația generală și este excretată prin rinichi. Urina normală conține întotdeauna urme de stercobilinogen, care sub acțiunea luminii și a aerului se transformă în sterkobilin.
Conținutul de corpuri urobilin în urină crește nu numai atunci când funcția hepatică este insuficientă, dar și atunci când hemoliza crește. În aceste cazuri, datorită eliberării unei cantități semnificative de hemoglobină, se formează și secretă mai mult bilirubină în intestin. Creșterea producției de stercobilină duce la o excreție crescută în urină. În cazul icterului obstructiv, când bilele nu intră deloc în intestin, nu există sterkobilin în fecale, nu există corpuri urobilin în urină. Atunci când icterul hepatocelular scade excreția bilirubinei în bilă și cantitatea de stercobilină din fecale scade și crește numărul de corpuri urobilinice din urină. Raportul acestora, în proporție de 10: 1-20: 1, scade semnificativ, ajungând la 1: 1 pentru leziunile hepatice severe. În icterul hemolitic, creșterea stercobilinei în fecale depășește în mod semnificativ creșterea excreției urinare a corpurilor urobilinice. Raportul lor crește la 300: 1-500: 1. Raportul dintre produsele de recuperare a bilirubinei în fecale și urină este mult mai semnificativ în diferențierea icterului decât valoarea absolută a fiecăruia dintre ele.
Schimbul de pigment.
În condiții fiziologice, concentrația plasmatică a bilirubinei este de 0,3-1,0 mg / dl (5,1-17,1 pmol / l). Dacă nivelul plasmazei bilirubinei este de aproximativ 3 mg / dl (50 pmol / l), atunci se manifestă clinic sub formă de sclera icterică, a membranelor mucoase și a pielii.
Bilirubin este derivat din distrugerea enzimatică a hemoglobinei sau a hemoproteinelor (citocromul 450, citocromul B5, catalaza, triptofanpirolaza, mioglobina). Dupa eliberarea enzimatică a hemoglobinei sau hem-hemoproteină de oxigenazei microzomala hem în membrana reticulului citoplasmatice prin activarea oxigenului atunci când sunt expuse la NADPH-citocrom c reductaza agidroksigema este format, în care oxigenul activat afectează ametinovye punți tetrapirolic ciclic. Din acest motiv, inelul protoporfirin se descompune prin eliberarea monoxidului de carbon și apare un complex biliverdin cu fier. După hidroliză, complexul biliverdin fier forjat din fier și IXa biliverdin de biliverdinreduktazy citosol este restaurat inelul metina central în biliverdin biliverdin IXa2.Poskolku trei enzime (gemoksinaza și microzomal-NADPH citocromului c reductaza și biliverdinreduktaza citosol), care catalizează producerea de bilirubina de heme, sub forma unui complex enzimatic pe suprafața reticulului endoplasmatic, biliverdinul pe acest complex este restabilit la bilirubină.
Aproximativ 70% din pigmenții biliari zilnici au apărut din hemoglobină în timpul defalcării celulelor roșii din sânge în sistemul reticulo-endotelial (în splină, măduvă osoasă și ficat).
Implicarea ficatului în producția zilnică de bilirubina este 10-37%, iar în ficat sunt sursa majoră de citocromilor microzomale, catalază și triptofanpirrolazu din imigrație plasma b.Takzhe citocromului mitocondrială asociată cu hemoglobina haptoglobina, methemoglobină sau methemalbumin hepatice servi ca sursă de bilirubina, deoarece hepatocitelor percepe componentele hemei pentru formarea rubinului de bilubin.
