Disponibilitatea medicamentelor moderne anti-hepatită B (HBV) cu indicații clare pentru administrarea lor necesită o verificare precisă și rapidă a diagnosticului. Cu toate acestea, din cauza datelor clinice limitate în primele săptămâni ale bolii și a metodelor limitate de imunotest de analiză, rata de diagnostic scade.
Prezența markerilor anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe vă permite să confirmați HBV sau să stabiliți existența unei boli anterioare. Dar este posibilă determinarea prezenței particulelor virale active în sânge și numărarea numărului lor în momentul studiului prin PCR - un test cantitativ în timp real pentru detectarea hepatitei B. Metoda, în comparație cu metodele de diagnostic ELISA, rezolvă problemele de diagnosticare și permite prezicerea cursului bolii în timp ce primește medicamente antivirale.
Elementele de bază ale diagnosticului bolii
Diagnosticul hepatitei B se bazează pe evaluarea manifestărilor clinice, a testelor imunologice enzimatice și a metodelor instrumentale de cercetare. Boala apare în faza acută după perioada de incubație și, în funcție de doza de infecție și de eficacitatea tratamentului, intră într-o etapă cronică. Scopul principal al tratamentului este de a preveni cronizarea, adică eliminarea tuturor particulelor virale din sânge. Cursul clinic al bolii este un remediu fără viremia ulterioară.
Faptul de a elimina infecția trebuie dovedit printr-o metodă cantitativă de cercetare.
Deoarece orice imunoenzimatice calitativă a diagnostica VHB indirect, adică, nu arată prezența agentului patogen în mediul intern al organismului, ci reprezintă un răspuns imun la infecție, monitorizarea eficacității terapiei și de vindecare fapt devine trudnodokazuemymi. Prin urmare, pacientul cu hepatită B sau cu prezența criteriilor de diagnostic în favoarea acestuia trebuie să efectueze reacția în lanț a polimerazei pentru a cuantifica numărul de particule virale din sânge. Rata de diagnostic este lipsa copiilor ADN-ului infecției.
Descrierea metodei de diagnostic
Metoda extrem de sensibilă de diagnosticare PCR a hepatitei B aparține categoriei de studii biologice moleculare elaborate genetic. Prin aceasta este determinată de cantitatea de ADN viral din materialul biologic al pacientului și de viteza permisă. Conform rezultatelor obținute, se stabilește numărul de particule de virus per unitate de volum. Materialul pentru testul de diagnosticare este sângele venos al pacientului. Este de dorit un aport la stomacul gol datorită efectului posibil al serului chyl asupra rezultatelor studiului.
Rezultatele obținute trebuie furnizate medicului pentru interpretarea și determinarea unor tactici ulterioare. Decodificarea independentă nu reprezintă valoarea diagnosticului.
Semnificația rezultatului numărului de particule virale obținute prin metoda PCR depășește valoarea imunologică a enzimelor. Deoarece analiza în modul în timp real arată prezența agentului cauzator al bolii în sânge, conținutul său de informație este mai mare decât alții. Dacă ELISA indică doar prezența anticorpilor, care se observă la 4 săptămâni de la perioada de incubație și durează mai mult de 8 săptămâni după eliminarea virusului din sânge, atunci reacția în lanț a polimerazei confirmă în mod clar desfășurarea activă a bolii sau vindecarea ei, caracterizează dinamica terapiei prescrise.
Reacția în lanț a reacției polimerazice cu determinarea cantitativă a particulelor de patogen rezolvă întrebările de diagnostic în favoarea opririi tratamentului datorită recuperării sau terapiei continue din cauza lipsei de eficacitate. Metoda este cât mai specifică posibil pentru virusul HBV și se distinge printr-o eroare acceptabilă.
Indicatii si obiective de performanta
Analiza cantitativă a hepatitei B este cea mai fiabilă și vă permite să confirmați datele obținute prin metode ELISA. El este numit când:
- obținerea unui rezultat pozitiv de diagnostic al testului ELISA;
- tratarea unui pacient cu un diagnostic stabilit de leziuni hepatice virale;
- în diagnosticul etiologiei mixte a hepatitei;
- dacă este necesar, determină încărcarea virală la un pacient.
