Hepatita B PCR

Disponibilitatea medicamentelor moderne anti-hepatită B (HBV) cu indicații clare pentru administrarea lor necesită o verificare precisă și rapidă a diagnosticului. Cu toate acestea, din cauza datelor clinice limitate în primele săptămâni ale bolii și a metodelor limitate de imunotest de analiză, rata de diagnostic scade.

Prezența markerilor anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe vă permite să confirmați HBV sau să stabiliți existența unei boli anterioare. Dar este posibilă determinarea prezenței particulelor virale active în sânge și numărarea numărului lor în momentul studiului prin PCR - un test cantitativ în timp real pentru detectarea hepatitei B. Metoda, în comparație cu metodele de diagnostic ELISA, rezolvă problemele de diagnosticare și permite prezicerea cursului bolii în timp ce primește medicamente antivirale.

Elementele de bază ale diagnosticului bolii

Diagnosticul hepatitei B se bazează pe evaluarea manifestărilor clinice, a testelor imunologice enzimatice și a metodelor instrumentale de cercetare. Boala apare în faza acută după perioada de incubație și, în funcție de doza de infecție și de eficacitatea tratamentului, intră într-o etapă cronică. Scopul principal al tratamentului este de a preveni cronizarea, adică eliminarea tuturor particulelor virale din sânge. Cursul clinic al bolii este un remediu fără viremia ulterioară.

Faptul de a elimina infecția trebuie dovedit printr-o metodă cantitativă de cercetare.

Deoarece orice imunoenzimatice calitativă a diagnostica VHB indirect, adică, nu arată prezența agentului patogen în mediul intern al organismului, ci reprezintă un răspuns imun la infecție, monitorizarea eficacității terapiei și de vindecare fapt devine trudnodokazuemymi. Prin urmare, pacientul cu hepatită B sau cu prezența criteriilor de diagnostic în favoarea acestuia trebuie să efectueze reacția în lanț a polimerazei pentru a cuantifica numărul de particule virale din sânge. Rata de diagnostic este lipsa copiilor ADN-ului infecției.

Descrierea metodei de diagnostic

Metoda extrem de sensibilă de diagnosticare PCR a hepatitei B aparține categoriei de studii biologice moleculare elaborate genetic. Prin aceasta este determinată de cantitatea de ADN viral din materialul biologic al pacientului și de viteza permisă. Conform rezultatelor obținute, se stabilește numărul de particule de virus per unitate de volum. Materialul pentru testul de diagnosticare este sângele venos al pacientului. Este de dorit un aport la stomacul gol datorită efectului posibil al serului chyl asupra rezultatelor studiului.

Rezultatele obținute trebuie furnizate medicului pentru interpretarea și determinarea unor tactici ulterioare. Decodificarea independentă nu reprezintă valoarea diagnosticului.

Semnificația rezultatului numărului de particule virale obținute prin metoda PCR depășește valoarea imunologică a enzimelor. Deoarece analiza în modul în timp real arată prezența agentului cauzator al bolii în sânge, conținutul său de informație este mai mare decât alții. Dacă ELISA indică doar prezența anticorpilor, care se observă la 4 săptămâni de la perioada de incubație și durează mai mult de 8 săptămâni după eliminarea virusului din sânge, atunci reacția în lanț a polimerazei confirmă în mod clar desfășurarea activă a bolii sau vindecarea ei, caracterizează dinamica terapiei prescrise.

Reacția în lanț a reacției polimerazice cu determinarea cantitativă a particulelor de patogen rezolvă întrebările de diagnostic în favoarea opririi tratamentului datorită recuperării sau terapiei continue din cauza lipsei de eficacitate. Metoda este cât mai specifică posibil pentru virusul HBV și se distinge printr-o eroare acceptabilă.

Indicatii si obiective de performanta

Analiza cantitativă a hepatitei B este cea mai fiabilă și vă permite să confirmați datele obținute prin metode ELISA. El este numit când:

1. obținerea unui rezultat pozitiv de diagnostic al testului ELISA;
2. tratarea unui pacient cu un diagnostic stabilit de leziuni hepatice virale;
3. în diagnosticul etiologiei mixte a hepatitei;
4. dacă este necesar, determină încărcarea virală la un pacient.

Deoarece metoda enzimatică de imunotestare este utilizată mai intens în practica unui specialist în bolile infecțioase, unii pacienți cu boală ușoară pot fi tratați fără a fi nevoie să numărați încărcătura virală. Dar PCR este în general considerat "standardul de aur" al diagnosticării în hepatologie, deoarece, datorită unicității rezultatului său, elimină o serie de probleme organizaționale. Prin urmare, direcția pacientului pentru analiza cantitativă are următoarele obiective:

• obținerea datelor privind numărul de particule virale din sângele pacientului;
• confirmarea cursului acut de hepatită și verificarea în timp util a bolilor cronice;
• detectarea constanta a purtatorilor de virus latenti cu teste pozitive ELISA, monitorizarea viremiei lor;
• hotărând asupra numirii tratamentului antiviral, combinării acestuia și încetării acestuia.

Scopul cel mai semnificativ al aplicării unui test cantitativ de PCR pentru detectarea HBV este identificarea posibilelor combinații de tratament. În cazurile de încărcare virală mare, rezultatul analizei oferă specialistului posibilitatea de a continua combinația de medicamente. În timpul terapiei, este ușor de determinat eficacitatea tratamentului farmacologic prescris pe baza rezultatelor PCR. Ghidat numai de datele metodelor de imunotestare, este imposibil să se determine în timp util de tratament și eficiența sa actuală. Prin urmare, un test cantitativ în timp real este o analiză necesară înainte de începerea tratamentului pentru hepatită acută, infecție latentă a virusului cu viremie ridicată și VHB cronic.

Interpretarea rezultatelor testelor PCR cantitative

Interpretarea rezultatelor testului cantitativ PCR trebuie să fie efectuată de către medicul curant al pacientului. Este necesar să se evalueze indicatorul de diagnosticare și să se determine tactica terapeutică.

Un analizor standard este capabil să producă un indicator cantitativ care să reflecte numărul de copii ale ADN-ului viral prezent în sângele venos studiat. Unități de măsură - copii / ml, UI / ml (copii pe mililitru, unități internaționale pe mililitru). Interpretarea rezultatelor este prezentată în tabel cu indicarea diferitelor unități de măsură.

Tipuri de PCR pentru hepatita B și interpretarea rezultatelor

Reacția în lanț a polimerazei este un tip de analiză a sângelui care poate detecta cu exactitate virusul hepatitei B. O caracteristică a metodei este că este capabilă să arate HBV în stadiile incipiente - la o lună după infecție, în timp ce un antigen specific este detectat la un pacient doar după 2 luni. PCR poate detecta nu numai un virus ADN normal, ci și tulpini mutante pe care nici o altă analiză nu le poate vedea.

Când se decodează PCR pentru hepatita B, rezultatele sunt comparate cu valorile standard. Pe baza acestor concluzii se fac concluzii cu privire la prezența bolii (rezultat pozitiv), concentrația virusului (activitatea) sau absența bolii (rezultat negativ). Prelucrarea datelor este de 2 săptămâni.

Tipuri de PCR pentru hepatita virală B

Există 2 tipuri de diagnostice care sunt prescrise pentru hepatita B. PCR de înaltă calitate permite, cu o acuratețe de 100%, să se spună dacă HBV este în sânge sau nu. Analiza PCR cantitativă arată activitatea virusului, adică cât de mult ADN de VHB este conținut în 1 ml de sânge.