După conjugarea bilirubinei, bilirubina glucuronată, probabil cu ajutorul unui purtător, este secretă prin membrana tubului în bilă. Substanțele bromsulfalein, indocianan verde și radiopaque ale tractului biliar concurează pentru sistemul de transport al bilirubinei în membrana tubulului biliar, care urmează cineticii de saturație. Acizii biliari, în contrast, sunt cimentați de un alt sistem de transport al membranelor conductelor biliare, în bilă. În tractul biliar și în intestin, bilirubingulukuronidul secretat nu este absorbit, ci trece prin intestinul subțire și este hidrolizat în partea terminală a intestinului subțire și a intestinului gros cu ajutorul v-glucuronidazei bacteriene. Bilirubina se reduce bacteriile colonice la urobilinogen și parțial oxidat la urobilin în fecale Mai puțin de 20% din zi cu zi formate în urobilinogen colon implicate în ciclul enterohepatic: acesta este absorbit în intestinul subțire, transportat la bilă, în timp ce restul de 10% sunt în circulație periferică și apoi excretată în urină. În hemoliza, boala hepatică hepatocelulară și șuntul porto-sistemic, urobilinul este excretat în urină.
Lecția 7.2 Schimbarea pigmentului. Biochimie hepatică
Lecția 7.2 Schimbarea pigmentului. Biochimie hepatică.
-pentru a studia structura, compoziția și funcția chimică a hemoglobinei;
-să cunoască nivelul de hemoglobină din sânge;
-cunosc compoziția hemoglobinei la persoanele de diferite grupe de vârstă;
-studiază procesele de sinteză și defalcare a hemoglobinei, formează criterii clare pentru diferențierea biochimică a icterului;
-să cunoască conținutul de sânge al bilirubinei totale și al fracțiilor sale;
-să se familiarizeze cu determinarea cantitativă a hemoglobinei în sânge prin metoda hemoglobincianidei;
-să poată determina concentrația de urobilin în urină folosind benzi de testare pentru diagnostic "UBG-ventilator".
Valoare de referință necesară
Din cursul chimiei bioorganice un student ar trebui să știe:
-definirea și clasificarea proteinelor complexe;
-structura heme în hemoglobină;
-caracteristică a proteinei globinei în hemoglobină (caracteristici ale structurii cuaternare).
Din cursul fiziologiei un student ar trebui să știe:
-rolul biologic al hemoglobinei și al mioglobinei.
Întrebări pentru auto-studiu
Biosinteza hemei, surse de fier, reglarea procesului Violarea biosintezei hemoglobinei. Hemoglobinopatii. Anemia celulelor hemoglobină Catabolismul hemoglobinei, descompunerea hemei - formarea bilirubinei în celulele SRE. Structura și proprietățile bilirubinei indirecte. Neutralizarea bilirubinei în ficat. Conjugata (direct) bilirubina - mecanismul de formare, structură, proprietăți excreția bilirubinei în intestin și în continuare descompunerea acesteia in intestine: produsele finale ale catabolismului Perturbări bilirubinei în metabolismul bilirubinei (metabolism pigment): icter
Valoarea diagnosticului determinării bilirubinei în ser și urină. Urinalul urobilinogen
Partea practică a lecției
Laboratorul 1
Determinarea cantitativă a bilirubinei în ser
Principiul metodei: diazoreactele dau colorare directă cu bilirubina roz. Bilirubina liberă indirectă poate fi tradusă într-o stare solubilă prin adăugarea la reactivul seric de cafeină, care crește solubilitatea acestui pigment și vă permite să o determinați cu ajutorul diazoreactiv. Conținutul total al ambelor forme de bilirubină serică este bilirubina totală. Diferența dintre bilirubina directă și totală poate fi utilizată pentru a determina nivelul bilirubinei indirecte. Intensitatea culorii soluției obținute prin adăugarea unui diazoreactiv la ser este direct proporțională cu concentrația de bilirubină.