Deoarece metoda enzimatică de imunotestare este utilizată mai intens în practica unui specialist în bolile infecțioase, unii pacienți cu boală ușoară pot fi tratați fără a fi nevoie să numărați încărcătura virală. Dar PCR este în general considerat "standardul de aur" al diagnosticării în hepatologie, deoarece, datorită unicității rezultatului său, elimină o serie de probleme organizaționale. Prin urmare, direcția pacientului pentru analiza cantitativă are următoarele obiective:
- obținerea datelor privind numărul de particule virale din sângele pacientului;
- confirmarea cursului acut de hepatită și verificarea în timp util a bolilor cronice;
- detectarea constanta a purtatorilor de virus latenti cu teste pozitive ELISA, monitorizarea viremiei lor;
- hotărând asupra numirii tratamentului antiviral, combinării acestuia și încetării acestuia.
Scopul cel mai semnificativ al aplicării unui test cantitativ de PCR pentru detectarea HBV este identificarea posibilelor combinații de tratament. În cazurile de încărcare virală mare, rezultatul analizei oferă specialistului posibilitatea de a continua combinația de medicamente. În timpul terapiei, este ușor de determinat eficacitatea tratamentului farmacologic prescris pe baza rezultatelor PCR. Ghidat numai de datele metodelor de imunotestare, este imposibil să se determine în timp util de tratament și eficiența sa actuală. Prin urmare, un test cantitativ în timp real este o analiză necesară înainte de începerea tratamentului pentru hepatită acută, infecție latentă a virusului cu viremie ridicată și VHB cronic.
Interpretarea rezultatelor testelor PCR cantitative
Interpretarea rezultatelor testului cantitativ PCR trebuie să fie efectuată de către medicul curant al pacientului. Este necesar să se evalueze indicatorul de diagnosticare și să se determine tactica terapeutică.
Un analizor standard este capabil să producă un indicator cantitativ care să reflecte numărul de copii ale ADN-ului viral prezent în sângele venos studiat. Unități de măsură - copii / ml, UI / ml (copii pe mililitru, unități internaționale pe mililitru). Interpretarea rezultatelor este prezentată în tabel cu indicarea diferitelor unități de măsură.
Depistarea testului de sânge pentru hepatita B
Hepatita B este una dintre cele mai periculoase boli ale timpurilor noastre.
Este cauzată de un virus care intră în organism atunci când sângele intră în contact cu materialul biologic infectat, inclusiv cu cele care rămân în accesorii pentru manichiură, instrumente medicale, mașini de tatuat care nu au fost dezinfectate în mod corespunzător. Virusul poate fi, de asemenea, transmis prin contact sexual.
Hepatita B este analizată pentru a diagnostica boala luând sângele pacientului.
Infecția are loc prin căi sexuale și interne, tipul de răspândire este hematogen (prin sânge). Când este infectat, virusul intră în hepatocite (celule hepatice), care se produce în viitor. Prin sânge, boala se răspândește rapid în tot corpul. Virusul B (HBV) se caracterizează prin rezistență ridicată la efectele temperaturii și acidului și își poate menține proprietățile dăunătoare timp de șase luni.
Ce teste de sânge aveți pentru hepatita B?
Dacă hepatita B prezintă primele simptome, este necesară trecerea testelor înainte de începerea tratamentului și a tratamentului. Un test de sânge este o metodă sigură de instalare a infecției cu hepatită. Realizat în laborator. Materialul de test hepatitic B se administrează pe stomacul gol: un minim de 8 ore trebuie să treacă de la ultima masă.
Pentru a detecta virusul hepatitei B în sânge, se folosesc teste de trei tipuri care caracterizează prezența virusului în sânge:
- analiza prezenței ADN VHB în material prin studierea reacției în lanț a polimerazei;
- studiu calitativ al prezenței proteinei IgG anti-HBc și a antigenului HBsAg (găsit la cei sănătoși, infectați și bolnavi);
- analiza pentru detectarea proteinelor HBeAg și IgM anti-HBc (caracterizarea agravării bolii).
