Diagnosticarea PCR pentru hepatita C

Hepatita C este o inflamație a celulelor hepatice care apare ca urmare a infecției cu virusul VHC (hepatita C) prin contactul cu sângele unei persoane infectate. Codul genetic al HCV-ului flavivirus este purtat de o moleculă de ARN (acid ribonucolic) conținută în structura virusului. Acest fenomen care pune viața în pericol se distinge prin secret în stadiul inițial al patologiei. Intervalul de timp dintre infecție și debutul simptomelor (răspunsul sistemului imunitar) poate fi de la o lună la șase luni. De regulă, boala are o formă cronică și este dificil de tratat.

Medicina moderna va permite sa diagnosticati patologia cu leziuni hepatice minore. Cele mai frecvente și eficiente metode de diagnostic includ analiza PCR. Luați în considerare în acest articol ce este și ce fel de ea există.

Care este studiul

Analiza PCR pentru hepatita C este un examen de laborator care detectează flavirusul, materialul genetic al acidului ribonucleic (ARN). Acesta determină numărul moleculelor de ARN din sânge, calitatea materialului biologic, tipul genetic al flaviului HCV.

Metoda PCR pentru hepatita C face posibilă detectarea cantității minime de flavirus înainte de formarea anticorpilor, de regulă, imediat după infectare.

Studiul este adesea denumit analiză ARN, deoarece detectează particule de acid ribonucleic având dimensiunea de 30-60 nm conținută în virusul flava.

Studiul se desfășoară după cum urmează: pe stomacul gol, pacientul dă sânge dintr-o venă, care este apoi testată prin diverse metode:

• Real-Time PCR se efectuează într-un mod automat închis și are o limită inferioară pentru detectarea virusului ARN, egal cu 15 UI / ml;
• COBAS AMPLICOR cu o sensibilitate de 50-100 UI / ml.

Cu cât este mai mare pragul de sensibilitate al tehnicii de diagnosticare, cu atât mai mari sunt șansele de a găsi cel mai mic conținut de virus în materialul biologic investigat.

Ce tipuri de analiză utilizează

O analiză care a fost utilizată cu succes de câteva decenii se numește hepatită PCR și poate fi detectată destul de ușor și rapid. În medicină, există două metode de reacție, fundamental diferite unul de celălalt:

• metoda calitativă relevă prezența în materialul biologic a sursei genetice a unui virus specific;
• analiza cantitativă măsoară numărul materiei genetice, ceea ce permite determinarea stadiului patologiei sau evaluarea eficacității cursului terapeutic;
• genotiparea determină tipul de virus prezent în organism.

În general, un test de sânge ajută la identificarea naturii viremiei și a tipului genetic al agentului patogen. De regulă, cercetarea se efectuează o dată în funcție de gradul de sensibilitate al sistemului de diagnosticare. Dacă este necesar, retestarea se efectuează cu ajutorul unui reactiv ultrasensibil.

PCR de înaltă calitate

Ce este ARN-ul PCR de înaltă calitate pentru hepatita C? Esența reacției constă în prezența secvenței ARN de hepatită, iar reacția este posibilă numai în prezența proteinelor virale cu etimologie similară în ELISA. În procesul de comparație, sarcina și posibilele deteriorări ale zonei ficatului sunt detectate.

O caracteristică distinctivă a acestei metode este capacitatea de a detecta chiar prezența unei gene separate.

Trebuie remarcat faptul că după primirea rezultatelor testelor PCR și ELISA, pacientul necesită un tratament adecvat, indiferent de rezultatul final al imunotestării. Pozitive indică o infecție, iar PCR negativ indică un număr redus de particule virale față de nivelul de sensibilitate.

Există mai multe condiții care afectează producerea unui PCR negativ și a unui test ELISA:

• lipsa condițiilor adecvate de colectare a materialelor;
• analiza rezultată conține contaminare;
• în cazul unei injecții precoce de heparină către pacient.

Pacientul nu trebuie să respecte anumite reguli de eșantionare a sângelui pentru analiza PCR, în acest caz calitatea acestei analize depinde de medicul profesionist care efectuează procedura. Capacitatea de a stabili prezența bolii (în special în forma acută) apare în câteva săptămâni după infectare.

Analiza cantitativă

Se recomandă un test cantitativ pentru detectarea încărcării virale imediat înainte de formarea terapiei ulterioare și a reacției organismului. Procesul de prelevare a probelor de sânge este efectuat într-un mod similar că, cu PCR de înaltă calitate și ELISA, singura condiție este absența posibilității de a fuma pacientul înainte de procedură.

În ceea ce privește caracteristicile obținute din studiul datelor, sarcina crescută se caracterizează prin indicatori de la 800000 UI / ml, cu un nivel scăzut de 400000 UI / ml. Prezența unui virus în corpul pacientului este indicată prin PCR pentru hepatită nu este un test calitativ negativ.

Acest tip de cercetare face posibilă determinarea cât de periculoasă este pacientul față de oamenii din jurul lui. De exemplu, identificarea unui nivel ridicat indică o infecție crescută a pacientului. În plus, rezultatele analizei ajută la formularea celui mai eficient tratament și determină cât de eficientă este terapia existentă.

Răspunsul rapid negativ al testelor indică succesul tehnicii alese, iar cea lentă indică necesitatea ajustărilor și a utilizării tratamentului multi-tratament.

Procesul de luare a procedurii de analiză depinde de ziua specifică a cursului bolii. Prima determinare se efectuează în prima zi după ce pacientul este admis la spital, apoi procedura se repetă la 4, 12 și 24 de săptămâni după administrarea medicamentelor.

Astfel, o analiză cantitativă arată ce tratament este cel mai eficient, durata terapiei disponibile și pericolul pacientului față de alte persoane.

genotipare

În studiul analizei materiale, este important să se determine precizia genotipului de virus care are loc. În prezent, există 11 soiuri de virus hepatitic C, care la rândul lor includ anumite subspecii.

Toate aceste specii răspund diferit la tratamente diferite, cu soiuri individuale absolut rezistente la multe medicamente.

Genotipul face posibilă determinarea și arătarea stării ficatului. Nu este neobișnuit ca rezultatele să nu fie "tipizate" în rezultate, ceea ce înseamnă că virusul din sângele pacientului nu este detectat de acest sistem de testare. Acest lucru poate fi detectat dacă un anumit genotip nu se potrivește cu această zonă. Într-o astfel de situație, analiza se face în mod repetat și se utilizează un sistem mai sensibil pentru a studia materialul.

Metoda ultra sensibilă

Metoda ultrasensibilă este necesară în anumite cazuri în care diagnosticul de hepatită nu poate fi efectuat prin alte metode, în acest caz când momentul de analiză este determinat de medicul curant:

• dacă suspectați prezența virusului hepatitei C la pacienții cu o varietate ascunsă a bolii;
• prezența anticorpilor împotriva virusului hepatitei C, neconfirmată prin diagnosticarea PCR;
• pentru a determina calitatea eficacității metodei de tratament alese și pentru a confirma eliminarea bolii.