PCR de înaltă calitate și interpretarea sa

Un test de sânge pentru hepatita B prin PCR poate detecta numai prezența fragmentelor ADN. Numit în cazul în care pacientul suspectează infecția cu VHB (HBV) sau când alte metode de diagnosticare, de exemplu, testele serologice nu dau un răspuns clar. Decodarea rezultatelor la efectuarea unei analize calitative este foarte simplă:

• rezultat negativ - fără virus;
• rezultat pozitiv - virus detectat.

Scopul PCR de înaltă calitate este de a confirma sau de a nega prezența virusului hepatitei B, precum și de a efectua un diagnostic precoce. Dacă se detectează HBV în decurs de 1-2 săptămâni după infectare, tratamentul va fi cât mai eficient posibil. Odată cu dezvoltarea activă a HBV timp de 2 luni și mai mult, boala devine cronică și nu poate fi complet vindecată.

În cazul în care PCR de înaltă calitate pentru hepatită este indicat de prezența unui virus, următorul pas este de a efectua un diagnostic cantitativ.

PCR cantitativ

În scopul tratamentului eficient sau evaluării rezultatelor tratamentului, simpla cunoaștere a faptului că pacientul are HBV nu este suficientă. Este necesar să se cuantifice valoarea ADN-ului virusului hepatitei B în 1 ml de sânge, adică încărcătura virală pe corp. Acest tip de PCR pentru hepatita B se efectuează în următoarele cazuri:

1. Înainte de a prescrie tratamentul.
2. Pentru a evalua eficacitatea terapiei.
3. Pentru a determina dezvoltarea rezistenței virusului la medicamentele luate.
4. Pentru a determina stadiul la care este localizată boala.

Unitatea de măsură pentru un virus este unitățile internaționale (UI / ml) sau numărul de copii ADN / ml, adică numărul de fragmente ADN pe 1 ml de sânge. Raportul dintre cele două unități depinde de sistemul de testare selectat și variază de la 2 la 7 copii / ml în 1 UI / ml. Dacă sistemul este necunoscut, atunci valoarea medie este folosită pentru conversie:

1 UI / ml = 5 copii / ml

Dacă analiza cantitativă se face imediat, rata marginală pentru diagnosticarea bolii este de 75 UI / ml. Când rezultatul este deasupra acestui indicator, se face diagnosticul de VHB, mai jos - HBV nu este detectat.

Tratamentul PCR cantitativ

La hepatita B, următoarele valori ale încărcăturii virale (viremie), copii / ml, sunt standardele PCR:

• 10 ^ 5 copii / ml. Atunci când, cu o activitate virală mare, există o creștere a nivelului de ALT mai frecvent de 2 ori în șase luni, apoi este prescrisă imediat terapia antivirală.

Pentru a afla cum se va comporta hepatita ADN în termeni de cronică, adică trecerea la forma cronică de la acută, se folosesc și rezultatele diagnosticării PCR:

• ADN HBV de 2 x 10 6 copii / ml înseamnă că este inevitabilă dobândirea formei cronice a bolii.

Pregătirea pentru anchetă

Pentru a determina prezența HBV prin PCR, sângele este luat dintr-o venă. Procedura se efectuează întotdeauna strict pe stomacul gol și cel mai bine este să ajungeți la laborator în dimineața când timpul natural de odihnă din alimente este de 8 ore. Pentru ca rezultatele examenului să fie corecte, este necesar să știți în avans cum să vă pregătiți pentru a merge corect la clinică. Pașii suplimentari sunt după cum urmează:

1. Refuzul de la alimente grase, fumatul, alcoolul și sportul timp de 12 ore înainte de procedură.
2. Se odihnește timp de 20 de minute imediat înainte de donarea de sânge.
3. Înainte de a începe procedura, asistenta medicală trebuie avertizată cu privire la medicamentele administrate.

Atenție! Dacă diagnosticul este efectuat la un copil sub 5 ani, cu jumătate de oră înainte de procedură, el ar trebui să bea 1 pahar de apă fiartă la fiecare 10 minute.

Rezumă

Până în prezent, diagnosticarea PCR pentru detectarea hepatitei B este metoda cea mai precisă. Metoda vă permite să vedeți formele ascunse și mutate ale bolii, să identificați boala în primele săptămâni după infecție și, în consecință, să efectuați un tratament eficient. În funcție de situație, se efectuează PCR calitativ sau cantitativ, care vizează detectarea VHB și stabilirea activității sale. Pentru a fi testat, trebuie să contactați un virolog, un specialist în boli infecțioase sau un hepatolog.

ADN-ul hepatitei B și PCR

Testele ADN și PCR ale virusului hepatitei B sunt cele mai sensibile teste care detectează urme ale ADN-ului molecular în ficat care identifică prezența virusului. Esența metodei constă în copierea multiplă a fragmentului ADN care aparține agentului cauzal al bolii.

Tipul de hepatită B de tip PCR este o reacție în lanț a polimerazei unui reactiv chimic extern cu materialul biologic investigat, care vizează identificarea moleculelor de ADN viral în sânge și indicatorii lor cantitativi pe unitate de volum. Analiza este atribuită în următoarele cazuri:

• dacă prezentați semne de hepatită B la un pacient;
• în timpul activităților de diagnosticare pentru hepatita mixtă;
• pentru a clarifica eficacitatea terapiei.

Pentru analiza PCR se colectează sânge venos. Înainte de studiu, trebuie să vă abțineți de la 8 ore.

Un rezultat normal atunci când se detectează ADN-ul într-un virus este considerat a fi "nedetectat". Aceasta înseamnă că virusul este absent în sânge sau conținutul său este nesemnificativ. Diagnosticul final poate fi efectuat numai de către un specialist pe baza unei analize biochimice și imunologice cuprinzătoare a plasmei sanguine pentru hepatita de tip B. Medicul prescrie un curs de terapie. Auto-medicamentul implică un risc prea mare.

Eșantionarea sanguină venoasă se face pentru analiza PCR.

Metoda PCR face posibilă detectarea ADN-ului agentului patogen chiar și cu prezența sa minimă în proba de sânge selectată. În plus, analiza permite detectarea antigenilor care au fost deja dezvoltați pentru virus. Fiecare dintre antigeni indică o etapă specifică a bolii:

• HBsAg - virusul este prezent în momentul de față.
• Anti-HBcor - agentul patogen este în prezent absent, dar nu a existat în trecut.
• Anti-HBs - în sânge există anticorpi împotriva hepatitei B (opțional - herpes, HIV, chlamydia, micoplasmoză, candidoză, tuberculoză, encefalită transmisă de căpușe și multe alte boli).

Patologia și semnele ei

Hepatita B sau HBV este o infecție virală care afectează celulele hepatice. Este periculos nu numai prin acțiunea directă asupra parenchimului organului, ceea ce slăbește funcția de barieră și imunitatea generală. Sunt posibile consecințe mai grave, cum ar fi ciroza hepatică și apariția neoplasmelor maligne.

HBV este transmis prin sângele unei persoane infectate cu hepatită, excrementele sale, prin contactul cu membranele mucoase, în special în timpul actului sexual, a leziunilor cutanate, prin seringi nesterile în timpul transfuziei sângelui sau în timpul operațiilor abdominale. Un nou-născut poate fi infectat de către mama lui bolnavă când atinge fisurile din sfarcurile sale.

Următoarele simptome sunt caracteristice hepatitei B:

Neobișnuită oboseală

• creșterea oboselii la sarcini mici;
• neobișnuită oboseală;
• greutate în hipocondrul drept;
• apetit redus, greață;
• stralucirea pielii, sclera ochilor;
• fecale luminoase;
• urină întunecată;
• durere la nivelul articulațiilor.