Pentru completare, se recomandă efectuarea simultană a cercetărilor pe mai multe marcatori.
Teste imunologice pentru hepatita B
Cele mai frecvente teste pentru hepatita B sunt imunologice. Esența lor este de a detecta anticorpi în sângele produs de corp sau de ficat. Probele sunt calitative și cantitative. Testele și transcriptele hepatitei B conțin, de obicei, informații despre câteva proteine caracteristice. În timpul testului, se testează următorii anticorpi:
Se întâmplă în stadiile incipiente ale infecției înainte de debutul semnelor clinice.
Un marker pozitiv indică prezența unui virus, dar se găsește și la oameni complet sănătoși. Dacă în sânge există mai puțin de 0,05 UI / ml, rezultatul este considerat negativ. Dacă concentrația anticorpului este mai mare, analiza este considerată pozitivă.
Se găsește în aproape fiecare pacient infectat. Menținerea indicatorilor la un nivel ridicat poate indica o tranziție a bolii într-o formă cronică a cursului. Un marker pozitiv indică prezența bolii în perioada de exacerbare, recuperare prelungită. HBeAg este un semn extrem de prost. Pacientul este foarte contagios. În mod normal, proteina nu este detectată în sânge.
Există două tipuri de anticorpi anti-HBc: IgG și IgM. Prezența IgM în sânge este un semn al cursului formei acute, infecția ridicată a pacientului și posibilitatea bolii pererohoda în forma cronică. În mod normal, prezența IgM nu este permisă. IgG este un indicator favorabil. Marcatorul indică imunitatea formată de organism împotriva hepatitei B.
Dacă un marker este detectat în sânge, se poate trage o concluzie privind evoluția favorabilă a bolii și formarea imunității protectoare la pacient.
- Anti-HBs.
Marcatorul semnalează recuperarea și formarea imunității.
Detectarea ADN-ului HBV prin PCR
Pentru examinarea în laborator și detectarea prezenței unui diagnostic de hepatită B în sânge, se utilizează metoda PCR. Modul în care este considerată reacția în lanț a polimerazei este cea mai actualizată în domeniul detectării bolii.
Decodificarea finală arată dacă există urme de prezență genetică a agentului patogen în celulele hepatice.
Dacă toate principiile sunt urmărite în timpul cercetării, rezultatul este absolut corect. Metoda este utilizată pentru diagnostic, utilizată în procesul de tratament și în terapia antivirală.
- Un PCR de înaltă calitate pe total are numai două semnificații: "detectat" și "nu este detectat". Procedura se efectuează pentru fiecare pacient cu hepatită suspectată. Cu o sensibilitate medie a testului PCR în intervalul de la 10 la 500 UI / ml, cu niveluri scăzute de ADN-ul virusului în sânge, nu se detectează nici un material genetic.
- PCR cantitativ. În contrast cu calitativul, indică nu numai hepatita B. Analiza cantitativă indică cât de departe normele unei persoane sănătoase sunt departe de indicatorii pacientului în termeni numerici. Metoda permite evaluarea stadiului bolii și prescrierea tratamentului. Sensibilitatea testului PCR în urmări cantitative este mai mare decât în metoda calitativă. Baza este numărul de ADN detectat, care este exprimat în copii pe mililitru sau UI / ml.
În plus, PCR cantitativ oferă o imagine asupra efectelor tratamentului și corectitudinii terapiei alese. În funcție de cantitatea de material gena virale, se poate decide să se scurteze perioada de tratament sau, dimpotrivă, să se prelungească și să se consolideze.
Test de sânge biochimic pentru hepatita B
Metoda de analiză biochimică este necesară pentru a obține o imagine clinică completă a evoluției bolii. Această metodă de diagnosticare oferă o înțelegere a activității organelor interne (ficat, rinichi, vezică biliară, tiroidă și altele). Decodificarea oferă o înțelegere a ratei metabolice în organism, a posibilelor patologii ale metabolismului. Indicatorii detaliați vor indica o lipsă de vitamine, macronutrienți și minerale necesare pentru sănătatea și viața umană.
Puteți efectua un test pentru hepatită la orice alt centru de diagnosticare (Invitro, Gemotest, etc.). Testul biochimic de sânge pentru detectarea hepatitei B include următoarele componente.