Progresul lucrării: Se toarnă 0,5 ml de ser în 3 tuburi. În 1 eprubetă (bilirubină directă), se adaugă 1,75 ml nat. soluție, 0,25 ml de diazoreactant și se lasă timp de 10 minute. 1,75 ml reactiv de cafeină și 0,25 ml nat. soluție. După 10 minute, se măsoară densitatea optică a probei pe un fotocolorimetru împotriva apei într-o cuvă la 5 mm cu un filtru de lumină verde (530 nm). 1,75 ml reactiv de cafeină, 0,25 ml de diazoreactiv este turnat în 3 eprubete (bilirubină totală) și fotometrizat împotriva apei după 20 de minute. Calculul se face în conformitate cu programul de calibrare. Găsiți conținutul de bilirubină totală și directă. Pentru determinarea conținutului de bilirubină indirectă din bilirubina totală se scad citirile de bilirubină directă. Factorul de conversie în unități SI (μmol / l) este 17,104.
În mod normal, conținutul total de bilirubină este de 3,5-20,5 μmol / l, legat - 25% (până la 7 μmol / l), fără 75% (până la 12 μmol / l).
Lab 2
Determinarea cantitativă a urobilinogenului în urină utilizând benzi de diagnosticare "UBG-ventilator"
Principiul metodei: metoda se bazează pe reacția de cuplare azo a unei sări de diazoniu stabilizată cu urobilinogen într-un mediu acid. În prezența urobilinogenului, zona reactivă schimbă culoarea spre roz sau roșu.
Progresul lucrării: Zona reactivă a benzii de diagnosticare este umezită cu urina studiată și după 30-60 de secunde culoarea zonei reactive este comparată cu scala de culoare.
Semnificația practică a lucrării. Determinarea bilirubinei totale și a fracțiunilor acesteia, precum și a bilirubinei și urobilinogenului în urină este importantă pentru înțelegerea mecanismelor de apariție a icterului cu diverse etiologii (hemolitic, parenchimal și obstructiv).
În icterul hemolitic, hiperbilirubinemia apare în principal din cauza bilirubinei indirecte (libere).
Când icterul parenchimic are loc distrugerea celulelor hepatice, excreția bilirubinei directe în capilarele biliari este perturbată, intră în sânge, concentrația în sânge crește și concentrația de bilirubină indirectă, hiperbilirubinemia tip mixt. În urină, urobilinogenul și bilirubina (bilirubinuria) sunt deschise.
În icterul obstructiv, excreția biliară este afectată, ceea ce duce la o creștere accentuată a conținutului bilirubinei directe în sânge și, ca o consecință a bilirubinei în urină, bilirubinurie.
II. Control final al testului pe tema "Biochimia sângelui. Schimb de pigmenți "
Schimbul de pigment
Aproximativ 80% din bilirubina (indirectă) neconjugată derivă din hemoglobina dărăpănată, cu aproximativ 35 mg bilirubină produsă din 1 g de hemoglobină. Distrugerea celulelor roșii din sânge are loc în splină, măduvă osoasă și ficat. Principalul rol în distrugerea celulelor roșii din sânge aparține macrofagelor; 20% din bilirubina neconjugată este sintetizată din heme de altă origine (eritroblaste, reticulocite, mioglobină, citocrom, etc.). Acesta aparține așa-numitei bilirubine de șunt.
Într-o singură zi, se sintetizează aproximativ 300 mg de bilirubină. Bilirubina neconjugată (liberă sau indirectă) este practic insolubilă în apă, dar solubilă în grăsimi. La o persoană sănătoasă adultă, pigmentul este legat în întregime de albumină (o proteină ligandină de transport). În această formă, nu poate depăși bariera renală și hemato-encefalică. Un mol de albumină leagă două moli de bilirubină. Cu hiperbilirubinemie semnificativă (mai mult de 171,0-256,5 μmol / l sau 10-15 mg / dl), albumina nu are suficientă putere, iar o parte din bilirubina neconjugată este nelegată. Același lucru se întâmplă și cu hipoalbuminemia, cu blocarea albuminei de acizi grași și medicamente (salicilați, sulfonamide, etc.). În prezența bilirubinei neconjugate care nu este asociată cu albumina, riscul de leziuni cerebrale crește.