Sensibilitatea acestei metode este mult mai mare decât cea utilizată în mod obișnuit, însă această metodă nu exclude obținerea de rezultate false, atât pozitive, cât și negative. Într-o astfel de situație este important să se controleze calitatea procedurii și posibilitatea contaminării materialului în sine.

Explicarea analizei PCR

Decodificarea analizei se efectuează pe baza materialelor prezentate, în timp ce rezultatele cercetărilor de laborator includ anumite date descrise mai sus.

Transcriptul poate include o reacție în lanț PCR polimerazică pozitivă și un test ELISA negativ în analiză, ceea ce înseamnă că pacientul nu are semne de hepatită C în sânge, dar în trecut a transferat forma acută a bolii. De regulă, la diagnosticare, specialiștii recurg la utilizarea indicatorilor de test PCR.

Rezumând toate cele de mai sus, se poate concluziona că în timpul analizei este important să se respecte toate regulile și recomandările astfel încât rezultatele obținute să fie cât mai exacte și pe baza datelor obținute să se poată determina eficacitatea terapiei utilizate și șansele de recuperare completă.

Analiza calitativă pentru hepatita C

8 martie 2017, 12:29 Articole de specialitate: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10.547

O analiză calitativă a reacției în lanț a polimerazei - PCR pentru hepatita C determină prezența sau absența VHC în organism. În condiții de laborator, se investighează structura ARN, care va include virusul. În cazul detectării virusului C, este necesar să se efectueze un curs de tratament, deoarece starea neglijată a ficatului va avea consecințe grave. PCR de înaltă calitate se realizează după recuperare pentru a confirma absența anticorpilor. Numit și pentru inspecția de rutină. Cu o concentrație scăzută a agentului cauzal în sânge, PCR (calitativ) nu poate detecta nimic, deoarece sistemul de diagnosticare are propriile praguri de sensibilitate. În cazul stadiului inițial al bolii sau al formei ușoare, PCR este efectuat prin ultradiagnostic pe echipamente ultrasensibile.

Ce este virusul ARN?

Termenul ARN al virusului hepatitei C (sau al virusului hepatitic C virus) este boala hepatică în sine. Virusul C se leagă de celula sănătoasă a corpului prin penetrarea în interior. În timp, răspândit în tot corpul, este necesar doar pentru a intra în sânge. Ca urmare, agentul patogen penetrează ficatul, se fixează cu celulele sale și lucrează din greu. Celulele hepatice (hepatocite) funcționează sub influența sa, suferă modificări și, din acest motiv, mor. Cu cât virusul C este mai lung în ficat, cu atât numărul celulelor este mai mare. În timp, se dezvoltă boli periculoase, ducând la degenerare malignă și moarte.

Infecția ficatului cu acest tip de virus nu se poate manifesta pe plan extern. Timp de mulți ani sau zeci de ani, o persoană infectată se simte complet sănătoasă și doar o examinare aleatorie deseori dezvăluie patologia. Când se dă sânge pentru hepatită, se examinează o parte a lanțului de ARN (acid ribonucleic), care face parte din gena umană (ADN). Rezultatele testelor de laborator nu ar trebui utilizate pentru auto-tratament, deoarece acesta este doar un indicator. Imaginea exactă și diagnosticul suplimentar sunt mai bine determinate de medic.

Când se face: indicații pentru cercetare

În confirmarea VHC se efectuează analiza PCR (reacția în lanț a polimerazei). Studiile PCR ajută la găsirea agentului cauzal în structura ARN și prescriu o terapie eficientă. Numit în următoarele cazuri:

• detectarea semnelor de inflamație a ficatului;
• studii de screening pentru prevenire;
• examinarea persoanelor aflate în contact;
• diagnosticul de hepatită de origine mixtă (determinarea principalului agent patogen);
• determinarea nivelului activității de reproducere a virusului în forma cronică;
• ciroza hepatică;
• pentru a determina eficacitatea tratamentului prescris.

PCR de cercetare prescrie un medic pentru a determina eficacitatea cursului de tratament al hepatitei.

Există o analiză atât calitativă, cât și cantitativă a PCR. PCR cantitativ arată procentul de ARN cu purtători de virus în sânge și calitativ indică prezența sau absența virale. Un indicator pozitiv al calității (prezența ARN-ului de hepatită C) necesită și o cercetare cantitativă. Un nivel ridicat de concentrație a agentului cauzal al hepatitei C este asociat cu riscul transmiterii sale, adică a infecției altor persoane. Numerele mici sunt mai bine tratabile. Cantitatea de virusuri ARN din sânge nu este legată de intensitatea bolii. Analiza PCR este de asemenea efectuată în cazul terapiei cu interferon pentru a prescrie durata și complexitatea cursului de tratament.

Caracteristicile analizei PCR de înaltă calitate pentru hepatita C

Numit de analiză calitativă cu indicele de reacție în lanț a polimerazei, toți pacienții care au avut anticorpi in sange pentru hepatita C, care a fost bolnav și recuperate, ar trebui să re-ia un test. Este recomandat pentru a obtine testate pentru hepatita B și, apoi, în cazul unei concluzii pozitive și hepatita D. De asemenea, analiza calitativă prin reakatsiya trebuie efectuate împreună cu alte teste de sânge. Analizele vor arăta o imagine completă a răspândirii virale.

Din rezultatele testului, doar un test pozitiv pentru hepatita C va fi vizibil sau negativ, adică prezența sau absența unui virus. Dacă ieșirea este "detectată", virusul este și continuă să fie activ. Denumirea "nedetectată" indică absența unui virus sau cantitatea sa mică. Cu acest indicator ar trebui să ia în considerare faptul că sensibilitatea analitică a sistemelor de diagnostic și ARN diferite hepatita C poate fi încă în sânge, dar nu apare în analiză.

O metodă PCR deosebit de sensibilă dezvăluie ultra-hepatita C chiar și în cantități mici. Se utilizează un studiu de hibridizare cu fluorescență, care este de multe ori mai mare decât sistemele standard PCR. Metoda este utilizată în mai multe cazuri:

• presupuse forme ascunse de hepatită C;
• Diagnosticarea PCR nu a confirmat patogenul, dar există anticorpi;
• în cazul recuperării;
• pentru a detecta infecția precoce.

Înapoi la cuprins

Analiza decodificării

Decodificarea PCR a VHC afectează decizia finală atunci când face un diagnostic, în special cu metoda ultrametod. Principalul dezavantaj al acestui studiu este aderența strictă la condițiile sterile pentru eșantion și materiale. O ușoară abatere uneori prezintă concluzii analitice inexacte, complică diagnosticul și tratamentul ulterior. Analiza PCR pentru determinarea ARN-ului hepatitic nu prezintă întotdeauna cu încredere o imagine a bolii, uneori inexactități sunt permise și în ambele direcții.