Perioada de incubație, după care aceste simptome încep să apară, este de la una la șase luni. Aceasta este perioada de acumulare a celulelor virale în sângele hepatic. Când concentrația lor atinge o masă critică, virusul se rupe prin membranele hepatocitelor și continuă să se înmulțească în interiorul celulelor. Ca urmare, celulele hepatice mor, se dezvoltă ciroză, care, în absența măsurilor terapeutice adecvate, determină ca pacientul să fie fatal. Un test de sânge în timp util pentru ADN-ul și ADN-ul hepatitic B ajută la evitarea celor negative.

Indicatiile pentru PCR sunt:

• testul ADN pozitiv confirmând diagnosticul de hepatită B;
• hepatita acută și cronică;
• hepatita mixtă;
• determinarea cantitativă a virusului în serul de sânge;
• dezvoltarea tacticii terapiei eficiente.

Pregătirea pentru analiză

Pregătirea pentru diagnosticare utilizând PCR este determinată de tipul de biomaterial. Deci, sângele și urina dau doar dimineața, pe stomacul gol. De asemenea, s-au luat frotiuri și zgârieturi din zona urogenitală. Singura restricție pentru femei este menstruația. Sexul este limitat pentru ambele sexe în ajunul cercetării.

Rezultatele PCR pot fi considerate de încredere numai dacă pacientul este pregătit corespunzător pentru procedură. Acest studiu implică următoarele condiții:

• plin de confort spiritual, absența oricărei emoții. Pentru a asigura că această analiză poate fi trecută chiar și acasă. Este necesar doar să apelați un medic cu echipamentul corespunzător;
• abținerea de la hrană, alcool, fumat, activitate fizică cu cel puțin 8-12 ore înainte de analiză, altfel datele de cercetare vor fi denaturate;
• 15-20 minute de relaxare completă înainte de colectarea sângelui;
• întreruperea medicamentelor (dacă acest lucru nu este posibil, laboratorul trebuie avertizat);
• copiii sub cinci ani pentru o jumătate de oră înainte de analiză ar trebui să se acorde apă fiartă pentru a bea în porții mici.

Cum este studiul

Analiza PCR se bazează pe principiile utilizate de biologia moleculară. Acestea constau în utilizarea de enzime speciale care scindează și replică părți din ADN și ARN ale agentului infecțios care se găsește în sânge. După această operație, probele obținute sunt identificate de baza de date disponibilă în laborator. În același timp, se detectează tipul de infecție și concentrația în sânge a agentului patogen.

Pentru studiu, se utilizează un amplificator - un termostat capabil să încălzească și să răcească tuburi cu biomaterial. Acest lucru este necesar pentru activarea proceselor de replicare. Precizia analizei depinde de acuratețea parametrilor de temperatură.

Rezultatele decodificării

Un rezultat pozitiv pentru pacient este concluzia de laborator "nedetectată". Aceasta înseamnă absența ADN-ului hepatitei B. În termeni numerici, aceasta este de aproximativ 120 UI / ml, sau 200 de copii pe aceeași unitate de volum de sânge. Această valoare este norma. Cerința pentru materialul biologic este că nu ar trebui să fie contaminată.

Decodificarea rezultatelor altor analize permite efectuarea următoarelor diagnoze:

• Concentrația ADN-ului hepatitei B în sânge este mai mare de 200 de copii, dar sub nivelul critic. Patologia severă este absentă.
• Viremia în formă ușoară, până la 500 copii pe ml. Alegerea tratamentului depinde de indicatorii biopsiei hepatice și de gradul de deteriorare a funcțiilor sale.
• Creșterea concentrației virale (mai mult de 500 de copii / ml). Procesul inflamator în faza activă și necesită terapie intensivă antivirală.
• Încărcătura virală maximă (peste 800 de exemplare pe ml). Măsurile terapeutice sunt dezvoltate pe baza stării pacientului și sunt destinate în întregime îmbunătățirii maxime posibile.

Pentru pacient, un rezultat bun este concluzia "nu a fost detectat"

Determinarea indicatorilor cantitativi ai conținutului ADN al hepatitei B în timpul PCR este baza pentru alegerea cursului terapeutic. După trei sau șase luni, testele sunt efectuate din nou pentru a testa eficacitatea terapiei antivirale.

Caracteristica reacției în lanț a polimerazei

În metoda PCR se folosesc două abordări pentru determinarea ADN care aparține virusului: calitativ și cantitativ.

O abordare calitativă confirmă sau neagă prezența hepatitei B. PCR este prescris la cererea unui pacient care suspectează că este infectat cu infecție cu VHB sau în cazul în care diagnosticul precoce nu dă rezultate clare în nici un alt mod.

Dacă virusul hepatitei B poate fi detectat nu mai târziu de două săptămâni de la intrarea în organism, prognosticul pozitiv pentru tratament este cel mai probabil. În viitor, boala va începe să progreseze. După aproximativ două luni, ea va intra într-o fază cronică. Un remediu complet în acest caz va deveni imposibil.

O abordare cantitativă a PCR este utilizată numai atunci când este detectat un virus. El evaluează:

• încărcătura virală specifică pe ficat;
• intensitatea progresiei bolii;
• rezistența la medicamente antivirale;
• eficiența tratamentului.

Acești indicatori au o importanță practică directă. Indicator în special cantitativ al ADN. Prognosticul în faza acută a hepatitei B depinde de concentrația virusului în fluxul sanguin al ficatului. Astfel, o concentrație scăzută de celule virale exclude aproape complet tranziția hepatitei acute la cronică. Astfel de pacienți nu reprezintă un pericol pentru ceilalți. Încărcătura virală mare contribuie la cronizarea procesului patologic și a posibilității de infectare cu hepatită la persoanele care sunt în contact cu pacientul.

Există, de asemenea, o legătură între concentrația de gene virale în sânge și degenerarea cirotică a ficatului și apariția cancerului parenchimului său.

Testele PCR ajută medicul să detecteze purtătorii de virusuri.

Eficacitatea terapiei antivirale este determinată de gradul de scădere a concentrației ADN-ului hepatitic B în circulația hepatică. Un rezultat suficient este reducerea încărcăturii virale cu 1-2 ori cu tratament intensiv de la trei luni la șase luni. Ratele mai mici necesită o schimbare în tratament.

Prognosticul dezvoltării patologiei și numirea terapiei adecvate provine din:

• volumul cantitativ al ADN-ului virusului hepatic în serul de sânge;
• (de exemplu, nivelul leucocitelor din sânge și conținutul de bilirubină acolo);
• markeri de infecție virale;
• rezultatele biopsiei hepatice.

PCR cu scop general

Analizele cu ajutorul reacției în lanț a polimerazei ajută medicul:

• detectarea purtătorilor de virus;
• prezice dezvoltarea hepatitei tip B;
• asigurați-vă că boala devine cronică;
• monitorizează activitatea virusului în toate fazele de dezvoltare;
• identificarea tulpinilor mutante și ascunse de hepatită B;
• să evalueze eficacitatea tratamentului virusului atunci când alege o anumită tactică și să o schimbe în caz de succes insuficient.

Avantajele metodei

Spre deosebire de alte teste care sunt folosite pentru a diagnostica hepatita B, PCR are:

Analiza PCR este extrem de sensibilă.

1. Sensibilitate excepțională. Tehnica permite cercetătorului să detecteze agentul cauzal al bolii, chiar dacă concentrația moleculelor de ADN din sânge este minimă. Acest lucru vă permite să luați măsuri preventive și curative într-un stadiu incipient al bolii, atunci când aparent nu este încă exprimată prin simptome.
2. O acoperire largă a oportunităților. PCR poate detecta nu numai agentul cauzator al hepatitei virale B, ci și o serie de alte patologii.
3. Universalitatea abordărilor. Biomaterialul pentru cercetare poate fi sânge, saliva, celule mucoase și piele.
4. Eficiență. Concluzia va fi gata exact la o zi după prelevarea de probe de sânge (rezultatul analizei însăși este obținut nu mai târziu de 7 ore).
5. Fiabilitate. În toate condițiile metodei PCR, nu se arată niciodată date false.
6. Studiul accesibilității prețurilor. La costuri, PCR este doar puțin mai mare decât testele obișnuite care folosesc sângele ca biomaterial.