În ultimii ani, glutationul transferazei a primit, de asemenea, un rol major în legarea și transportul bilirubinei neconjugate.
Bilirubina neconjugată (liberă, indirectă), care intră în sânge în sinusoide prin intermediul receptorilor, este capturate de hepatocite. Trebuie remarcat faptul că bilirubina neconjugată sub influența luminii suferă modificări - se formează fotoizomeri și ciclobilirubine, care pot fi eliberate din bilă.
Transportul intracelular al bilirubinei neconjugate urmează în principal o cale indirectă, adică se utilizează atât citoplasma cât și GERL. Miscarea are loc cu ajutorul proteinelor de transport ligandinelor X si Y, precum si a glutationului transferazei. Trecând de-a lungul sistemului GERL, bilirubina neconjugată intră în reticulul endoplasmatic neted. Aici, cu ajutorul glicoziltransferazei bilirubare, se produce conjugarea (compusul) acidului glucuronic și a bilirubinei și se formează bilirubina conjugată (dreaptă, legată).
Bilirubina conjugată este conectată la una sau două molecule de acid glucuronic. In primul caz bilirubinmonoglyukuronid (aproximativ 15% din bilirubina totală), în al doilea - bilirubindiglyukuronid (aproximativ 85% din bilirubina totală). Monoglucuronida bilirubinei poate fi formată parțial în afara ficatului. Se știe că diglucuronida are doar origine hepatică. Bilirubina conjugată este solubilă în apă, dar insolubilă în grăsimi, poate penetra bariera renală. Acest tip de pigment este relativ puțin toxic pentru creier. Cu toate acestea, concentrațiile sale stabile stabile cresc sensibilitatea rinichilor la endotoxine. Mai rău decât bilirubina neconjugată, se leagă de albumina serică.
Formată în reticulul endoplasmic neted bilirubina conjugat transportat activ la membrana hepatocitelor și biliare după anumite costuri de energie (în principal datorită conversiei ATP) excretat în capilar biliar. Acest proces este o componentă a secreției biliare. O mică parte a bilirubinei conjugate este afișată în plasmă. Mecanismul acestei eliminări (de fapt, refluxul) nu a fost studiat suficient.
Sistemul de conjugare a bilirubinei în ficat utilizează de obicei aproximativ 2% din capacitatea hepatocitelor, excreția - 10%.
Bilirubingulukuronidul cu bilă intră în intestin. Mijloacele intestinale, în special în colon, efectuează eliminarea acidului glucuronic și formarea mezobilubinei și mezobilinogenului.
Apoi vine restaurarea mezobilubin și mezobilogen (urobilinogen). O parte din mesobilinogen este absorbită în intestin și prin vena portalului intră în ficat, unde este complet împărțită în dipirolii. Când parenchimul hepatic este deteriorat, procesul de scindare a mezobliogenului este perturbat și acest pigment intră în fluxul sanguin general și apoi prin rinichi în urină.
Majoritatea mesobolicinei din intestinul subțire este avansată în colon, unde, cu participarea microflorei anaerobe, este restabilită la stercobilinogen. Partea principală a acestuia din urmă în intestinul inferior este oxidată și se transformă în sterkobilin. 10-250 mg stercobilină este excretată pe zi. Doar o mică parte a stercobilinogenului intră în vena cava inferioară prin sistemul de vene hemoroidale și este excretată prin rinichi cu urină.
În conformitate cu urobilinuria implică excreția urinară a idililor urobilinelor. Urobilinoidele includ corpurile urobilin (urobilinogen, urobilin) și stercobilin (stercobilinogen, stercobilin). Diferențierea acestora nu a fost larg răspândită în practica clinică. urobilinuria Urobilinogenuriya și, pe de o parte, și sterkobilinuriya sterkobilinogenuriya și - pe de altă parte, cauzate în mod substanțial aceleași substanțe chimice care se găsesc în două forme - reduse și oxidate.