Diagnosticarea virusului hepatitei, se recomandă utilizarea unui examen cuprinzător.

Norma indicatorilor

Absența anticorpilor JgM la hepatita virală C în rezultatele studiului este considerată normă în analiza reacției în lanț a polimerazei. În același timp, rezultatele analizei serologice indică prezența anticorpilor la virusul C și acest lucru este, de asemenea, în limitele normale. O definiție calitativă nu indică intensitatea bolii, ci doar dezvăluie agentul cauzator al hepatitei C în ARN. Această analiză se repetă după tratament pentru a confirma recuperarea efectivă.

abateri

Dacă sunt prezenți anticorpi JgM la ARN VHC, aceasta indică o infecție în curs de dezvoltare. Boala în același timp se desfășoară acut sau cronic, manifestată în diferite etape. Dacă se înregistrează o scădere a numărului de anticorpi, analiza va indica faptul că rezultatele tratamentului au fost obținute în timpul recuperării. Există cazuri extrem de rare de constatări fals pozitive în diagnosticare. Acestea se găsesc la femei în timpul sarcinii și la persoanele cu alte boli infecțioase.

Diagnostic cu PCR pentru hepatita C

Nu toată lumea știe de ce folosesc metoda de diagnosticare PCR pentru hepatita C. Unul dintre cele mai frecvente grupuri de boli sunt bolile infecțioase ale tractului gastro-intestinal. Sunt afectate cel mai frecvent stomacul (ulcerele), intestinele (colita, enterita) și ficatul (hepatita).

Dintre toate organele enumerate mai sus, cea mai mare povară este impusă ficatului. În organism, rolul ficatului este extrem de important:

1. Aproape toate reacțiile metabolice au loc în ficat (aici se formează toate tipurile de componente vitale care permit organismului să funcționeze pe deplin).
2. Ficatul este principalul organ de detoxifiere. Cu ajutorul său (în special, prin bile), multe substraturi sunt îndepărtate care pot provoca intoxicație și pot duce la consecințe grave.

Din păcate, mulți oameni nu își monitorizează sănătatea, motiv pentru care ficatul începe să sufere. Se dezvoltă, de obicei, hepatită cu diverse etiologii (virală, toxică).

Definiția hepatitei

Hepatita virală ocupă un loc important în rândul bolilor hepatice. Severitatea cursului bolii, complexitatea tratamentului le-a pus pe primul loc printre patologia celeilalte naturi ale acestui organ.

Toată hepatita este împărțită în acută și cronică. Hepatita A și B sunt clasificate ca fiind acute. Printre hepatitele cronice C vine primul.

Această boală este cauzată de virusul hepatitei C. O caracteristică caracteristică este faptul că boala poate dura mult timp fără manifestări clinice.

Este transmisă în principal prin sânge. Cu fluxul de sânge, virusul intră în ficat, unde începe să se înmulțească în celulele sale. Ca rezultat al acumulării virionului, are loc distrugerea hepatocitelor infectate. Ca răspuns la acestea, încep să se producă anticorpi, care încep să atace resturile de hepatocite. Din această cauză, o piscină împotriva celulelor hepatice este dezvoltată în timp, ceea ce agravează evoluția bolii.

Datorită faptului că boala este ușoară asimptomatică sau asimptomatică, iar semnele clinice apar doar atunci când celulele sunt afectate în mod semnificativ, această boală necesită crearea unor metode de diagnosticare pentru detectarea prezenței și luarea măsurilor adecvate.

Diagnosticul hepatitei C: analize calitative și cantitative

În prezent, pentru diagnosticul hepatitei C, se folosesc metode precum biopsia hepatică și imunograma.

Acestea vă permit să determinați direct prezența hepatocitelor infectate (specimen de biopsie hepatică) sau anticorpi specifici împotriva celulelor afectate (imunogramă). Cu toate acestea, există o metodă care vă permite să determinați în mod fidel prezența virusului în sine. Aceasta este reacția în lanț a PCR-polimerazei.

Esența acestei metode constă în faptul că, în anumite condiții, apare producerea de lanțuri de ARN. Acest lucru se datorează faptului că există fragmente de particule virale în sânge sau biopsie în cauză. Când le conectează cu unele molecule în mediu, are loc sinteza lanțurilor complementare ARN-ului viral. În analiza și compararea lor ulterioară cu secvența nucleotidică cunoscută a virusului hepatitei C, este posibil să se determine dacă virusul este prezent în organism și dacă este prezentă o leziune hepatică.

PCR se efectuează după detectarea anticorpilor specifici împotriva virusului hepatitei din sânge. După efectuarea testului, rezultatul - ARN-ul este "detectat" sau "nu este detectat". Ocazional, el poate spune "materialul insuficient" - în acest caz, este necesară retestarea hepatitei C.

Dacă numărul de particule virale este mai mic decât cantitatea minimă necesară, atunci putem spune că nu există hepatită și cantități minime de material genetic ar putea fi "confundate" datorită mimicii materialelor genetice sau a unor secvențe de nucleotide care ar putea coincide cu virusul.

1. Cu PCR, un rezultat negativ poate fi observat atunci când există într-adevăr particule de virus în sânge, dar ele sunt atât de mici (infecția a apărut recent sau analiza a fost precedată de terapia antivirală pe termen lung și intensivă) încât sistemul de testare pur și simplu nu putea determina concentrația lor în mod normal. ARN - "nu a fost detectat".
2. Dacă PCR are un rezultat pozitiv, atunci în sânge există atât de multe particule de virus, încât numărul lor depășește pragul de sensibilitate mai scăzut al sistemului de testare. În acest caz, există un risc ridicat de a dezvolta un proces infecțios (sau este deja prezent într-un stadiu mai avansat). De obicei, o cantitate mare de virus este deja o indicație pentru tratamentul și transplantul hepatic ulterior.

Uneori un test poate deveni fals pozitiv sau fals negativ.

Un rezultat fals negativ al PCR de hepatită este observat în cazul în care unele componente sunt prezente în mediul de reacție care inhibă formarea copiilor particulei virale. Din acest motiv, nu este posibil să se obțină o imagine reală a stării sângelui, care contribuie la trecerea virusului și la progresia bolii. Prezența heparinei în sânge poate, de asemenea, să afecteze reacția (prin reducerea vâscozității relative a sângelui). Interpretarea incorectă a analizei este posibilă chiar și atunci când nu au fost îndeplinite condițiile de transport și stocare a materialului supus anchetei.

Rezultatele pozitive false, atunci când hepatita C este diagnosticată, PCR rezultă cel mai adesea atunci când tubul sau mediul de lucru este contaminat. În plus, rezultatele pozitive pot fi observate cu prezența virușilor hepatitei din alte grupuri (datorită reacției încrucișate).