Analiza cantitativă a enzimei ALT (AlAt)
Această enzimă se găsește cel mai adesea în concentrații crescute în hepatitele acute și cronice. Substanța este conținută în celulele hepatice, iar leziunile de organe prin sânge intră în vasele de sânge.
Cantitatea și concentrația în sânge în timpul unei boli virale se schimbă în mod constant, astfel că cercetarea este efectuată cel puțin o dată pe trimestru. ALT reflectă nu numai activitatea virusului hepatitei, ci și gradul de afectare cauzat de acesta în ficat. Nivelul ALT crește odată cu creșterea cantităților de substanțe toxice de origine hepatică și în prezența virusului.
Analiza cantitativă a AST-enzimei
Proteina este o componentă a celor mai importante organe ale omului: ficat, țesut nervos, țesut renal, schelet și mușchi. Enzima este implicată în construirea celui mai important mușchi - inima. Nivelul ridicat de AST la un pacient cu hepatită B poate semnala fibroza hepatică. O situație similară apare atunci când alcoolul, drogul sau orice alte daune toxice asupra celulelor hepatice.
Indicatorii de supraîncălzire reprezintă un semn al afectării hepatice la nivel celular. Atunci când se efectuează un diagnostic, este necesar să se țină seama de raportul dintre AST și ALT (coeficientul de ris). O creștere simultană a concentrației ambelor enzime este un semn al necrozei hepatice.
bilirubina
Substanța se formează în splină și ficat, ca urmare a defalcării hemoglobinei în țesuturile lor. Această componentă face parte din bilă. Există două fracții de proteine: bilirubina directă (legată) și bilirubina indirectă (liberă). Cu o creștere a bilirubinei legate de sânge, este logic să se suspecteze hepatita sau alte afecțiuni hepatice. Acest lucru este direct legat de citoliza celulelor hepatice.
Dacă crește cantitatea de bilirubină indirectă, atunci este posibil ca o leziune a țesutului parenchimat sau a sindromului Gilbert. Nivelul ridicat de bilirubină în funcție de rezultatele analizei poate fi o consecință a obstrucției conductelor biliare. Când nivelul bilirubinei este mai mare de 30 micromoli pe litru, pacientul prezintă o nuanță icterică a pielii, urina devine întunecată, iar albii ochilor își schimbă culoarea.
albumină
Sinteza acestei proteine are loc în ficat. Dacă cantitatea sa este redusă, aceasta indică o scădere a sintezei enzimelor din organism datorită apariției leziunilor severe ale celulelor hepatice.
Proteine totale
Dacă cantitatea de proteină totală devine semnificativ mai mică decât norma acceptată, atunci aceasta indică o încetinire a funcționării ficatului.
GGT (GGTP)
O enzimă utilizată în detectarea icterului obstructiv și a colecistitei. O creștere a nivelului de GGT este un semnal de afectare hepatică toxică. Poate fi provocată de alcoolismul cronic și de utilizarea necontrolată a medicamentelor. Proteina este deosebit de sensibilă la toxine și alcool, sub influența activității sale crește rapid. Menținerea unei concentrații ridicate de GGT în sânge pentru o lungă perioadă de timp vorbește despre leziuni hepatice severe.
creatininei
Este un produs al metabolismului proteic care apare în ficat. O scădere bruscă a nivelului este un semnal că organul încetinește.
Fraze de proteine
O scădere a nivelului fracțiunilor de proteine este un semn al patologiei hepatice.
Analiza de decodificare pentru hepatita B și valorile sunt normale
Diagnosticarea hepatitei B este un studiu cumulativ al indicatorilor. Numai analiza lor cuprinzătoare permite să se tragă concluzii despre infecția pacientului. Luați în considerare analiza de decodificare pentru hepatita B. Pentru comparație, rata substanțelor din sânge.
Depistarea testului de sânge pentru hepatita B
În lumea medicală, hepatita B este considerată una dintre cele mai periculoase din zilele noastre.