Singurul cost al cercetării este complexitatea sa tehnologică. Pentru implementarea de înaltă calitate a PCR necesită un biomaterial extrem de curat, echipament modern și personal bine pregătit. Este de preferat să se aplice pentru diagnosticarea cu ajutorul acestei metode la laboratoarele specializate.

Hepatita virală B se referă la boli, a căror vindecare completă este posibilă numai în primele etape de dezvoltare. Identificarea bolii în această fază ajută la diagnosticarea hipersensibilă prin PCR. Primele simptome care cauzează suspiciunea de afectare hepatică de către un virus ar trebui să fie un motiv pentru a consulta un specialist. Dacă diagnosticul este confirmat, tratamentul trebuie să înceapă imediat. Acest lucru va îmbunătăți prognoza și va spori probabilitatea de a susține ficatul într-o stare sănătoasă timp de mulți ani.

Depistarea testului de sânge pentru hepatita B

Hepatita B este una dintre cele mai periculoase boli ale timpurilor noastre.

Este cauzată de un virus care intră în organism atunci când sângele intră în contact cu materialul biologic infectat, inclusiv cu cele care rămân în accesorii pentru manichiură, instrumente medicale, mașini de tatuat care nu au fost dezinfectate în mod corespunzător. Virusul poate fi, de asemenea, transmis prin contact sexual.

Hepatita B este analizată pentru a diagnostica boala luând sângele pacientului.

Infecția are loc prin căi sexuale și interne, tipul de răspândire este hematogen (prin sânge). Când este infectat, virusul intră în hepatocite (celule hepatice), care se produce în viitor. Prin sânge, boala se răspândește rapid în tot corpul. Virusul B (HBV) se caracterizează prin rezistență ridicată la efectele temperaturii și acidului și își poate menține proprietățile dăunătoare timp de șase luni.

Ce teste de sânge aveți pentru hepatita B?

Dacă hepatita B prezintă primele simptome, este necesară trecerea testelor înainte de începerea tratamentului și a tratamentului. Un test de sânge este o metodă sigură de instalare a infecției cu hepatită. Realizat în laborator. Materialul de test hepatitic B se administrează pe stomacul gol: un minim de 8 ore trebuie să treacă de la ultima masă.

Pentru a detecta virusul hepatitei B în sânge, se folosesc teste de trei tipuri care caracterizează prezența virusului în sânge:

• analiza prezenței ADN VHB în material prin studierea reacției în lanț a polimerazei;
• studiu calitativ al prezenței proteinei IgG anti-HBc și a antigenului HBsAg (găsit la cei sănătoși, infectați și bolnavi);

• analiza pentru detectarea proteinelor HBeAg și IgM anti-HBc (caracterizarea agravării bolii).

Pentru completare, se recomandă efectuarea simultană a cercetărilor pe mai multe marcatori.

Teste imunologice pentru hepatita B

Cele mai frecvente teste pentru hepatita B sunt imunologice. Esența lor este de a detecta anticorpi în sângele produs de corp sau de ficat. Probele sunt calitative și cantitative. Testele și transcriptele hepatitei B conțin, de obicei, informații despre câteva proteine ​​caracteristice. În timpul testului, se testează următorii anticorpi:

Se întâmplă în stadiile incipiente ale infecției înainte de debutul semnelor clinice.

Un marker pozitiv indică prezența unui virus, dar se găsește și la oameni complet sănătoși. Dacă în sânge există mai puțin de 0,05 UI / ml, rezultatul este considerat negativ. Dacă concentrația anticorpului este mai mare, analiza este considerată pozitivă.

Se găsește în aproape fiecare pacient infectat. Menținerea indicatorilor la un nivel ridicat poate indica o tranziție a bolii într-o formă cronică a cursului. Un marker pozitiv indică prezența bolii în perioada de exacerbare, recuperare prelungită. HBeAg este un semn extrem de prost. Pacientul este foarte contagios. În mod normal, proteina nu este detectată în sânge.

Există două tipuri de anticorpi anti-HBc: IgG și IgM. Prezența IgM în sânge este un semn al cursului formei acute, infecția ridicată a pacientului și posibilitatea bolii pererohoda în forma cronică. În mod normal, prezența IgM nu este permisă. IgG este un indicator favorabil. Marcatorul indică imunitatea formată de organism împotriva hepatitei B.

Dacă un marker este detectat în sânge, se poate trage o concluzie privind evoluția favorabilă a bolii și formarea imunității protectoare la pacient.

• Anti-HBs.

Marcatorul semnalează recuperarea și formarea imunității.

Detectarea ADN-ului HBV prin PCR

Pentru examinarea în laborator și detectarea prezenței unui diagnostic de hepatită B în sânge, se utilizează metoda PCR. Modul în care este considerată reacția în lanț a polimerazei este cea mai actualizată în domeniul detectării bolii.

Decodificarea finală arată dacă există urme de prezență genetică a agentului patogen în celulele hepatice.

Dacă toate principiile sunt urmărite în timpul cercetării, rezultatul este absolut corect. Metoda este utilizată pentru diagnostic, utilizată în procesul de tratament și în terapia antivirală.

1. Un PCR de înaltă calitate pe total are numai două semnificații: "detectat" și "nu este detectat". Procedura se efectuează pentru fiecare pacient cu hepatită suspectată. Cu o sensibilitate medie a testului PCR în intervalul de la 10 la 500 UI / ml, cu niveluri scăzute de ADN-ul virusului în sânge, nu se detectează nici un material genetic.
2. PCR cantitativ. În contrast cu calitativul, indică nu numai hepatita B. Analiza cantitativă indică cât de departe normele unei persoane sănătoase sunt departe de indicatorii pacientului în termeni numerici. Metoda permite evaluarea stadiului bolii și prescrierea tratamentului. Sensibilitatea testului PCR în urmări cantitative este mai mare decât în ​​metoda calitativă. Baza este numărul de ADN detectat, care este exprimat în copii pe mililitru sau UI / ml.

În plus, PCR cantitativ oferă o imagine asupra efectelor tratamentului și corectitudinii terapiei alese. În funcție de cantitatea de material gena virale, se poate decide să se scurteze perioada de tratament sau, dimpotrivă, să se prelungească și să se consolideze.

Test de sânge biochimic pentru hepatita B

Metoda de analiză biochimică este necesară pentru a obține o imagine clinică completă a evoluției bolii. Această metodă de diagnosticare oferă o înțelegere a activității organelor interne (ficat, rinichi, vezică biliară, tiroidă și altele). Decodificarea oferă o înțelegere a ratei metabolice în organism, a posibilelor patologii ale metabolismului. Indicatorii detaliați vor indica o lipsă de vitamine, macronutrienți și minerale necesare pentru sănătatea și viața umană.

Puteți efectua un test pentru hepatită la orice alt centru de diagnosticare (Invitro, Gemotest, etc.). Testul biochimic de sânge pentru detectarea hepatitei B include următoarele componente.

Analiza cantitativă a enzimei ALT (AlAt)

Această enzimă se găsește cel mai adesea în concentrații crescute în hepatitele acute și cronice. Substanța este conținută în celulele hepatice, iar leziunile de organe prin sânge intră în vasele de sânge.