Analiza calitativă a PCR pentru detectarea hepatitei C

Prezența în sânge a unui număr mare de crioglobuline afectează în mod direct comportamentul PCR. Din acest motiv, este imperativ să se determine concentrația lor în sânge înainte de testarea hepatitei C, pentru a detecta o distorsionare a rezultatelor în avans și a preveni aceasta.

După aceste teste, devine clar dacă există particule virale în sânge. La determinarea acestora, se recomandă imediat începerea terapiei antivirale pentru a încetini progresia procesului. Spre deosebire de hepatita B, nu există un tratament complet pentru hepatita C; boala trece doar în stadiul latent și începe să meargă mai încet. Afecțiunile hepatice sunt inevitabile. În ultima etapă a procesului, atunci când ficatul nu mai poate face față funcției sale, poate necesita transplantul.

Tratamentul se efectuează în principal cu două medicamente - interferonul și ribavirina.

S-au dovedit eficiente în încetinirea procesului de înfrângere a hepatocitelor. Pe parcurs, tratamentul prin perfuzie este prescris în mod obligatoriu pentru a facilita activitatea ficatului.

Toți pacienții care au observat o creștere a numărului de particule virale în sânge sunt înregistrați în mod necesar cu un hepatolog. De câteva ori pe an, li se recomandă să fie supuși unui examen preventiv pentru a determina progresul procesului și detectarea în timp util a indicațiilor pentru transplant. În plus, este posibil să se utilizeze hepatoprotectori, deși opiniile medicilor diferă oarecum. Unii cred că aceste medicamente vă permit suspendarea procesului și protejarea hepatocitelor încă neafectate; alții sunt convinși că nu are nici un sens în a le lua, și terapie intensivă antivirală ar trebui să fie efectuate.

Astfel, hepatita C aparține categoriei de boli, identificarea cărora prezintă unele dificultăți. Îmbunătățirea metodelor de diagnosticare, precum și examinările preventive la timp vor reduce incidența acestei boli. De asemenea, este importantă prevenirea acestei boli. Trebuie să evităm cu atenție contactul cu sângele, să refuzăm să luăm medicamente, numai atunci această boală va fi eradicată. Principalul lucru în prevenirea și tratamentul este atitudinea conștientă a pacientului față de sănătatea sa.

Realizarea unei analize PCR pentru hepatita C și decodarea rezultatelor

Analiza PCR a hepatitei C este un studiu al cărui scop principal este identificarea materialului genetic al agentului cauzal. Analiza dezvăluie agentul cauzal al bolii prin utilizarea reacției în lanț a polimerazei. Acest diagnostic are un grad ridicat de precizie, specificitate pentru a detecta absența sau prezența unei infecții virale.

Esența diagnosticului

Pentru a efectua o analiză PCR pentru determinarea virusului hepatitei C de la un pacient, se administrează sânge venos, care conține potențial ARN (acid ribonucleic) HCV al virusului dorit.

Testul PCR pentru hepatita C implică o procedură de adăugare a particulelor de sânge ale pacientului:

• primeri (regiuni scurte sintetizate artificial ale genei necesare);
• enzima specială (ARN polimerază).

După prelevare, materialul biologic este trimis pentru cercetare la laborator. O parte din sânge este necesară pentru analiza PCR directă, cea de-a doua este trimisă pentru testare prin ELISA. Enzima este capabilă, într-un timp scurt, să crească numărul de material genetic al virusului agentului patogen. Într-un aparat special, se realizează mai multe cicluri de procese de încălzire și de răcire. În stadiul final, materialul obținut este comparat cu genele virusului și se face o concluzie cu privire la prezența sau absența patologiei în corpul pacientului.

Esența și comportamentul analizei PCR în laborator. Filmat de laboratorul de medicină Siberian Medical.

Tipuri de cercetare

Există 3 tipuri de diagnostice, care fac posibilă determinarea prezenței virusului hepatitei C în organismul uman:

• genotipare;
• de calitate;
• cantitativ.

Metoda calitativă

Diagnosticul hepatitei C cu o metodă calitativă este aplicabil pacienților la care sunt detectați anticorpi la virus în testul de sânge. În cazul prezenței fazei acute a ARN-ului VHC, astfel de măsuri de diagnosticare pot determina prezența bolii în 1-2 săptămâni de la infectare. În această perioadă, anticorpii împotriva hepatitei C nu pot fi încă dezvoltați.

Metoda cantitativă

Pentru determinarea concentrației virusului în probele de sânge se folosește o metodă cantitativă de diagnosticare. Un astfel de test pentru viremia (grad de concentrare) face posibilă determinarea cu precizie a numărului de unități de ARN virale. Rezultatul final este exprimat în volumul corespunzător. Dacă vorbim despre analiza cantitativă, atunci indicatorii sunt măsurați în 1 ml (1 cub. Cm).

Parametrul încărcării virale înseamnă nivelul infecțios al bolii, adică reflectă gradul de "infecțiozitate" al pacientului. În practică, aceasta înseamnă că cu cât este mai mare concentrația virusului în sânge, cu atât sunt mai mari șansele pacientului de a infecta alții cu hepatita C. O metodă cantitativă de cercetare vă permite de asemenea să stabiliți calitatea și eficacitatea tratamentului.

genotipare

Genotiparea relevă mutații ale agentului cauzal al bolii. Înainte de a prescrie un plan de tratament, genotipul virusului este determinat: calitatea și durata terapiei depind de acesta. De exemplu, în tratamentul bolii de tip I, eficiența este de 60%, în cazul tipurilor II, III - aproximativ 80%.

Beneficiile analizei PCR cu hepatită

Printre principalele avantaje ale procedurii se numără:

1. Posibilitatea diagnosticării precoce. Analiza PCR este capabilă să detecteze prezența unui virus în stadiile incipiente ale infecției.
2. Rezultate slabe de eroare. Resursa biologică studiată vă permite să diagnosticați o secțiune a materialului genetic care este caracteristică numai pentru un singur tip de infecție virală. Această circumstanță permite prevenirea rezultatelor false ale diagnosticului.
3. Grad ridicat de sensibilitate. Analiza PCR este capabilă să detecteze ARN-ul virusului în cantități mici, ceea ce permite, de asemenea, urmărirea infecțiilor latente în timp.

Indicații pentru

Testarea pentru PCR pentru hepatita C este necesară, dacă este disponibilă:

• care au contact cu bolnavi, ceea ce ar putea duce la infecții;
• simptome de ciroză hepatică (mărirea splinei, modificări nesemnificative în mărimea ficatului, detectarea unui plex venos pe abdomen sub piele);
• rezultatele pozitive ale testului ELISA;
• activitate crescută a AST și ALT (manifestată în analiza biochimică a sângelui);
• necesitatea de a controla comportamentul terapiei antivirale;
• stadiul inițial al tratamentului pentru necesitatea stabilirii unei încărcături virale;
• efectuarea stadiului final al terapiei pentru a exclude eventualele recidive;
• pacientul are hepatita B pentru a exclude dezvoltarea unei leziuni hepatice mixte.