Acest virus este capabil să transmită prin contact cu sânge infectat - fie tunde în salon de unghii cuticula, instrumente medicale, în special instrumente stomatologi care nu au trecut de sterilizare este necesar, sau nu sa format un mod fiabil. În plus, virusul este transmis sexual.
Pentru a determina boala pentru hepatita B, pacientul trebuie să ia sânge pentru analiză.
După cum sa descris mai sus, virusul poate fi transmis sexual, prin gospodării, el aparține tipului de răspândire hematogen. Când este infectat, virusul intră în celulele hepatice, și de acolo începe să se răspândească în tot corpul. Virusul se răspândește prin sistemul circulator, este extrem de rezistent la temperatură și își păstrează capacitatea de a afecta celulele vii.
Ce teste de sânge aveți pentru hepatita B?
În cazul în care o persoană a prezentat primele simptome ale bolii hepatitei B, ar trebui să consultați imediat un medic și să vă încercați. Atunci când examinați un pacient, se iau sânge pentru al testa. Sângele este luat pe stomacul gol, ultima masă ar trebui să fie de cel puțin 8 ore în urmă.
Pentru a stabili prezența bolii în corpul uman, este necesar să se facă trei tipuri de teste de sânge:
- Reacția în lanț a polimerazei va arăta dacă există celule ADN HB V;
- Examinează prezența proteinei și a antigenului în sângele pacientului;
- Analizele privind prezența proteinelor vor indica o exacerbare a bolii.
Medicii deseori efectuează teste clinice pe mai mulți markeri pentru a stabili o imagine completă a bolii.
Teste imunologice pentru hepatita B
În această perioadă de timp, sunt fiabile testele imunologice pentru hepatita B. Testele au ca scop detectarea anticorpilor din sânge care se formează în ficat. În mod tipic, testarea pentru hepatita B implică decodificarea datelor colectate ale celulelor proteice individuale. În timpul testului, atenție la astfel de anticorpi:
- HBsAg - acestea pot fi găsite adesea la începutul infecției, chiar înainte ca boala să dăunească cunoștințelor. Un marker pozitiv indică faptul că persoana este infectată, deși au existat cazuri de rezultate pozitive la o persoană perfect sănătoasă. Rezultatele sunt negative în cazul în care nu există mai mult de 0,05 UI / ml în corpul pacientului, cu o concentrație mai mare de anticorpi - analiza este pozitivă.
- HBeAg - acești anticorpi se găsesc în aproape toți pacienții infectați. Cu o concentrație ridicată de anticorpi în sânge, boala devine o formă cronică. Un marker pozitiv înseamnă exacerbarea bolii. Prezența anticorpului anterior menționat în corpul pacientului arată că boala progresează și atinge un maxim.
- Anti-HBc are două tipuri de anticorpi - lgG și IgM. Prezența anticorpilor lgM în sânge sugerează că boala ajunge la cel mai înalt punct și poate să devină o formă cronică. Medicii trebuie să se asigure că acest anticorp nu crește numărul de sânge al acestuia. Din fericire, lgG este bun, înseamnă formarea imunității la virusul hepatitei B.
- Anti-HBe - anticorpul spune că boala se desfășoară în mod normal și se formează imunitatea la hepatita B în corpul pacientului.
- Anti-HBs - aceasta înseamnă că pacientul este sănătos, iar sistemul său imunitar este semnificativ mai puternic.
Detectarea ADN-ului HBV prin PCR
Pentru un studiu clinic care vă va ajuta să stabiliți dacă un pacient este infectat cu virusul hepatitei B, selectați metoda CRC. PCR reprezintă reacția în lanț a polimerazei, prin studierea acesteia puteți determina prezența unui virus în organism.
Rezultatele studiului ajută la determinarea prezenței unui agent patogen în celulele hepatice. Cu o procedură adecvată - rezultatele sunt considerate fiabile.
- Rezultat RPC de înaltă calitate - pozitiv sau negativ. Această procedură este obligatorie pentru toți pacienții cu infecție suspectată de hepatită B. În cazul în care virusul este în cantități mici în celulele ADN, acesta nu va fi detectat.