Hiperbilirubinemie pot să apară în primul rând datorită bilirubinei neconjugate, ca, de exemplu, cu boala Gilbert (familial non-hemolitic hiperbilirubinemie sau pigment steatoza), anemie hemolitică, anumite forme de hepatită cronică. Un alt grup mare este legată de o hiperbilirubinemie avantajoasă creșterea concentrației-konyugi rovainogo bilirubinei și se produce în timpul hepatitei acute (virale, alcoolice, medicamentoase),, în exacerbări de ciroză hepatică și hepatită cronică, precum și cu icter obstructiv cauzate de o piatră sau tumoare conducte majore biliare. Determinarea conținutului de bilirubină conjugată și neconjugată este importantă pentru diagnosticarea bolilor hepatice, precum și pentru monitorizarea cursului acestora.
Hemoglobina catabolismului
Celulele roșii din sânge au o durată de viață scurtă (aproximativ 120 de zile). În condiții fiziologice în corpul unui adult, sunt distruse circa 1 - 2 × 1011 eritrocite pe zi. Catabolismul lor apare în principal în celulele reticuloendoteliale ale splinei, ganglionilor limfatici, măduvei osoase și ficatului. Odată cu îmbătrânirea eritrocitelor, conținutul de acizi sialici din compoziția glicoproteinelor cu membrană plasmatică scade. Componentele carbohidraților modificate ale glicoproteinelor membranelor eritrocitare sunt legate de receptorii celulelor RES, iar eritrocitele sunt "imersate" în ele prin endocitoză. Distrugerea celulelor roșii din sânge în aceste celule începe cu degradarea hemoglobinei în hem și globină și hidroliza ulterioară prin enzimele lizozomale a porțiunii de proteine a hemoglobinei.
A. Catabolismul hemei
Prima reacție a catabolismului hematic apare cu participarea unei enzime dependente de NADPH
Fig. 13-10. Reglarea sintezei receptorilor de transferină. Și - cu un conținut scăzut de fier în celulă, proteina sensibilă la fier are o afinitate ridicată pentru mRNA IRE, care codifică o proteină a receptorului de transferină. Adăugarea proteinei care leagă fierul la ARNm IRE previne distrugerea acestuia prin RNAză și continuă sinteza proteinei receptorului de transferină; B - Cu un conținut ridicat de fier în celulă, afinitatea proteinei care leagă fierul la IRE scade și mARN devine disponibil pentru acțiunea ARNazei, care o hidrolizează. Distrugerea ARNm conduce la o scădere a sintezei receptorului de proteină transferină.
complexul hemoxygenazei. Sistemul enzimatic este localizat în membrana ER, în domeniul lanțurilor de transport de electroni de oxidare microzomală. Enzima catalizează scindarea unei legături între două inele de pirol conținând resturi de vinil - astfel, structura inelului este dezvăluită (figura 13-11). În timpul reacției se formează tetrapirul linear - biliverdin (un pigment galben) și monoxid de carbon (CO) - care se obține din carbonul grupării metenil. Heme induce transcripția genei hemoxygenazei, care este absolut specifică subiectului.
Ionii de fier eliberați prin distrugerea hemei pot fi utilizați pentru a sintetiza noi molecule de hemoglobină sau pentru a sintetiza alte proteine care conțin fier. Biliverdinul este redus la bilirubină de către enzima biliverdin reductază dependentă de NADPH. Bilirubina se formează nu numai în defalcarea hemoglobinei, ci și în catabolismul altor proteine care conțin tampon, cum ar fi citocromii și mioglobina. Odată cu prăbușirea a 1 g de hemoglobină, se produce 35 mg de bilirubină și aproximativ 250-350 mg bilirubină pe zi la un adult. Metabolizarea ulterioară a bilirubinei are loc în ficat.