Cum să vă pregătiți pentru donarea de sânge pentru cercetarea PCR

Pregătirea pentru analiza PCR include următoarele recomandări:

• sângele este luat dimineața;
• analiza este efectuată pe stomacul gol, deci este recomandabil să faceți o pauză între ultimul aport alimentar de 8-10 ore;
• cu câteva zile înainte de diagnostic trebuie să fie excluse alimentele grase, picante și prajite, băuturile alcoolice și fumatul;
• cu o zi înainte de analiză, trebuie să se abțină de efort fizic greu, să excludă clasele în sala de gimnastică sau în piscină.

Rezultatele analizelor: norme și abateri

Analiza în sine nu este pe termen lung, iar specialiștii specializați în hepatolog sau boli infecțioase decriptează rezultatele PCR pentru hepatita C. Pe baza rezultatelor analizei, pacientul este diagnosticat.

Pentru a descifra în mod corect rezultatele sondajului, se iau în considerare următorii indicatori:

• analiza biochimică a sângelui;
• datele cu ultrasunete;
• rezultatele biopsiei.

Interpretarea analizei cantitative

Atunci când se obțin rezultatele analizei cantitative PCR, se iau în considerare următorii indicatori:

Metoda PCR pentru detectarea hepatitei C

PCR este o reacție în lanț a polimerazei, care este utilizată pentru a determina prezența hepatitei C în ser. Rezultatul poate fi pozitiv și negativ.

Avantajele metodei PCR

Această metodă de diagnosticare are următoarele avantaje:

1. Metoda PCR permite determinarea următoarelor rezultate:
   • prezența unui virus ARN;
   • gradul de radiație;
   • informații genetice originale;
   • unicitatea și unicitatea datelor genetice.
2. Puteți utiliza orice material clinic necesar:
   • sânge;
   • plasmă;
   • urină;
   • fluide corporale și excrete;
   • sputa și altele.
3. Vă permite să determinați în sânge mai multe microorganisme simultan, spre deosebire de alte probe.
4. Obțineți rezultate în 24 de ore.
5. Metodele simplificate pentru stocarea și transportul analizelor, agenții patogeni sunt determinați chiar și într-un mediu mort.
6. Unicitatea PCR vă permite să identificați anumite microorganisme care nu pot fi supuse nici unei alte probe.
7. Grad ridicat de sensibilitate a reactivilor, testul este cel mai precis al acestui tip.

Caracteristicile analizei calitative a PCR

Se efectuează un test calitativ pentru a determina prezența unui virus în sânge și pentru a obține un rezultat negativ sau pozitiv.

Indicația pentru acest tip de diagnostic este detectarea anticorpilor la hepatita C în corpul pacientului.

Rezultate posibile:

• detectat (pozitiv);
• nu a fost detectat (negativ).

Un test de calitate nu este potrivit pentru pacienții cu un conținut foarte scăzut de virus în sânge, deci are o anumită sensibilitate.

Rezultatul "detectat"

Detectarea virusului hepatitei C poate fi la câteva săptămâni după infectarea organismului, chiar și în absența anticorpilor la acest agent patogen. Acest rezultat indică prezența în organism și a grupului de sânge a unui fragment de ARN caracteristic hepatitei C.

Pacientul este considerat infectat cu acest virus și suferă o răspândire suplimentară a celulelor patogene în organism.

Rezultatul "nu a fost detectat"

Această opțiune sugerează că în eșantionul de material biologic studiat nu există fragmente de ARN specifice hepatitei C. Acesta este un rezultat negativ.

Sensibilitatea testului nu dezvăluie conținutul redus de fragmente de ARN, astfel încât rezultatul "nedetectat" nu este întotdeauna plauzibil.

Caracteristicile interpretării rezultatelor

Principala caracteristică a interpretării rezultatelor este sensibilitatea la prag a metodei PCR.

Aceasta depinde de următorii indicatori:

• acuratețea studiului;
• tipul și calitatea echipamentului utilizat.

Se remarcă faptul că sensibilitatea poate varia între 10-500 UI / ml. Din aceasta rezultă că dacă un virus este prezent în corpul pacientului studiat la o concentrație mai mică de 10 UI / ml, testul va arăta că rezultatul "nu este detectat". Dar acest lucru nu înseamnă că agentul patogen este complet absent.

Variante de sisteme de diagnostic

În prezent, există următoarele opțiuni pentru sistemele de diagnosticare:

1. Dacă se administrează sânge de la un pacient supus tratamentului antiviral, trebuie utilizate sisteme de diagnosticare cu o sensibilitate de cel puțin 50 UI / ml. Următoarele analizoare sunt utilizate în acest scop:
   • Test Cobas Ampicolor HCV;
   • RealBest ARN HCV.
2. Pentru a face un diagnostic definitiv de "hepatită C", este necesar să se detecteze virusul ARN în trei probe diferite de material biologic. Aceste recomandări sunt elaborate de Organizația Mondială a Sănătății. Dacă rezultatul este de trei ori negativ, diagnosticul nu este confirmat.
3. În prezent, pe lângă metoda PCR, există un test mai precis, numit TMA (metoda de amplificare transcripțională). Pragul său de sensibilitate este mult mai mare decât în ​​alte metode de diagnosticare.

Gama de modificări detectate ale virusului

În acest stadiu al dezvoltării genetice, sunt cunoscute mai multe tipuri și variante de modificare a virusului.

Diagnosticul de laborator în țara noastră cu precizie absolută poate determina următoarele genotipuri:

Caracteristicile analizei cantitative PCR

Analiza cantitativă este definiția virusului hepatitei C în corpul uman. În timpul studiului, ARN și încărcătura virală în materia primă sunt determinate prin PCR. În caz contrar, putem spune că testul vă permite să identificați câte celule virale sunt într-un fluid biologic. Pentru acest tip de studiu, se utilizează numai sânge venos. Nu există nici un preparat specific de testare.

Analiza cantitativă vă permite să monitorizați în stadiul de tratament deja început și să evaluați eficacitatea acestuia. Pentru evaluare, datele de testare sunt luate înainte și în timpul intervențiilor terapeutice. Cu ajutorul rezultatelor obținute este posibil să se prevadă evoluția bolii.

Cu succesul metodei de tratament alese după 3 luni, cantitatea de ARN ar trebui să scadă de mai multe ori. Conform recomandărilor, analiza cantitativă se efectuează după una, apoi după trei și șase luni. Ultimul rezultat cu succesul tratamentului trebuie să fie negativ.

Evaluarea rezultatelor testului cantitativ PCR

În țara noastră, există 2 opțiuni posibile pentru evaluarea rezultatului unui test cantitativ PCR:

• numărul de copii pe mililitru de lichid biologic;
• numărul de unități internaționale pe mililitru.