- RPC cantitative. Acest studiu va arăta nu numai prezența sau absența virusului, ci și stadiul infecției. Prin stabilirea stadiului bolii, puteți aloca cursul necesar de terapie medicală.
Printre altele, ROC ajută la prescrierea corectă a tratamentului și chiar ajustează doza de medicamente. Durata terapiei de tratament este, de asemenea, determinată, în unele cazuri poate fi terminată înainte, iar alți pacienți necesită un curs suplimentar de reabilitare.
Test de sânge biochimic pentru hepatita B
Pentru a face imaginea completă a infecției și evoluția bolii, este necesar să se efectueze un test de sânge biochimic. Acest studiu va ajuta la determinarea stării organelor interne ale pacientului și a modului în care acestea funcționează. Analizele oferă o imagine generală a proceselor metabolice din organism și, de asemenea, vorbește despre rata metabolică.
Analiza biochimică va indica, de asemenea, toate vitaminele și oligoelementele necesare pentru lupta normală a organismului împotriva bolii și pentru întărirea sistemului imunitar.
Testele hepatice B pot fi luate la orice clinică, privată sau publică. Atunci când un virus al hepatitei B este detectat în organismul uman, prin analize biochimice, există astfel de componente.
Analiza cantitativă a enzimei ALT (AlAt)
Această enzimă poate fi găsită în concentrații ridicate, cu dezvoltarea sau forma cronică a infecției cu virusul hepatitei B. Enzima este în celulele ficatului și, datorită fluxului sanguin, se răspândește prin toate vasele.
Concentrația substanței în organism se schimbă în mod constant din cauza a ceea ce ar trebui să se efectueze analize o dată pe trimestru. Datorită ALT, este posibil să se investigheze nu numai activitatea virusului, ci și să se evalueze amploarea efectului său negativ asupra ficatului și a organismului în ansamblu.
Analiza cantitativă a AST-enzimei
Proteina este una dintre cele mai importante substanțe din corpul uman, toate organele vitale sunt construite din acesta, inclusiv inima. Cu boala hepatitei B, o rată ridicată de AST indică fibroza hepatică.
Ratele mari indică distrugerea celulelor hepatice. Pentru diagnosticul final, trebuie luată în considerare raportul dintre AST și ALT. Cu o concentrație ridicată a ambelor enzime, se dezvoltă necroza hepatică.
bilirubina
Hemoglobina este defalcată în țesuturile ficatului și splinei, datorită cărora apare o substanță cum ar fi bilirubina. Această componentă este baza bilei. Bilirubina poate fi directă și indirectă. Cu o concentrație ridicată de bilirubină directă în sânge, este posibil să se stabilească infecția cu hepatita B sau cu alte afecțiuni hepatice.
O concentrație ridicată de bilirubină non-directă în sânge vorbește despre sindromul Gilbert. În plus, o concentrație ridicată de orice bilirubină semnalează o prudență slabă a canalelor biliare. Când este infectat cu hepatită, urina devine întunecată, fața și albii ochilor devin galbeni.
albumină
Albuminul este o proteină care este sintetizată în ficat. Cu niveluri scăzute ale acestei proteine în organism, celulele hepatice sunt deteriorate.
Proteine totale
Scăderea concentrației proteinei totale în corpul pacientului indică o încălcare a ficatului.
GGT (GGTP)
Această enzimă este utilizată de medici pentru a detecta icterul sau colecistita. Nivelurile ridicate de GGT indică afectarea toxică a celulelor hepatice, care poate apărea ca urmare a alcoolismului cronic sau otrăvirii medicamentoase. Proteina este extrem de sensibilă la alcool și toxine, iar atunci când acestea sunt excesive, activitatea proteinei crește.
creatininei
Metabolismul proteinelor apare în ficat, iar produsul acestui metabolism în medicină se numește creatinină. Când nivelul creatininei scade, ficatul încetinește.
Fraze de proteine
Un nivel scăzut de fracțiuni de proteine indică o încălcare clară a ficatului.
Analiza de decodificare pentru hepatita B și valorile sunt normale
Pentru a diagnostica un virus, este necesar să se efectueze o serie de studii diferite. Rezultatele tuturor testelor din complex vor da o imagine clară a bolii.