Fig. 13-11. Heme decăderea. Gruparea M - (-CH3) -metil; Gruparea B - (-CH = CH2) -vinil; P - (-CH2-CH2-COOH) este restul acidului propionic. În timpul reacției, o grupare metil este transformată în monoxid de carbon și, prin urmare, structura ciclului este dezvăluită. Biliverdinul format de biliverdin reductaza este convertit în bilirubină.
B. Metabolismul bilirubinei
Bilirubina, formată în celulele SRE (splină și măduvă osoasă), este slab solubilă în apă, transportată de sânge în combinație cu albumină din proteinele plasmatice. Această formă de bilirubină se numește bilirubină neconjugată. Fiecare moleculă de albumină se leagă (sau chiar 3) moleculele de bilirubină, dintre care una este legată la o proteină mai ferm (afinitate mai mare) decât cealaltă. Când pH-ul sângelui se deplasează la partea acidă (creșterea concentrației de corpuri cetone, lactat), sarcina, modificarea conformației albuminei și afinitatea pentru bilirubină scade. Prin urmare, bilirubina legată de albumină poate fi înlocuită
din locurile de legare și formează complexe cu colagenul matricei extracelulare și lipidelor membranare. Un număr de compuși de medicament concurează cu bilirubina pentru un centru de afinitate cu afinitate mare, cu afinitate ridicată.
Administrarea bilirubinei de către celulele hepatice parenchimatoase
Complexul de albumină-bilirubină, eliberat cu fluxul sanguin în hepat, disociază pe suprafața membranei plasmatice a hepatocitelor. Bilirubina eliberată formează un complex temporar cu lipidele cu membrană plasmatică. difuzia ușoare ale bilirubinei în hepatocite prin două tipuri de proteine purtător: ligandina (se transmite o cantitate mare de bilirubină) și Z. proteinelor Activitatea captării hepatocitului a bilirubinei depinde de rata metabolismului în celulă.
Ligandina și proteina Z se găsesc, de asemenea, în celulele rinichilor și intestinelor, prin urmare, dacă funcția hepatică este insuficientă, acestea pot compensa slăbirea proceselor de detoxifiere în acest organ.
Conjugarea bilirubinei într-un ER neted
Într-un ER fără hepatocite, grupurile polar, în principal din acidul glucuronic, se alătură bilirubinei (reacție de conjugare). Bilirubina are 2 grupe carboxilice, prin urmare se poate combina cu 2 molecule de acid glucuronic,
Fig. 13-12. Structura diglucuronidică a bilirubinei (conjugată, bilirubina "dreaptă"). Acidul glucuronic este atașat printr-o legătură esterică la două resturi de acid propionic pentru a forma o acilglucuronidă.
conjugat solubil în apă - diglucuronid bilirubina (conjugată sau bilirubină directă) (figura 13-12).
Acidul donor de acid glucuronic este UDP-glucuronatul. Enzime specifice, UDP-glucuroniltransferaza (uridina difosfor glucuroniltransferaza) catalizează formarea bilirubinei mono- și diglucuronide (figura 13-13). Unele medicamente, cum ar fi fenobarbitalul (vezi secțiunea 12), servesc drept inductori ai sintezei UDP-glucuroniltransferazei.
Secreția bilirubinei în bilă
Secreția bilirubinei conjugate în bilă urmează un mecanism de transport activ, adică împotriva gradientului de concentrație. Transportul activ este probabil stadiul de limitare a vitezei întregului proces de metabolizare a bilirubinei în ficat. În mod normal, bilirubina diglucuronidică este principala formă de excreție a bilirubinei în bilă, dar este posibilă.
Fig. 13-13. Formarea bilirubindiglucuronidei.
prezența unei cantități mici de monoglucuronid. Transportul bilirubinei conjugate de la ficat la bilă este activat de aceleași medicamente care pot induce conjugarea bilirubinei. Astfel, se poate spune că viteza de conjugare a bilirubinei și transportul activ de glucuronid de bilirubare de la hepatocite la bilă sunt strâns legate între ele (fig.13-14).