Pentru a obține unități internaționale, numărul de copii este împărțit la 4.

• mare cu PCR peste 800.000 UI / ml;
• scăzută cu PCR sub 400.000 UI / ml.

Rezultatul testului cantitativ oferă 2 opțiuni:

• "Sub gama de măsurare";
• "Nu a fost detectat" (negativ).

Evaluare: "sub domeniul de măsurare"

O astfel de concluzie se face atunci când un test ARN cantitativ nu a detectat agentul cauzal al hepatitei C în materialul sursă celulară, dar virusul este încă prezent în sânge. Fiabilitatea analizei este confirmată de metoda calitativă, deoarece pragul de sensibilitate al testului cantitativ nu poate detecta valori mici și concentrații ale agentului patogen.

Evaluare: "nu a fost detectat"

O astfel de concluzie se face atunci când virusurile ARN de hepatită C nu au fost detectate în materialul sursă în timpul diagnosticului. Acesta este un rezultat negativ.

Interpretarea rezultatelor analizei testului cantitativ PCR

Folosind indicatorul de încărcătură virală determinați:

• gradul de neglijare a bolii;
• cât de infecțios este pacientul;
• eficacitatea terapiei antivirale.

Cu cât este mai mare rata virusului hepatitei C în organism, cu atât este mai periculos pacientul față de ceilalți și cu cât este mai progresiv boala.

Hepatita C PCR este o metodă importantă de diagnosticare, în special în timpul intervențiilor terapeutice. Datorită rezultatelor negative sau pozitive obținute, este posibil să se evalueze eficacitatea acestora, să se vindece complet pacientul sau să se scurteze timpul de tratament.

Analiza PCR pentru hepatita C

Pentru diagnosticul de "hepatită virală cronică C (CVHS)" este necesară o examinare completă a persoanei, care include studii clinice, de laborator și instrumentale. Important din punct de vedere al diagnosticului pentru diagnosticul corect este metoda PCR - reacția în lanț a polimerazei.

Ce arată această analiză și de ce este necesar?

Această metodă de laborator detectează ARN-ul virusului hepatitei C în sângele uman. Împreună cu testul imunosorbant legat de enzime (ELISA) pentru anticorpi împotriva virusului, PCR este utilizat pentru a face un diagnostic al CVHC și a genotipului său patogen. Această cercetare este una dintre cele mai noi metode de diagnosticare de laborator. Fiabilitatea sa la CVHS depășește 97%, ceea ce este considerat un indicator foarte bun pentru cercetare.

Există trei teste de sânge PCR pentru CVHS: genotipări calitative, cantitative și viruși. Primul studiu (analiza calitativă) a virusului îl detectează în sânge și, prin urmare, este utilizat doar pentru diagnosticare.

Al doilea studiu (cantitativ) determină gradul de încărcare virală pe corp, prin urmare, este utilizat pentru a monitoriza eficacitatea terapiei.

Al treilea PCR (genotipare) clarifică diagnosticul, stabilind genotipul virusului, ceea ce este foarte important pentru numirea corectă a tratamentului antiviral.

Esența tehnicii de reacție în lanț a polimerazei este utilizarea enzimelor care înmulțesc materialul genetic al agentului patogen în biomaterial. În procesul de replicare, tubul cu sânge este încălzit de mai multe ori și răcit la temperatura necesară pentru accelerarea reacției enzimatice. Ca urmare a acestor manipulări, cantitatea de genom viral crește de mai multe ori, permițându-i să fie detectată chiar și cu o cantitate minimă.

Diagnosticarea PCR are multe avantaje față de alte teste de laborator:

• sensibilitate ridicată - 97-98%;
• specificitate analitică garantată (dezvăluie exact agentul patogen pe care doriți să îl găsiți, și nu tulpina acestuia);
• viteza de conducere (nu durează mai mult de 2 zile pentru a obține o concluzie).

Trei tipuri de teste PCR

Analiza PCR de înaltă calitate este atribuită tuturor pacienților în care analiza ELISA a detectat anticorpi împotriva virusului HVGS. După efectuarea PCR de înaltă calitate, pot fi obținute două opțiuni de răspuns: "ARN-ul este detectat" sau "ARN-ul nu este detectat". Pentru a detecta cantitatea minimă de virus în sânge, sunt necesare sisteme de testare cu o sensibilitate de cel puțin 50 UI / ml. Dacă concentrația virusului în sângele pacientului este mai mică decât cea determinată de diagnostic, rezultatul studiului poate fi fals negativ. Pentru a evita o astfel de eroare de diagnosticare, laboratoarele care efectuează diagnosticarea PCR trebuie să dispună de sisteme de testare foarte sensibile. În laboratorul "Invitro" se utilizează, de exemplu, teste cu sensibilitate de 15 UI / ml. Lucrătorii din laboratoare sunt obligați să furnizeze informații despre sensibilitatea testelor la pacienți și la medici, la prima lor solicitare.

Analiza cantitativă a PCR determină gradul de viremie, adică concentrația patogenului din sânge, încărcătura virală. Rezultatul acestui studiu, spre deosebire de PCR de înaltă calitate, este exprimat în numere, de exemplu 2 × 10 * 6 UI / ml, ceea ce înseamnă 2 milioane de unități internaționale în 1 ml de sânge. Unele laboratoare utilizează un alt indicator - numărul de copii / ml. Acești doi indicatori sunt ușor de convertit: 1 unitate internațională este egală cu 4 copii de ARN. Astfel, 2 x 10 x 6 UI / ml va însemna că 8 x 10 x 6 copii de ARN viral în 1 ml, adică 8 milioane de exemplare în 1 ml de sânge.

Genotiparea este definiția uneia dintre cele șase genotipuri ale unui virus. Imaginea clinică, rata de dezvoltare a complicațiilor hepatice și prognosticul pentru viața viitoare a pacientului depind de genotipul agentului cauzal. Genotipul virusului este foarte important deja în stadiul diagnosticului, deoarece combinația de medicamente și durata cursului terapeutic care urmează a fi atribuită pacientului depind de determinarea sa corectă.

Cu toate acestea, chiar și această cercetare de laborator aparent "perfectă" are dezavantaje:

• studiul replică materialul genetic al tuturor agenților patogeni, chiar și cei care nu trăiesc, ceea ce poate distorsiona rezultatul. Prin urmare, pentru a monitoriza eficacitatea cu ajutorul PCR, reanalizarea este efectuată nu mai devreme de 2 luni de la cea precedentă, astfel încât virusii morți pot "părăsi" organismul pacientului;
• o parte a genomului viral, care este determinată folosind sisteme de testare, poate fi prezentă teoretic în alte virusuri sau microorganisme, astfel încât există o posibilitate de răspuns fals pozitiv;
• virușii se mută repede. Uneori viteza și amploarea mutației virale este atât de mare încât sistemul de testare nu mai atinge genomul. Ca urmare, este posibil un rezultat negativ fals.