Cantitatea și concentrația în sânge în timpul unei boli virale se schimbă în mod constant, astfel că cercetarea este efectuată cel puțin o dată pe trimestru. ALT reflectă nu numai activitatea virusului hepatitei, ci și gradul de afectare cauzat de acesta în ficat. Nivelul ALT crește odată cu creșterea cantităților de substanțe toxice de origine hepatică și în prezența virusului.

Analiza cantitativă a AST-enzimei

Proteina este o componentă a celor mai importante organe ale omului: ficat, țesut nervos, țesut renal, schelet și mușchi. Enzima este implicată în construirea celui mai important mușchi - inima. Nivelul ridicat de AST la un pacient cu hepatită B poate semnala fibroza hepatică. O situație similară apare atunci când alcoolul, drogul sau orice alte daune toxice asupra celulelor hepatice.

Indicatorii de supraîncălzire reprezintă un semn al afectării hepatice la nivel celular. Atunci când se efectuează un diagnostic, este necesar să se țină seama de raportul dintre AST și ALT (coeficientul de ris). O creștere simultană a concentrației ambelor enzime este un semn al necrozei hepatice.

bilirubina

Substanța se formează în splină și ficat, ca urmare a defalcării hemoglobinei în țesuturile lor. Această componentă face parte din bilă. Există două fracții de proteine: bilirubina directă (legată) și bilirubina indirectă (liberă). Cu o creștere a bilirubinei legate de sânge, este logic să se suspecteze hepatita sau alte afecțiuni hepatice. Acest lucru este direct legat de citoliza celulelor hepatice.

Dacă crește cantitatea de bilirubină indirectă, atunci este posibil ca o leziune a țesutului parenchimat sau a sindromului Gilbert. Nivelul ridicat de bilirubină în funcție de rezultatele analizei poate fi o consecință a obstrucției conductelor biliare. Când nivelul bilirubinei este mai mare de 30 micromoli pe litru, pacientul prezintă o nuanță icterică a pielii, urina devine întunecată, iar albii ochilor își schimbă culoarea.

albumină

Sinteza acestei proteine ​​are loc în ficat. Dacă cantitatea sa este redusă, aceasta indică o scădere a sintezei enzimelor din organism datorită apariției leziunilor severe ale celulelor hepatice.

Proteine ​​totale

Dacă cantitatea de proteină totală devine semnificativ mai mică decât norma acceptată, atunci aceasta indică o încetinire a funcționării ficatului.

GGT (GGTP)

O enzimă utilizată în detectarea icterului obstructiv și a colecistitei. O creștere a nivelului de GGT este un semnal de afectare hepatică toxică. Poate fi provocată de alcoolismul cronic și de utilizarea necontrolată a medicamentelor. Proteina este deosebit de sensibilă la toxine și alcool, sub influența activității sale crește rapid. Menținerea unei concentrații ridicate de GGT în sânge pentru o lungă perioadă de timp vorbește despre leziuni hepatice severe.

creatininei

Este un produs al metabolismului proteic care apare în ficat. O scădere bruscă a nivelului este un semnal că organul încetinește.

Fraze de proteine

O scădere a nivelului fracțiunilor de proteine ​​este un semn al patologiei hepatice.

Analiza de decodificare pentru hepatita B și valorile sunt normale

Diagnosticarea hepatitei B este un studiu cumulativ al indicatorilor. Numai analiza lor cuprinzătoare permite să se tragă concluzii despre infecția pacientului. Luați în considerare analiza de decodificare pentru hepatita B. Pentru comparație, rata substanțelor din sânge.

Analiza PCR pentru hepatita B

Virusul ADN al familiei Hepadnaviridae este agentul direct cauzator al hepatitei B. Analiza PCR a hepatitei B permite detectarea prezenței unui virus ADN infectat în sângele pacientului. Rezultatul unui tip pozitiv pe ADN VHB demonstrează prezența infecției în sângele pacientului. Trebuie remarcat faptul că diagnosticul prin utilizarea analizei PCR permite nu numai determinarea prezenței infecției, ci și încărcarea și activitatea cantitativă. Această metodă este fiabilă, precisă și reproductibilă. Cuantificarea ADN-ului HBV cu qPCR poate fi utilizată pentru a monitoriza eficacitatea terapiei cu VHB și a fi utilă pentru înțelegerea istoricului natural al VHB într-o zonă endemică.

Procesul de infectare cu hepatita B are loc prin contactul domestic sau sexual - prin contact direct cu sange infectat. După infecție, virusul intră în celulele hepatice, în care își continuă reproducerea activă. Prin intermediul fluxului sanguin, celulele patogene se răspândesc în tot corpul. Este de remarcat faptul că celulele hepatitei B sunt foarte rezistente la acid și la temperaturi ridicate. El își poate menține proprietățile dăunătoare timp de șase luni.

Tipuri de PCR pentru hepatita B

Până în prezent, există două tipuri de diagnostice care sunt prescrise dacă suspectați prezența virusului hepatitei B: PCR calitativ (vă permite să determinați cu precizie de 100% prezența virusului în sânge) și PCR cantitative (vă permite să determinați gradul de activitate a virusului).

PCR de înaltă calitate este prescris în cazul în care există o suspiciune de infecție cu VHB sau dacă alte metode de diagnosticare nu au dat rezultate clare. Acest tip de analiză PCR este extrem de ușor de descifrat: negativ (fără virus detectat în sânge), pozitiv (detectat în sânge). Sarcina principală a analizei calitative este de a determina prezența celulelor infectate în stadiile incipiente ale bolii. Dacă virusul a fost diagnosticat la două săptămâni după presupusa infecție, eficacitatea tratamentului va fi mult mai mare. Dacă virusul din sânge este de aproximativ două luni, boala devine cronică, prin urmare, nu poate fi complet vindecată.

Dacă un diagnostic calitativ confirmă prezența VHB în sânge, medicul prescrie o analiză cantitativă.

Analiza cantitativă permite determinarea activității de dezvoltare a virusului în corpul pacientului. Acest tip de analiză PCR este atribuită:

• pentru a determina stadiul bolii;
• pentru a monitoriza eficacitatea terapiei aplicate;
• pentru a determina nivelul de rezistență al virusului la un anumit medicament;
• pentru selecția drogurilor.

Indicatorii cantitativi ai virusului din sânge sunt măsurați în UI pe mililitru sau ADN pe mililitru.

Dacă medicul prescrie imediat un diagnostic cantitativ, fără a verifica calitatea, atunci rata este de 75 UI pe mililitru. Dacă sunt detectate mai puține unități internaționale, rezultatul este că HBV nu este detectat atunci când cifrele sunt peste normal, prezența hepatitei virale B este diagnosticată.

Interpretarea diagnosticului cantitativ

Următorii indicatori (în copii / mililitru) sunt considerați a fi norma CRP la hepatita B: mai puțin de 10 3 - virus inactiv; de la 10 4 la 10 5 - virusul este de obicei inactiv; 10 6 - virus activ; 10 7 - un virus într-o etapă înaltă de activitate.

Pe baza indicatorilor cantitativi, se poate determina cu acuratețe 100% forma bolii (purtător, acut sau cronic), reacția virusului la tratament, necesitatea unor diagnostice suplimentare.

Forma cronică de hepatită B se stabilește dacă activitatea virusului este de 10 5 copii pe mililitru. Un transportator este diagnosticat dacă scorurile sunt sub 10 5 copii pe mililitru.

În timpul perioadei de tratament, este necesară o repetare periodică (o dată la trei luni) a diagnosticării cantitative pentru a examina în timp perioada în care virusul dezvoltă imunitatea la medicamentele utilizate și modifică metoda. Dacă toate studiile au fost efectuate corect și un tratament eficient a fost selectat, o analiză repetată (după trei zile de tratament) va arăta o scădere a activității celulelor patogene cu cel puțin optzeci și cinci procente.