B. Catabolismul bilirubinei-diglucuronidei
În intestine, glucuronurile bilirubinelor sunt hidrolizate de enzime bacteriene specifice β-glucuronidaze, care hidrolizează legătura dintre bilirubină și reziduul de acid glucuronic. Bilirubina eliberată prin această reacție sub acțiunea microflorei intestinale este restaurată pentru a forma un grup de compuși tetrapirolici incolori, urobilinogen (figura 13-15).
În ileum și colon, o mică parte din urobilinogenul este din nou absorbit și intră în sângele venei portal în ficat. Partea principală a urobilinogenului din ficat în compoziția bilă este excretată în intestin și este excretată cu fecale din organism, parte din urobilinogen
Fig. 13-14. Bilirubină-urobilinigenovy ciclu în ficat. 1 - Catabolismul HB în celulele reticuloendoteliale ale măduvei osoase, splinei, ganglionilor limfatici; 2 - formarea formei de transport a complexului bilirubina-albumina; 3 - primirea bilirubinei în peHB; 4 - formarea de glucuronuri bilirubinți; 5 - secreția de bilirubină în compoziția bilei în intestin; 6 - catabolismul bilirubinei sub acțiunea bacteriilor intestinale; 7 - îndepărtarea urobilinogenului cu fecale; 8 - absorbția urobilinogenovului în sânge; 9 - absorbția urobilinogenului de către ficat; 10 - o parte din urobilinogen în excreția sângelui și a rinichilor în urină; 11 - o mică parte din urobilinogen secretate în bilă.
Fig. 13-15. Structura unor pigmenți biliari. Mesobilinogenul este un produs intermediar al catabolismului bilirubinei în intestin.
din ficat intră în sânge și este îndepărtat cu urină sub formă de urobilin (fig.13-14). În mod obișnuit, majoritatea realizărilor incolino-gene incolore, formate în intestinul gros, sub influența microflorei intestinale, sunt oxidate în rect la făulenul pigmentar brun și sunt îndepărtate cu fecale. Culoarea fecalelor este cauzată de prezența urobilinei.
Sinteza acizilor biliari din colesterol și reglarea acesteia
Acizii biliari sunt sintetizați în ficat din colesterol. Unii dintre acizii biliari din ficat suferă o reacție de conjugare - compuși cu molecule hidrofilice (glicină și taurină). Acizii biliari asigură emulsificarea grăsimilor, absorbția produselor digestiei și a unor substanțe hidrofobe provenite din alimente, cum ar fi vitaminele solubile în lipide și colesterolul. Acizii biliari sunt, de asemenea, absorbiți, prin vena juridică ajung din nou în ficat și sunt folosiți în mod repetat pentru a emulsifica grăsimea. Această cale se numește circulația enterohepatică a acizilor biliari.
Sinteza acizilor biliari
În organism, se sintetizează 200-600 mg de acizi biliari pe zi. Prima reacție de sinteză - formarea de 7-α-hidroxicholesterol - este de reglementare. Enzima 7-α-hidroxilază, care catalizează această reacție, este inhibată de produsul final, acizii biliari. 7-α-hidroxilaza este o formă de citocrom P450 și utilizează oxigenul ca unul dintre substraturi. Un atom de oxigen din O2 este inclus în grupul hidroxil din poziția 7, iar celălalt este redus la apă. Reacțiile de sinteză ulterioare conduc la formarea a două tipuri de acizi biliari: cholici și chenodeoxicolici (fig.8-71), numiți "acizi biliari primari".
Conjugarea acizilor biliari
Conjugarea - adăugarea de molecule ionizate de glicină sau taurină la gruparea carboxil a acizilor biliari; îmbunătățește proprietățile detergenților, deoarece crește amfifilitatea moleculelor.
Conjugarea are loc în celulele hepatice și începe cu formarea formei active a acizilor biliari, derivați ai CoA.