Pentru a rezolva aceste neajunsuri, producătorii de sisteme de testare de laborator pentru diagnosticarea PCR efectuează în mod constant testele lor, inclusiv reacțiile încrucișate și sensibilitatea la un anumit genotip al virusului.

Cum se face un test PCR pentru hepatita C?

Pentru ca încheierea unui examen PCR să fie fiabilă, este necesar să se respecte cu strictețe regulile de pregătire pentru comportamentul său:

• studiul se desfășoară pe stomacul gol (glucoză, grăsimi, minerale care intră în sânge din alimente, pot afecta viteza și calitatea reacției enzimatice);
• decalajul dintre ultima masă și prelevarea de probe de sânge pentru analiză trebuie să fie de cel puțin 8 ore;
• în ajunul studiului este interzisă consumul de alcool și consumul de alimente grase, perioada de eliminare a cărora este prelungită;
• o zi înainte de a merge la laborator ar trebui să evite stres fizic și emoțional puternic;
• până când nu se recomandă să se fumeze.

Pentru a evita apariția unor concluzii false, presupusul pacient trebuie să vină la laborator puțin mai devreme decât sângele va fi luat. Este nevoie de 15-20 de minute pentru ca o persoană să-și prindă respirația, să se calmeze. Adrenalina, care este prezentă în sânge după o plimbare rapidă, poate afecta rezultatul examinării.

Dacă pacientul vizat pentru analiză ia medicamente, el trebuie să informeze medicul despre acest lucru. Este posibil ca unele dintre ele să fie refuzate de ceva timp (dacă este posibil).

Rezultatul analizei PCR pentru hepatita C

Decodarea rezultatelor implicate în medicul de laborator al laboratorului care a efectuat analiza. Decodificarea este determinarea deviației rezultatului obținut din normă. Rata indicatorilor este stabilită direct de producătorul sistemului de testare, care este utilizat de laboratorul de diagnosticare. Prin urmare, nu este surprinzător faptul că, în unele laboratoare, încărcătura virală este determinată în UI / ml, iar în altele în copii / ml.

După ce am obținut concluzia, este necesar să o putem interpreta corect. Tratamentul rezultatelor studiului trebuie efectuat de către medicul curant al pacientului cu hepatită C. Doar după o examinare obiectivă, instrumentală și de laborator a pacientului, medicul poate obține o cantitate suficientă de date pentru interpretarea corectă a rezultatelor PCR obținute.

Evaluarea analizei calitative, ca regulă, nu cauzează dificultăți, chiar și la pacienți. Rezultatul poate fi unul singur: "detectat" sau "nu a fost detectat". În acest caz, a doua este norma.

Indicatorii de analiză cantitativă sunt mai dificil de interpretat. Acesta arată gradul de încărcare virală a pacientului. Chiar si printre hepatologi, nu exista un consens cu privire la modul de tratare a viremiei detectate. Majoritatea medicilor sunt înclinați să creadă că ar trebui luată în considerare o sarcină mare de mai mult de 8 × 10 * 5 UI / ml. O sarcină mai mare de 1 × 10 * 7 UI / ml este considerată foarte ridicată, în timp ce o sarcină scăzută este mai mică de 4 × 10 * 5 UI / ml.

Gradul de încărcare virală indică virulența (agresivitatea) virusului: cu cât este mai mare cantitatea în sânge, cu atât mai repede se pot dezvolta complicațiile ficatului. O concentrație ridicată a virusului în sângele unei femei gravide crește probabilitatea penetrării sale prin bariera hemato-placentară la făt. Viremia afectează, de asemenea, eficacitatea tratamentului: cu un număr redus, eficacitatea terapiei este mai mare decât cea cu cele mai înalte.

Pentru a fi încrezători în exactitatea analizei PCR pentru hepatita C, este necesar să se acorde prioritate numai acelor laboratoare bine dovedite. Politica de prețuri în acest caz nu ar trebui să joace un rol primordial.

Studiu PCR privind hepatita C: tipuri, indicații, transcript

Virusul hepatitic C este o boală gravă care apare cu afectarea ficatului. La optzeci la suta dintre pacienti, devine cronica. Virusul se înmulțește în celulele hepatice - hepatocite - și provoacă moartea lor. Țesutul mort este înlocuit cu focare de țesut conjunctiv, se dezvoltă fibroza.

Pe măsură ce fibroza se dezvoltă, ficatul nu reușește să-și îndeplinească funcțiile, începe ciroza hepatică, care este periculoasă pentru complicațiile sale: presiunea crescută în sistemul venei portal, sângerarea gastrointestinală, coagularea insuficientă a sângelui, modificările mentale datorate deteriorării nucleilor creierului de către produsele toxice.

Cauza bolii este infecția cu un virus din familia Flaviviridae, care aparține tipului de virusuri ARN. Aceasta înseamnă că materialul genetic prin care sunt sintetizate proteinele agentului patogen este codificat în molecula de acid ribonucleic. Infecția are loc prin sânge, sexual, și de la o femeie însărcinată la făt. Din păcate, o perioadă suficient de mare de timp poate trece între infecție și începerea producției de anticorpi - de la două săptămâni la șase luni. Acest lucru nu permite determinarea infecției prin ELISA și începe tratamentul într-un stadiu incipient.

Ce este analiza PCR?

PCR este o metodă de analiză moleculară, care permite detectarea materialului genetic al agentului patogen deja în prima săptămână după infecție cu ajutorul reacției în lanț a polimerazei. Studiul are o specificitate ridicată, precizie și permite nu numai determinarea prezenței sau absenței virusului, ci și concentrarea și genotipul acestuia.

Pentru studiu, se iau sângele unui pacient în care ARN-ul virusului poate fi localizat. Primerii se adaugă la regiunile sintetizate artificial din sânge ale genei dorite de lungime mică, iar ARN polimeraza este o enzimă specială care crește în mod repetat cantitatea de material genetic al agentului patogen. Folosind un aparat special, se efectuează mai multe cicluri de încălzire și răcire. Apoi, materialul este analizat și comparat cu genele cunoscute ale virusului, pe baza cărora se face o concluzie cu privire la prezența sau absența infecției.

Tipuri de analize PCR pentru hepatita C

Există trei tipuri de analize PCR:

Analiza calitativă a PCR. Prima etapă a studiului. Vă permite să identificați materialul genetic al virusului în sânge.

Analiza cantitativă a PCR. Vă permite să determinați încărcarea virală - concentrația materialului genetic al agentului patogen într-un mililitru de sânge. Acest studiu este efectuat înainte de începerea tratamentului și apoi în primul, al patrulea, al doisprezecelea, și (în cazul în care cursul este lung) de douăzeci și patrulea săptămână de tratament pentru a evalua eficacitatea acestuia.