Esența analizei PCR pentru hepatita B și rezultatele acesteia
Hepatita virală B este tratată cu succes dacă este detectată în timp și numărul anticorpilor și antigenelor din sângele pacientului este corect determinat. Cu ajutorul unei imunoteste enzimatice pentru hepatită, este posibil să se detecteze prezența markerilor de virus, dar ei nu pot determina stadiul exact al procesului.
Pentru evaluarea cantitativă au fost utilizate diagnosticul PCR. Folosind testul, este posibil să numărați numărul de markeri, să prezicați evoluția bolii și probabilitatea de vindecare cu ajutorul medicamentelor antivirale.
Principalul avantaj al studiului este capacitatea de a detecta chiar și concentrațiile minime ale virusului, pentru a identifica agentul patogen în stadiul speciilor.
Diagnosticul hepatitei B
Virusul hepatitei B este extrem de contagios și rezistent la influențele externe. Acesta rămâne activ în sângele unui pacient timp de câteva săptămâni. Prin urmare, fiecare persoană este expusă riscului de infecție, chiar dacă se constată profilaxia.
Pentru a diagnostica boala prescrie următoarele studii:
Esența metodei PCR
Chimistul american K.Mullis a primit Premiul Nobel, iar metoda sa de diagnostic este încă utilizată.
Strădar al metodei PCR (reacția în lanț a polimerazei) este considerat om de știință din Norvegia H. Kleppe. El a început mai întâi să efectueze amplificarea (recuperarea) ADN-ului folosind un lanț scurt de ADN, adică un primer sintetic (un fel de copie).
Cu toate acestea, omul de știință nu și-a realizat ideea. Studii similare au fost făcute de chimistul american K. Mullis, care în 1993 a primit Premiul Nobel pentru invenția sa. De atunci, PCR a fost folosit pentru a stabili paternitatea, a diagnostica bolile genetice și a detecta virușii.
Esența reacției este că, cu ajutorul enzimelor, o anumită bucată de ADN este copiată. Puteți copia numai zona care corespunde parametrilor specificați și dacă este prezentată în eșantionul prezentat. Următoarele componente sunt utilizate pentru a începe reacția:
- Matrice ADN cu un site de copiat.
- Grunduri similare în structură cu ADN.
- Polimeraza, adică enzima care declanșează reacția. Ar trebui să fie termostabil, adică să reziste la temperaturi extreme.
- Soluție cu anumiți parametri, asigurând trecerea reacției.
Reacția se desfășoară în mai multe etape:
Pentru detectarea hepatitei B, se folosesc două tipuri de reacții: cantitative și calitative.
PCR cantitativ
Metoda cantitativă determină cantitatea de genom HBV
PCR cantitativ implică crearea simultană a unor copii ale fragmentelor de ADN și determinarea numărului de molecule. Măsurarea se efectuează după fiecare etapă, adică în timp real. Acest lucru este realizat prin utilizarea de sonde fluorescente, care sunt incluse într-un lanț de molecule și strălucire într-o anumită perioadă a studiului.
Această metodă este utilizată pentru detectarea fragmentelor ADN care sunt markeri ai virusului hepatitei. Folosind metoda cantitativă, este posibilă izolarea cu precizie a genotipului virusului. Cu alte cuvinte, se calculează numărul de copii ale genomului VHB pe numărul de celule pacient.
Analiza cantitativă oferă răspunsuri la următoarele întrebări:
- Cu ce intensitate progresează boala.
- Cât de eficient este tratamentul.
- S-a dezvoltat rezistența la medicament?
De asemenea, măsurarea cantitativă este necesară pentru diagnosticarea stadiului cronic al infecției. Dacă cantitatea de ADN este sub 100 buc / ml la nivelul normal al transaminazei, atunci persoana este un purtător al virusului.
În faza acută, cantitatea de anticorpi este mult mai mare. În terapia antivirală, o creștere a numărului de anticorpi indică dezvoltarea rezistenței la medicament, care este un semnal pentru reglarea tratamentului.
PCR de înaltă calitate
PCR de înaltă calitate oferă mai puține informații, dar poate elimina infecția.