Apoi se adaugă taurină sau glicină și, ca rezultat, se formează 4 variante de conjugate: acid taurocolic și taurofenodeoxicolic, acid glicocholic sau glicohenodeoxicolic (sunt emulgatori mult mai puternici decât acizii biliari originali).
Conjugații cu glicină se formează de 3 ori mai mult decât cu taurina, deoarece cantitatea de taurină este limitată.
Circulația enterohepatică a acizilor biliari. Transformarea acizilor biliari în intestine
Produsele de hidroliză a grăsimilor sunt absorbite în principal în partea superioară a intestinului subțire și sărurile acizilor biliari - în ileon. Aproximativ 95% din acizii biliari capturați în intestin se reîntorc la ficat prin vena portalului, apoi se secretă din nou în bilă și sunt reutilizate în emulsificarea grăsimilor (Figura 8-73). Această cale a acizilor biliari se numește circulație enterohepatică. În fiecare zi, 12-32 g de săruri de acizi biliari sunt reabsorbiți, deoarece în organism există 2-4 g de acizi biliari și fiecare moleculă de acid biliar trece de la 6 până la 8 ori mai mare.
Unii dintre acizii biliari din intestin sunt expuși la enzimele bacteriene care scindează glicina și taurina, precum și gruparea hidroxil în poziția 7 a acizilor biliari. Acizii biliari lipsiți de această grupă hidroxil sunt numiți secundari. Acizii biliari secundari: deoxicol, care este format din cholic și litiocholic, care este format din deoxicol, este mai puțin solubil, absorbit mai lent în intestin decât acizi biliari primari. Prin urmare, acizii biliari secundari sunt în principal eliminați din fecale. Totuși, acizii biliari secundari reabsorbiți din ficat sunt din nou transformați în primar și sunt implicați în emulsificarea grăsimilor. În timpul zilei, 500-600 mg de acizi biliari sunt eliminați din organism. Calea de excreție a acizilor biliari simultan servește drept cale principală de excreție a colesterolului din organism. Pentru a compensa pierderea acizilor biliari cu fecale în ficat, acizii biliari sunt sintetizați continuu din colesterol într-o cantitate echivalentă cu acizii biliari derivați. Ca rezultat, cantitatea de acizi biliari (2-4 g) rămâne constantă.
Fig. 8-73. Circulația enterohepatică a acizilor biliari. Cercurile de lumină - Micelii biliari; cercurile negre - miceliile mixte ale produselor de hidroliză bilă și triacil-glicerol.
Reglementarea sintezei acizilor biliari
Enzimele de reglementare pentru sinteza acizilor biliari (7-α-hidroxilază) și colesterol (HMG-CoA reductaza) sunt inhibate de acizii biliari. În timpul zilei, activitatea ambelor enzime se modifică într-un mod similar, adică O creștere a cantității de acizi biliari în ficat duce la o scădere a sintezei atât a acizilor biliari cât și a colesterolului. Întoarcerea acizilor biliari la ficat în timpul circulației enterohepatice are un efect important de reglementare; întreruperea circulației duce la activarea 7-a-hidroxilazei și la creșterea captării colesterolului din sânge. Acest mecanism stă la baza uneia dintre căile de a reduce concentrația de colesterol din sânge în tratamentul hipercolesterolemiei. În acest caz, se folosesc medicamente care adsorbază colesterolul și acizii biliari în intestin și previne absorbția lor.
Reglarea 7-α-hidroxilazei se realizează prin alte mecanisme:
fosforilarea / defosforilarea și forma fosforilată este activă, spre deosebire de HMG-CoA reductaza;
modificarea cantității de enzimă; colesterolul induce transcripția genei, iar acizii biliari reprimau. Sinteza 7-α-hidroxilazei este afectată de hormoni: hormonii tiroidieni induc sinteza și suprimă estrogenii. Acest efect al estrogenului asupra sintezei acizilor biliari explică de ce apare holelezia la femei de 3-4 ori mai des decât bărbații.