O biopsie hepatică se efectuează numai în cazul în care șase luni de tratament au arătat că nivelurile de ALT sunt de două ori mai mari decât cele normale, iar diagnosticul PCR arată rate mai mici de 10 5 copii pe mililitru de sânge.

Pregătirea pentru anchetă

Sângele venos este necesar pentru analiză. Pentru a obține cele mai precise rezultate este necesar să se pregătească pentru procedură: să refuze să ia alimente cu cel puțin opt ore înainte de colectarea sângelui; timp de două zile pentru a refuza tratamentul cu medicamente (este imperativ să-i avertizezi pe medic să ia medicamentele); trebuie să petreceți douăzeci de minute în modul de odihnă înainte de a dona sânge; Cu 12 ore înainte de procedură, renunțați la exerciții sportive, la băuturi alcoolice, la fumat și la alimente grase.

Este important: dacă diagnosticul este necesar pentru un copil cu vârsta sub cinci luni, atunci trebuie să dea un pahar de apă fiartă la fiecare zece minute cu șaizeci de minute înainte de procedura de colectare a sângelui.

Rezumă

Analiza PCR pentru hepatita B astăzi este metoda cea mai exactă pentru diagnosticarea unui virus. Metoda permite determinarea formelor mutagene și ascunse ale bolii, pentru a diagnostica boala în primele zile de infecție, prin urmare, pentru a alege cel mai eficient tratament. Asistentul de laborator compară rezultatele analizei cu norma și apoi le aduce la concluzie. Datele sunt procesate în termen de două săptămâni. Pentru a obține o sesizare pentru analiza PCR, este necesar să contactați un hepatolog, un specialist în boli infecțioase sau un virolog. Este important să rețineți că, cu cât ajungeți mai devreme la medic, cu atât mai rapid vor fi obținute rezultatele, cu atât mai eficientă va fi tratamentul.

Esența analizei PCR pentru hepatita B și rezultatele acesteia

Hepatita virală B este tratată cu succes dacă este detectată în timp și numărul anticorpilor și antigenelor din sângele pacientului este corect determinat. Cu ajutorul unei imunoteste enzimatice pentru hepatită, este posibil să se detecteze prezența markerilor de virus, dar ei nu pot determina stadiul exact al procesului.

Pentru evaluarea cantitativă au fost utilizate diagnosticul PCR. Folosind testul, este posibil să numărați numărul de markeri, să prezicați evoluția bolii și probabilitatea de vindecare cu ajutorul medicamentelor antivirale.

Principalul avantaj al studiului este capacitatea de a detecta chiar și concentrațiile minime ale virusului, pentru a identifica agentul patogen în stadiul speciilor.

Diagnosticul hepatitei B

Virusul hepatitei B este extrem de contagios și rezistent la influențele externe. Acesta rămâne activ în sângele unui pacient timp de câteva săptămâni. Prin urmare, fiecare persoană este expusă riscului de infecție, chiar dacă se constată profilaxia.

Pentru a diagnostica boala prescrie următoarele studii:

Esența metodei PCR

Chimistul american K.Mullis a primit Premiul Nobel, iar metoda sa de diagnostic este încă utilizată.

Strădar al metodei PCR (reacția în lanț a polimerazei) este considerat om de știință din Norvegia H. Kleppe. El a început mai întâi să efectueze amplificarea (recuperarea) ADN-ului folosind un lanț scurt de ADN, adică un primer sintetic (un fel de copie).

Cu toate acestea, omul de știință nu și-a realizat ideea. Studii similare au fost făcute de chimistul american K. Mullis, care în 1993 a primit Premiul Nobel pentru invenția sa. De atunci, PCR a fost folosit pentru a stabili paternitatea, a diagnostica bolile genetice și a detecta virușii.

Esența reacției este că, cu ajutorul enzimelor, o anumită bucată de ADN este copiată. Puteți copia numai zona care corespunde parametrilor specificați și dacă este prezentată în eșantionul prezentat. Următoarele componente sunt utilizate pentru a începe reacția:

1. Matrice ADN cu un site de copiat.
2. Grunduri similare în structură cu ADN.
3. Polimeraza, adică enzima care declanșează reacția. Ar trebui să fie termostabil, adică să reziste la temperaturi extreme.
4. Soluție cu anumiți parametri, asigurând trecerea reacției.

Reacția se desfășoară în mai multe etape:

Pentru detectarea hepatitei B, se folosesc două tipuri de reacții: cantitative și calitative.

PCR cantitativ

Metoda cantitativă determină cantitatea de genom HBV

PCR cantitativ implică crearea simultană a unor copii ale fragmentelor de ADN și determinarea numărului de molecule. Măsurarea se efectuează după fiecare etapă, adică în timp real. Acest lucru este realizat prin utilizarea de sonde fluorescente, care sunt incluse într-un lanț de molecule și strălucire într-o anumită perioadă a studiului.

Această metodă este utilizată pentru detectarea fragmentelor ADN care sunt markeri ai virusului hepatitei. Folosind metoda cantitativă, este posibilă izolarea cu precizie a genotipului virusului. Cu alte cuvinte, se calculează numărul de copii ale genomului VHB pe numărul de celule pacient.

Analiza cantitativă oferă răspunsuri la următoarele întrebări:

1. Cu ce ​​intensitate progresează boala.
2. Cât de eficient este tratamentul.
3. S-a dezvoltat rezistența la medicament?

De asemenea, măsurarea cantitativă este necesară pentru diagnosticarea stadiului cronic al infecției. Dacă cantitatea de ADN este sub 100 buc / ml la nivelul normal al transaminazei, atunci persoana este un purtător al virusului.

În faza acută, cantitatea de anticorpi este mult mai mare. În terapia antivirală, o creștere a numărului de anticorpi indică dezvoltarea rezistenței la medicament, care este un semnal pentru reglarea tratamentului.

PCR de înaltă calitate

PCR de înaltă calitate oferă mai puține informații, dar poate elimina infecția.

PCR de înaltă calitate poate stabili numai prezența agentului patogen în sânge. Dacă acestea sunt absente, pacientul nu este infectat, dacă agentul patogen intră în sânge, rezultatul va fi pozitiv.

Cu toate acestea, cu ajutorul reacției calitative este imposibil să se clarifice genomul virusului, stadiul bolii. Prin urmare, pentru diagnosticul HBV au fost efectuate atât măsurători cantitative cât și calitative.

Pregătirea pentru anchetă

Sângele venos este necesar pentru analiza PCR. Acest lucru trebuie făcut dimineața pe un stomac gol.

Pacientul trebuie să se pregătească corespunzător pentru studiu:

1. Timp de 10 ore pentru a refuza mâncarea, puteți bea doar apă curată.
2. În ajunul opririi consumului de alcool, timp de 4 ore să nu fumezi.
3. Înainte de examen trebuie să evitați stresul fizic și emoțional.
4. Opriți utilizarea medicamentelor timp de 2 zile, dacă acest lucru nu este posibil, este necesar să informați tehnicianul de laborator. Unele medicamente au un efect asupra rezultatului final.

Interpretarea datelor

Într-o reacție cantitativă, indicatorii obținuți sunt evaluați în funcție de numărul de copii ADN.

Este ușor de interpretat datele de măsurare a calității. El dă un răspuns pozitiv sau negativ.

Într-o reacție cantitativă, este posibilă evaluarea indicatorilor obținuți în funcție de numărul de copii ADN. Unitatea de măsură este copii / ml.