Genotipare. Agentul cauzator al hepatitei C se mută frecvent și rapid. Au existat șapte variante ale acestui genotip de virus găsite pe planetă. În Rusia, primul, al doilea și al treilea tip sunt comune. Fiecare dintre genotipuri are o rezistență diferită față de terapie, de exemplu, eficacitatea tratamentului primului tip este de șaizeci la sută, iar pentru a doua și a treia această cifră atinge optzeci și cinci. Prin urmare, pentru a selecta medicamentele adecvate și pentru a prescrie un curs de tratament cu o durată suficientă, este necesar să se determine exact tipul de virus cu care este infectat pacientul.

Indicatii pentru analiza PCR pentru hepatita C

Studiul PCR este prescris în următoarele cazuri:

• contactul cu o persoană bolnavă la care s-ar putea produce infecția;
• test imunologic enzimatic pozitiv;
• semne de ciroză a ficatului: o modificare a mărimii ficatului, o splină mărită, apariția unui plex venoasă subcutanat pe abdomen;
• apariția simptomelor de leziuni hepatice: durere în abdomenul drept, îngălbenirea pielii;
• creșterea activității ALT și AST în analiza biochimică a sângelui;
• înainte de a începe tratamentul pentru a determina încărcătura virală;
• pentru a monitoriza eficacitatea terapiei antivirale;
• după tratament pentru a controla recidiva;
• în prezența hepatitei B diagnosticate, pentru a exclude afectarea ficatului mixt.

Explicarea studiilor PCR privind hepatita C

Decodificarea analizei PCR și imunotestei enzimatice pentru hepatita C ar trebui făcută de către un specialist în hepatologie sau boli infecțioase. Analiza rezultatelor PCR este necesară în combinație cu datele analizei biochimice a sângelui, biopsiei și ultrasunetelor. Numai un medic calificat va putea analiza rezultatele cercetării și, pe baza acestora, va prescrie tratamentul corect.

Analiza calitativă de decodificare.

În materialul biologic analizat a fost găsit materialul genetic al agentului patogen. Infecția confirmată.

Infecția este absentă sau cantitatea de ARN patogen este sub limita de sensibilitate.

Decodificarea analizei cantitative.

Rata normală pentru persoanele sănătoase. Aceasta înseamnă că materialul de testare nu conține ARN de hepatită C sau concentrația sa este sub pragul de sensibilitate al studiului.

Concentrația ARN este sub intervalul de cuantificare. Aceste rezultate sunt interpretate foarte atent, corelându-le cu date din alte studii, adesea re-studiate.

Nivelul încărcăturii virale la o anumită concentrație este considerat scăzut. De obicei, o scădere a cantității de virus înseamnă că terapia are succes.

Mai mult de 8 * 10 ^ 5 UI / ml

Nivelul încărcăturii virale la o anumită concentrație este considerat ridicat.

Mai mult de 2,4 * 10 ^ 7 UI / ml

Cantitatea de ARN este peste limita superioară a intervalului de cuantificare. Este imposibil să se tragă concluzii cu privire la gradul de încărcare virală cu acest rezultat. De obicei, în astfel de cazuri, testul se repetă cu diluarea unei probe de sânge.

Decodificarea genotipării.

ARN a unui genotip specific detectat

Virusul hepatitei C cu un anumit genotip și subtip a fost detectat în biomaterial. Rezultatul este codificat cu cifre romane și litere latine, de exemplu - 1a, 2b. În total, există șapte genotipuri și șaizeci și șapte subtipuri, însă în Rusia există doar primele trei tipuri.

A fost detectat ARN-ul virusului hepatitei C

ARN-ul a fost găsit în sângele unui genotip rar pentru Rusia, care nu poate fi atribuit primului, celui de-al doilea sau celui de-al treilea tip. Sunt necesare mai multe cercetări.

Acest rezultat indică faptul că pacientul este sănătoasă sau că cantitatea de ARN patogen este prea mică.

Este posibil ca analiza PCR pentru hepatita C să fie negativă, iar testul imunosorbant legat de enzimă să recunoască anticorpii împotriva virusului. Acest lucru înseamnă că pacientul a avut hepatită C acută și sa recuperat de unul singur. Aproximativ douăzeci de cazuri de infecție au ca rezultat recuperarea spontană dacă corpul pacientului are o rezistență suficientă la infecție.

Deși PCR este foarte precis, rezultatele sale pot fi distorsionate în următoarele situații:

• sângele a fost transportat în laborator în condiții necorespunzătoare, temperatura fiind încălcată;
• proba de biomaterial a fost contaminată;
• au existat urme reziduale de heparină și alte anticoagulante în sânge;
• Investigatorii s-au dovedit a fi inhibitori - substanțe care încetinesc sau opresc reacția în lanț a polimerazei.

Avantajele PCR față de alte metode

Diagnosticarea în stadii incipiente. PCR detectează materialul genetic al agentului cauzal. Folosind analiza imunofluorescenței, pot fi identificate numai imunoglobulinele - substanțe pe care organismul le produce ca răspuns la o infecție. În cazul infecției cu virus hepatitic C, diferența dintre infecție și debutul răspunsului imun poate fi de câteva săptămâni și luni, în acest moment ELISA va fi ineficient. PCR va da un răspuns în prima săptămână după infecție.

Scăderea probabilității de eroare. În materialul studiat se determină suprafața materialului genetic, care este caracteristică numai pentru un singur tip de agenți patogeni. Acest lucru elimină rezultatele false. Când erorile ELISA sunt posibile, deoarece același tip de anticorp poate fi eliberat împotriva diferitelor virusuri - astfel de anticorpi se numesc anticorpi încrucișați.

Sensibilitate ridicată. PCR permite detectarea ARN-ului agentului cauzal chiar și în cantități minime. Acest lucru face posibilă identificarea infecțiilor ascunse.

Cum să vă pregătiți pentru donarea de sânge pentru cercetarea PCR

Pentru analiza PCR a hepatitei C, se colectează sânge venos. De obicei, două porțiuni de sânge sunt luate din vena pacientului la un moment dat: primul este trimis pentru PCR, iar cel de-al doilea prin ELISA. Acest lucru este facut pentru a evalua mai exact cat de mult este infectat un pacient cu un virus si cum imunitatea se lupta impotriva acestuia.

De obicei, pacientul trebuie să respecte următoarele reguli:

• un test de sânge este luat dimineața;
• Intervalul dintre ultima masă și donarea de sânge ar trebui să fie între opt și zece ore;
• cu două sau trei zile înainte de analiză, este necesar să se renunțe la alimentele prăjite și grase și la alcool;
• timp de douăzeci și patru de ore înainte de analiză, pacientul trebuie să evite efortul fizic: nu purtați greutăți, nu mergeți la sala de gimnastică sau la piscină.