PCR de înaltă calitate poate stabili numai prezența agentului patogen în sânge. Dacă acestea sunt absente, pacientul nu este infectat, dacă agentul patogen intră în sânge, rezultatul va fi pozitiv.
Cu toate acestea, cu ajutorul reacției calitative este imposibil să se clarifice genomul virusului, stadiul bolii. Prin urmare, pentru diagnosticul HBV au fost efectuate atât măsurători cantitative cât și calitative.
Pregătirea pentru anchetă
Sângele venos este necesar pentru analiza PCR. Acest lucru trebuie făcut dimineața pe un stomac gol.
Pacientul trebuie să se pregătească corespunzător pentru studiu:
- Timp de 10 ore pentru a refuza mâncarea, puteți bea doar apă curată.
- În ajunul opririi consumului de alcool, timp de 4 ore să nu fumezi.
- Înainte de examen trebuie să evitați stresul fizic și emoțional.
- Opriți utilizarea medicamentelor timp de 2 zile, dacă acest lucru nu este posibil, este necesar să informați tehnicianul de laborator. Unele medicamente au un efect asupra rezultatului final.
Interpretarea datelor
Într-o reacție cantitativă, indicatorii obținuți sunt evaluați în funcție de numărul de copii ADN.
Este ușor de interpretat datele de măsurare a calității. El dă un răspuns pozitiv sau negativ.
Într-o reacție cantitativă, este posibilă evaluarea indicatorilor obținuți în funcție de numărul de copii ADN. Unitatea de măsură este copii / ml.
Datele sunt decodate după cum urmează:
- Dacă cantitatea de ADN VHB este mai mică de 90, atunci infecția este absentă. Pacientul a dezvoltat imunitate post-vaccinare sau a fost vindecat de boală.
- Când numărul de copii 2x100 vorbește despre transportatorul virusului.
- Numărul 2x106 indică o etapă cronică a bolii.
- Cu ADN mai mare de 2x109, pacientul are o stadiu acut de hepatită.
Rezultate eronate
Avantajele metodei de diagnostic utilizând reacțiile polimerazei sunt după cum urmează:
- Detectarea directă a agenților patogeni. În schimb, ELISA furnizează informații privind prezența anticorpilor la virus.
- Specificitatea. Adică, este regiunea ADN care este prezentă în proba de biomaterial care este copiată.
- Hipersensibilitate. Metoda poate detecta chiar și fragmente de celule individuale.
- Diagnosticarea bolilor în stadiile acute și latente. Adică, este posibilă diagnosticarea bolii în stadiul manifestărilor preclinice.
Metoda are defecte care duc la rezultate false. Cea mai importantă neajuns este probabilitatea de contaminare a materialului. Principala sursă de contaminare sunt tuburile de testare slab procesate, mâinile de laborator, reactivii.
O parte a ADN-ului dintr-o reacție anterioară poate intra în sânge. Prin urmare, se impun cerințe sanitare sporite laboratoarelor: camere separate, tuburi din plastic, tratarea ultravioletă a laboratoarelor etc.
Rezultatele negative false pot fi datorate sensibilității reduse a reacției. Acest lucru se întâmplă în următoarele situații:
- pacientul ia medicamente, de exemplu, anticoagulante;
- persoana a suferit stres fizic înainte de analiză (joc sportiv, muncă grea);
- infecție a apărut recent.
Dacă pacientul are o probabilitate mare de infecție și rezultatul studiului este negativ, el trebuie să fie reexaminat.
Vezi și:
concluzie
Metoda reacției în lanț a polimerazei este principala și cea mai informativă pentru diagnosticarea VHB. Acesta permite nu numai stabilirea stării de purtătoare a infecției, ci și clarificarea stadiului bolii, evaluarea rezultatelor tratamentului.
Pentru un diagnostic mai precis, se utilizează o măsurătoare calitativă și cantitativă. Dezavantajele metodei includ probabilitatea de contaminare, sensibilitate redusă și un preț destul de ridicat.
Pentru ca rezultatele să fie cele mai fiabile, trebuie să se pregătească în mod corespunzător pentru studiu și să se desfășoare în clinică cu licență și bună reputație.