Datele sunt decodate după cum urmează:

1. Dacă cantitatea de ADN VHB este mai mică de 90, atunci infecția este absentă. Pacientul a dezvoltat imunitate post-vaccinare sau a fost vindecat de boală.
2. Când numărul de copii 2x100 vorbește despre transportatorul virusului.
3. Numărul 2x106 indică o etapă cronică a bolii.
4. Cu ADN mai mare de 2x109, pacientul are o stadiu acut de hepatită.

Rezultate eronate

Avantajele metodei de diagnostic utilizând reacțiile polimerazei sunt după cum urmează:

1. Detectarea directă a agenților patogeni. În schimb, ELISA furnizează informații privind prezența anticorpilor la virus.
2. Specificitatea. Adică, este regiunea ADN care este prezentă în proba de biomaterial care este copiată.
3. Hipersensibilitate. Metoda poate detecta chiar și fragmente de celule individuale.
4. Diagnosticarea bolilor în stadiile acute și latente. Adică, este posibilă diagnosticarea bolii în stadiul manifestărilor preclinice.

Metoda are defecte care duc la rezultate false. Cea mai importantă neajuns este probabilitatea de contaminare a materialului. Principala sursă de contaminare sunt tuburile de testare slab procesate, mâinile de laborator, reactivii.

O parte a ADN-ului dintr-o reacție anterioară poate intra în sânge. Prin urmare, se impun cerințe sanitare sporite laboratoarelor: camere separate, tuburi din plastic, tratarea ultravioletă a laboratoarelor etc.

Rezultatele negative false pot fi datorate sensibilității reduse a reacției. Acest lucru se întâmplă în următoarele situații:

• pacientul ia medicamente, de exemplu, anticoagulante;
• persoana a suferit stres fizic înainte de analiză (joc sportiv, muncă grea);
• infecție a apărut recent.

Dacă pacientul are o probabilitate mare de infecție și rezultatul studiului este negativ, el trebuie să fie reexaminat.

Vezi și:

concluzie

Metoda reacției în lanț a polimerazei este principala și cea mai informativă pentru diagnosticarea VHB. Acesta permite nu numai stabilirea stării de purtătoare a infecției, ci și clarificarea stadiului bolii, evaluarea rezultatelor tratamentului.

Pentru un diagnostic mai precis, se utilizează o măsurătoare calitativă și cantitativă. Dezavantajele metodei includ probabilitatea de contaminare, sensibilitate redusă și un preț destul de ridicat.

Pentru ca rezultatele să fie cele mai fiabile, trebuie să se pregătească în mod corespunzător pentru studiu și să se desfășoare în clinică cu licență și bună reputație.

Studiile privind virusul hepatitei B (ELISA și PCR)

Antigenul virusului hepatitei B (HBsAg)

Antigenul de suprafață al hepatitei B din ser este în mod normal absent.
Detectarea antigenului de suprafață al hepatitei B (HBsAg) în ser confirmă o infecție acută sau cronică cu virusul hepatitei B.

În cazul bolilor acute, HBsAg este detectat în ser în ultimele 1-2 săptămâni de la perioada de incubație și în primele 2-3 săptămâni din perioada clinică. Circulația HBsAg în sânge poate fi limitată la câteva zile, așa că trebuie să vă străduiți pentru o examinare inițială inițială a pacienților. Metoda ELISA permite detectarea HBsAg la mai mult de 90% dintre pacienți. Aproape la 5% dintre pacienți, cele mai sensibile metode de cercetare nu detectează HBsAg, în astfel de cazuri etiologia hepatitei virale B este confirmată de prezența anti-HBcAg JgM sau PCR.

Concentrația serică a HBsAg în toate formele de severitate a hepatitei B la înălțimea bolii are o gamă semnificativă de fluctuații, totuși, există un anumit tipar: în perioada acută există o relație inversă între concentrația HBsAg serică și severitatea bolii.

Concentrațiile mari de HBsAg sunt mai frecvente în formele ușoare și moderate ale bolii. În formele severe și maligne, concentrația de HBsAg în sânge este adesea scăzută, iar la 20% dintre pacienții cu formă severă și la 30% cu un antigen malign în sânge poate să nu fie detectată deloc. Apariția pe acest fundal la pacienții cu anticorpi anti-HBsAg este considerată un semn de diagnostic nefavorabil; se determină în forme maligne de hepatită B.

În cursul acut al hepatitei B, concentrația de HBsAg în sânge scade treptat până la dispariția completă a acestui antigen. HBsAg dispare la majoritatea pacienților în decurs de 3 luni de la debutul unei infecții acute.

O scădere a concentrației de HBsAg cu mai mult de 50% până la sfârșitul celei de-a treia săptămâni a perioadei acute, de regulă, indică o finalizare completă a procesului de infectare. De obicei, la pacienții cu o concentrație ridicată de HBsAg la înălțimea bolii, acesta este detectat în sânge timp de mai multe luni.
La pacienții cu concentrații scăzute de HBsAg dispare mult mai devreme (uneori la câteva zile după debutul bolii). În general, timpul de detectare a HBsAg variază de la câteva zile la 4-5 luni. Perioada maximă de detectare a HBsAg cu un curs neted de hepatită acută B nu depășește 6 luni de la debutul bolii.

HBsAg se găsește la oameni sănătoși, de regulă, în studii profilactice sau accidentale. În astfel de cazuri, sunt examinați și alți markeri ai hepatitei virale B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti-HBeAg și studiul funcției hepatice.

În cazul rezultatelor negative, sunt necesare studii repetate privind HBsAg.
Dacă testele de sânge repetate pentru mai mult de 3 luni indică HBsAg, acest pacient este clasificat ca un pacient cronic cu hepatită virală B.
Prezența HBsAg este destul de comună. Există peste 300 de milioane de transportatori în lume, iar în țara noastră există aproximativ 10 milioane de transportatori.
Terminarea circulației HBsAg cu seroconversie ulterioară (formarea anti-HBs) indică întotdeauna recuperarea - recuperarea organismului.

Un test de sânge pentru prezența HBsAg este utilizat în următoarele scopuri:

pentru diagnosticul de hepatită B acută:

• perioada de incubație;
• boli acute;
• recuperarea precoce;
  

pentru diagnosticul hepatitei virale cronice B;

pentru boli:

• hepatita cronică persistentă;
• ciroza hepatică;

pentru screening-ul și identificarea pacienților din grupurile de risc:

pacienți cu hemotransfuzii frecvente;

pacienți cu insuficiență renală cronică;

pacienți cu hemodializă multiplă;

pacienții cu stări de imunodeficiență, inclusiv SIDA.

Evaluarea rezultatelor cercetării

Rezultatele studiului sunt exprimate calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența HBsAg serică. Un rezultat pozitiv - identificarea HBsAg indică o incubare sau o perioadă acută de hepatită virală acută B, precum și de hepatită virală cronică B.

Anticorpii la antigenul nuclear al virusului hepatitei B JgG (anti-HBcAg JgG)

În mod normal, serul anti-HBcAg este absent în ser.
La pacienții cu JgG anti-HBcAg apar în perioada acută de hepatită virală B și persistă pe tot parcursul vieții. Anti-HBcAg JgG este markerul principal al HBV transferat.

Testele de sânge pentru JgG anti-HBcAg sunt utilizate pentru a diagnostica:

hepatita virală cronică B în prezența antigenului HBs în ser;

virusul hepatitei B.

Evaluarea rezultatelor cercetării

Rezultatul studiului este exprimat calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența serului anti-HBcAg JgG. Un rezultat pozitiv - identificarea JgG anti-HBcAg indică o infecție acută, convalescență sau hepatită virală B transferată anterior.

Antigenul "e" al virusului hepatitei B (HBeAg)

În mod normal, HBeAg din ser este absent.
HBeAg poate fi găsit în serul majorității pacienților cu hepatită virală acută B. De obicei, dispare în sânge înainte de antigenul HBs. Un nivel ridicat de HBeAg în primele săptămâni de boală sau detectarea acestuia pentru mai mult de 8 săptămâni dă motive să suspecteze o infecție cronică.

Acest antigen este adesea detectat în hepatita cronică activă a etiologiei virale. De interes deosebit în definirea HBeAg este faptul că detecția sa caracterizează faza replicativă activă a procesului infecțios. S-a stabilit că concentrațiile ridicate de HBeAg corespund activității ridicate a ADN polimerazei și caracterizează replicarea activă a virusului.

Prezența HBeAg în sânge indică infecția ridicată, adică prezența infecției active cu hepatită B în organismul examinat și este detectată numai în prezența antigenului HBs în sânge. La pacienții cu hepatită cronică activă, medicamentele antivirale sunt utilizate numai când HBeAg este detectat în sânge. Antigenul HBeAg - un marker al fazei acute și replicarea virusului hepatitei B.

Un test de sânge pentru prezența antigenului HBe este utilizat pentru a diagnostica:

perioada de incubație a hepatitei virale B;

perioada prodromală a hepatitei virale B;

perioadă acută de hepatită virală B;

hepatita virală cronică persistentă B.

Evaluarea rezultatelor cercetării

Rezultatul studiului este exprimat calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența HBeAg serică. Un rezultat pozitiv - detectarea HBeAg indică o incubare sau o perioadă acută de hepatită virală acută B sau replicarea continuă a virusului și infecțiozitatea pacientului.

Anticorpii la antigenul "e" al virusului hepatitei B (anti-HBeAg)

Anti-HBeAg în ser este în mod normal absent. Apariția anticorpilor anti-HBeAg indică, de obicei, îndepărtarea intensivă din corp a virusului hepatitei B și infecția minoră a pacientului.

Acești anticorpi apar în perioada acută și persistă până la 5 ani după infectare. În hepatitele cronice persistente, anti-HBeAg se găsește în sângele pacientului împreună cu HBsAg. Seroconversia, adică tranziția HBeAg la anti-HBeAg, cu hepatită cronică activă, mai des favorabilă prognosticului, dar aceeași seroconversie nu îmbunătățește prognosticul transformării hepatice cirotice severe.

Testele de sânge pentru prezența anti-HBeAg sunt utilizate în următoarele cazuri în diagnosticul hepatitei virale B:

stabilirea stadiului inițial al bolii;

infecție acută;

recuperarea precoce;

convalescenta;

recuperarea în etapa ulterioară.

diagnosticul hepatitei virale B transferate recent;

diagnosticul de hepatită virală cronică persistentă B.

Evaluarea rezultatelor cercetării

Rezultatul studiului este exprimat calitativ - pozitiv sau negativ. Un rezultat negativ indică absența anticorpilor la HBeAg în ser. Un rezultat pozitiv îl reprezintă detectarea anticorpilor la HBeAg, ceea ce poate indica stadiul inițial al hepatitei virale acute, perioada acută de infecție, stadiul incipient de convalescență, convalescență, hepatita virală B transferată recent sau hepatita virală persistentă B.

Criteriile pentru prezența hepatitei cronice B sunt:

detectarea sau detectarea periodică a ADN-ului VHB în sânge;

creșterea continuă sau periodică a activității ALT / AST în sânge;

semne morfologice de hepatită cronică în examinarea histologică a biopsiei hepatice.

Detectarea virusului hepatitei B prin PCR (calitativ)

Virusul hepatitei B în sânge este în mod normal absent.
Determinarea calitativă a virusului hepatitei B prin metoda PCR în sânge face posibilă confirmarea prezenței virusului în corpul pacientului și prin aceasta se stabilește etiologia bolii.

Acest studiu oferă informații utile pentru diagnosticarea hepatitei virale acute în stadiul de incubație și în stadiul de dezvoltare timpuriu a bolii, atunci când principalii markeri serologici ai pacientului din sânge pot fi absenți. ADN viral seric este detectat la 50% din pacienți în absența HBeAg. Sensibilitatea analitică a metodei PCR nu este mai mică de 80 de particule virale în 5 μl, ultimul eșantion de detecție ADN, specificitate - 98%.

Această metodă este importantă pentru diagnosticarea și monitorizarea cursului VHB cronic. Aproximativ 5-10% din cazurile de ciroză și alte afecțiuni hepatice cronice sunt cauzate de purtătorul cronic al virusului hepatitei B. Indicatorii activității unor astfel de boli sunt prezența HBeAg și a ADN-ului virusului hepatitei B în sânge.

Metoda PCR face posibilă determinarea în sânge a ADN-ului virusului hepatitei B atât calitativ, cât și cantitativ. Fragmentul determinat în ambele cazuri este secvența unică de ADN a genei proteinei structurale a virusului hepatitei B.

Detectarea ADN-ului virusului hepatitei B în biomaterial folosind PCR este necesară pentru:

rezolvarea unor rezultate serioase ale testelor serologice;

detectarea stadiului acut al bolii comparativ cu infecția sau contactul anterior;

controlul eficacității tratamentului antiviral.

Dispariția ADN-ului hepatitei B din sânge este un semn al eficacității terapiei

Detectarea virusului hepatitei B prin PCR (cantitativ)

Această metodă oferă informații importante despre intensitatea dezvoltării bolii, despre eficacitatea tratamentului și despre dezvoltarea rezistenței la medicamente active.
Pentru diagnosticul de hepatită virală prin PCR în ser se utilizează sisteme de testare a căror sensibilitate este de 50-100 copii într-o probă, ceea ce face posibilă detectarea virusului la o concentrație de 5 x 10-3-104 copii / ml. PCR în hepatita virală B este cu siguranță necesar pentru judecarea replicării virale.

ADN viral seric este detectat la 50% din pacienți în absența HBeAg. Serul de sânge, limfocitele și hepatobiopsia pot servi ca material pentru detectarea ADN-ului virusului hepatitei B.

• Evaluarea nivelului de viremie este după cum urmează:
• mai puțin de 2,10 ^ 5 copii / ml (mai puțin de 2,10 ^ 5 UI / ml) - viremie scăzută;
• de la 2,10-5 copii / ml (2,10-5 IU / ml) la 2,10-6 copii / ml (8,10-5 IU / ml) - viremia medie;
• mai mult de 2,10 ^ 6 copii / ml - viremie ridicată.

Există o relație între rezultatul hepatitei virale acute și concentrația de ADN VHB în sângele pacientului. Cu un nivel scăzut de viremie, procesul de cronizare a infecției este aproape de zero, cu o medie, procesul este cronizat la 25-30% dintre pacienți și, cu un nivel ridicat de viremie, hepatita virală acută acută devine cel mai adesea cronică.

Indicațiile pentru tratamentul interferonului-alfa HBV cronic trebuie considerate prezența markerilor de replicare virală activă (detectarea HBV HBV, HBeAg și ADN HBV în serul de sânge în ultimele 6 luni).

Criteriile de evaluare a eficacității tratamentului sunt dispariția ADN-ului HBEAg și a VHB în sânge, care este de obicei însoțită de normalizarea nivelurilor transaminazelor și de remisia pe termen lung a bolii. ADN-ul VHB dispare din sânge până la a 5-a lună de tratament la 80% dintre pacienți. Reducerea nivelului de viremie cu 85% sau mai mult până în a treia zi de la începerea tratamentului comparativ cu valoarea inițială este un criteriu rapid și destul de precis pentru prezicerea eficacității terapiei.